一种血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定试剂盒制造技术

一种血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定试剂盒，属于试剂盒技术领域。本发明专利技术的试剂盒，包含R1试剂和R2试剂；R1试剂为含有保护剂和防腐剂的缓冲液；缓冲液为3‑[(1，1‑二甲基‑2‑羟乙基)氨基]‑2‑羟基丙磺酸缓冲液、三乙醇胺缓冲液或者三羟基氨基甲烷‑盐酸缓冲液；保护剂为双甘肽；防腐剂为Proclin300；R2试剂为含有表面活性剂、防腐剂和底物的缓冲液；缓冲液为酒石酸缓冲液；表面活性剂为烷基酚的聚氧乙烯醚和脂肪醇聚氧乙烯醚中的一种或两种；防腐剂为Proclin300；底物为甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺。该试剂盒，试剂开封稳定性和高温稳定性高，重复性好；避免了临床测试的假性结果，检测效率和准确度高。

【技术实现步骤摘要】
一种血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定试剂盒
本专利技术属于试剂盒
，具体涉及一种血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定试剂盒。
技术介绍
Hopsu-Havu和Glenner在1966年从商品酶制品AcylaseⅠ中首先发现并分离得到了甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(Glycyl-proline-dipeptidylaminopeptidase，GPDA)，嗣后又证实了鼠肝、鼠肾、猪肾、人和各种动物血清、人唾液腺和唾液、牛和人的牙髓和牙龈等组织中都有GPDA存在。GPDA主要存在于人体的唾液腺、颌下腺等组织中，唾液及血液中也含有此酶。GPDA的主要作用为水解位于肽链N-末端的甘氨酰脯氨酸和其他氨基酸之间的肽链。肝疾病患者的血清中该酶活力增加，而胃癌患者减少。原发性肝癌(PHC)和继发性肝癌病人血清中GPDA活性明显高于慢性肝炎、肝硬化、胆石症、阻塞性黄疸及正常对照组。急性肝炎、慢活肝、肝硬化、阻塞性黄疸等，血清GPDA可有不同程度升高，升高幅度不及肝癌病人。但重症肝炎、酒精性肝炎时，血清GPDA可高于肝癌病人。胃癌病人血清GPDA明显下降，一般在正常人的1/2左右。其他良性胃肠道病变。GPDA也可略有下降。下降幅度较大的为胃溃疡，依次为慢性胃炎和十二指肠球部溃疡。胃癌切除后，病人血清GPDA有回升趋势。现有技术中，测定甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶需要的底物为甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺对甲苯磺酸盐，甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺对甲苯磺酸盐直接配制成水溶液后极不稳定，通常为当天使用，这为临床生化测试造成了不便，并且造成了浪费以及成本的增加。因此，提高试剂的稳定性就显得尤为重要。酒石酸(tartaricacid)，是一种羧酸，存在于多种植物中，如葡萄和罗望子，也是葡萄酒中主要的有机酸之一。作为食品中添加的抗氧化剂，可以使食物具有酸味。这一用途与柠檬酸类似。酒石酸与单宁合用，可作为酸性染料的媒染剂，也用于照相行业的某些显影和定影操作，其铁盐具有光敏性，因此可用于制作蓝图。酒石酸能与多种金属离子络合，可作金属表面的清洗剂和抛光剂。在制镜工业中，酒石酸是一个重要的助剂和还原剂，可以控制银镜的形成速度，获得非常均一的镀层。但现有技术中，并没有将酒石酸应用于试剂领域，及提高试剂稳定性的应用。
技术实现思路
本专利技术的目的是解决现有技术甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的检测方法使用的试剂不稳定的技术问题，提供一种血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定试剂盒。本专利技术提供一种血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定试剂盒，包含R1试剂和R2试剂；所述R1试剂为含有保护剂和防腐剂的缓冲液；缓冲液为浓度范围在50-100mM的3-[(1，1-二甲基-2-羟乙基)氨基]-2-羟基丙磺酸(AMPSO)缓冲液、浓度范围在8-10g/L的三乙醇胺缓冲液或者浓度范围在60-100mM的三羟基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲液；保护剂为双甘肽，R1试剂中，保护剂的浓度为5-50mM；防腐剂为Proclin300，R1试剂中，防腐剂的浓度为0.05wt％-0.25wt％；所述R2试剂为含有表面活性剂、防腐剂和底物的缓冲液；缓冲液为浓度范围在20-100mM的酒石酸缓冲液；表面活性剂为烷基酚的聚氧乙烯醚和脂肪醇聚氧乙烯醚中的一种或两种，R2试剂中，表面活性剂的浓度为0.1wt％-3wt％；防腐剂为Proclin300，R2试剂中，防腐剂的浓度为0.05wt％-0.25wt％；底物为甘氨酰脯氨酰对硝基苯，R2试剂中，底物的浓度为6mM。优选的是，所述R1试剂中，缓冲液为浓度是80mM的3-[(1，1-二甲基-2-羟乙基)氨基]-2-羟基丙磺酸缓冲液。优选的是，所述R1试剂中，保护剂的浓度为20mM。优选的是，所述R1试剂中，防腐剂的浓度为0.1wt％。优选的是，所述R2试剂中，酒石酸缓冲液的浓度为50mM。优选的是，所述R2试剂中，表面活性剂为月桂醇聚氧乙烯醚，浓度为2wt％。优选的是，所述R2试剂中，防腐剂的浓度为0.1wt％。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术的血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定试剂盒，使用酒石酸，提高了试剂的开封稳定性和高温稳定性，检测重复性好；有效避免临床测试的假性结果，极大提高了检测效率和准确度，适用于多种全自动生化分析仪，具有更广泛的通用性，便于推广。本专利技术的血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定试剂盒，原材料成本较低，可替代进口试剂，节约病患开支。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对具体实施方式中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。图1为本专利技术实施例1提供的血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定试剂盒的校准曲线。图2为本专利技术提供的血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶试剂盒的使用方法。具体实施方式为了进一步了解本专利技术，下面结合具体实施方式对本专利技术的优选实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述只是为进一步说明本专利技术的特征和优点而不是对本专利技术专利要求的限制。本专利技术的血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定试剂盒，包括R1试剂、R2试剂。其中，R1试剂为含有保护剂和防腐剂的缓冲液；缓冲液为浓度范围在50-100mM的3-[(1，1-二甲基-2-羟乙基)氨基]-2-羟基丙磺酸缓冲液、浓度范围在8-10g/L的三乙醇胺缓冲液或者浓度范围在60-100mM的三羟基氨基甲烷-盐酸缓冲液；保护剂为双甘肽，R1试剂中，保护剂的浓度为5-50mM；防腐剂为Proclin300，R1试剂中，防腐剂的浓度为0.05wt％-0.25wt％；R2试剂为含有表面活性剂、防腐剂和底物的缓冲液；缓冲液为浓度范围在20-100mM的酒石酸缓冲液；表面活性剂为烷基酚的聚氧乙烯醚和脂肪醇聚氧乙烯醚中的一种或两种，R2试剂中，表面活性剂的浓度为0.1wt％-3wt％；防腐剂为Proclin300，R2试剂中，防腐剂的浓度为0.05wt％-0.25wt％；底物为甘氨酰脯氨酰对硝基苯，R2试剂中，底物的浓度为6mM。上述技术方案，R1试剂中，缓冲液优选为浓度是80mM的3-[(1，1-二甲基-2-羟乙基)氨基]-2-羟基丙磺酸缓冲液。上述技术方案，R1试剂中，保护剂的浓度优选为20mM。上述技术方案，R1试剂中，防腐剂的浓度优选为0.1wt％。上述技术方案，R2试剂中，酒石酸缓冲液的浓度优选为50mM。上述技术方案，R2试剂中，表面活性剂优选为月桂醇聚氧乙烯醚，浓度优选为2wt％。上述技术方案，R2试剂中，防腐剂的浓度优选为0.1wt％。本专利技术的血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定试剂盒的检测原理为：在碱性条件下，GPDA催化底物甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺水解，生成甘氨酰脯氨酸和黄色的对硝基苯胺，后者可引起本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定试剂盒，其特征在于，/n包含R1试剂和R2试剂；/n所述R1试剂为含有保护剂和防腐剂的缓冲液；缓冲液为浓度范围在50-100mM的3-[(1，1-二甲基-2-羟乙基)氨基]-2-羟基丙磺酸缓冲液、浓度范围在8-10g/L的三乙醇胺缓冲液或者浓度范围在60-100mM的三羟基氨基甲烷-盐酸缓冲液；保护剂为双甘肽，R1试剂中，保护剂的浓度为5-50mM；防腐剂为Proclin300，R1试剂中，防腐剂的浓度为0.05wt％-0.25wt％；/n所述R2试剂为含有表面活性剂、防腐剂和底物的缓冲液；缓冲液为浓度范围在20-100mM的酒石酸缓冲液；表面活性剂为烷基酚的聚氧乙烯醚和脂肪醇聚氧乙烯醚中的一种或两种，R2试剂中，表面活性剂的浓度为0.1wt％-3wt％；防腐剂为Proclin300，R2试剂中，防腐剂的浓度为0.05wt％-0.25wt％；底物为甘氨酰脯氨酰对硝基苯，R2试剂中，底物的浓度为6mM。/n

【技术特征摘要】
1.血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定试剂盒，其特征在于，
包含R1试剂和R2试剂；
所述R1试剂为含有保护剂和防腐剂的缓冲液；缓冲液为浓度范围在50-100mM的3-[(1，1-二甲基-2-羟乙基)氨基]-2-羟基丙磺酸缓冲液、浓度范围在8-10g/L的三乙醇胺缓冲液或者浓度范围在60-100mM的三羟基氨基甲烷-盐酸缓冲液；保护剂为双甘肽，R1试剂中，保护剂的浓度为5-50mM；防腐剂为Proclin300，R1试剂中，防腐剂的浓度为0.05wt％-0.25wt％；
所述R2试剂为含有表面活性剂、防腐剂和底物的缓冲液；缓冲液为浓度范围在20-100mM的酒石酸缓冲液；表面活性剂为烷基酚的聚氧乙烯醚和脂肪醇聚氧乙烯醚中的一种或两种，R2试剂中，表面活性剂的浓度为0.1wt％-3wt％；防腐剂为Proclin300，R2试剂中，防腐剂的浓度为0.05wt％-0.25wt％；底物为甘氨酰脯氨酰对硝基苯，R2试剂中，底物的浓度为6mM。


2.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘阳，孟令洋，夏冬梅，孙成艳，武振宁，于浩滢，张云，
申请(专利权)人：迪瑞医疗科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林;22