丹参酮ⅡA磺酸钠及其制剂中丹参酮Ⅰ磺酸钠的测定方法技术

本发明专利技术涉及丹参酮ⅡＡ磺酸钠及其制剂中丹参酮Ⅰ磺酸钠定性及定量测定的方法。本发明专利技术是由以下步骤组成：１）采用高效液相色谱法，用十八烷基硅烷键合硅胶、十六烷基硅烷键合硅胶、辛烷基硅烷键合硅胶及氰基键合硅胶的至少一种为填充剂；以甲醇－乙腈－缓冲液为流动相，流动相中甲醇的体积比为０％～９０％，乙腈的体积比为０％～９０％，缓冲液的体积比为５％～９０％，缓冲液的ｐＨ值为２～５；２）将样品注入高效液相色谱仪中，进行色谱分离，紫外检测。本发明专利技术具有精确度高、测量简便、可靠的特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及丹参酮IIA磺酸钠及其制剂中丹参酮I磺酸钠定性及定量测定的方法。
技术介绍
丹参酮IIA为活血化瘀中药丹参的有效成分，具有天然抗氧化作用。由于其难溶于水，肠道吸收差，经磺化后得到丹参酮IIA磺酸钠，具有很好的水溶性，可肌注和静脉给药，能增加冠脉流量，改善缺血区心肌的侧支循环及局部供血，改善缺氧心肌的代谢紊乱，提高心肌耐缺氧能力，抑制血小板聚集及及抗血栓形成，缩小缺血心肌梗死面积，在一定剂量下亦能增强心肌收缩力。用于冠心病、心绞痛、心肌梗死、室性早搏等心血管疾病的治疗。丹参酮IIA磺酸钠及其制剂中常混有丹参酮I磺酸钠，丹参酮IIA磺酸钠国家标准(WS-10001-(HD-0923)-2002)中采用薄层色谱法测定有关物质，采用杂质对照品法控制其中的丹参酮IIA及丹参酮I磺酸钠，两种物质的控制量分别为4.0％。通过试验检验，发现该方法杂质检出灵敏度低，重现性及定量的准确性均不好。另外，上述国家标准中采用分光光度法，以吸收系数测定丹参酮IIA磺酸钠及其制剂中丹参酮IIA磺酸钠的含量，此方法测定存在一定的误差，因为其中的杂质丹参酮I磺酸钠等在丹参酮IIA磺酸钠的测定波长处有吸收，这就造成测定含量的偏差。现有技术中有关采用高效液相色谱法(HPLC)检测丹参酮IIA的报道较多，但基本上采用甲醇一水为流动相，难以对丹参酮IIA磺酸钠、丹参酮IIA及丹参酮I磺酸钠进行有效分离，而用HPLC的方法控制丹参酮IIA磺酸钠及其制剂中丹参酮I磺酸钠含量的方法未见报道。并且对上述三种物质(丹参酮IIA磺酸钠、丹参酮IIA及丹参酮I磺酸钠)采用HPLC的方法在同一体系中控制含量的方法也未见报道。
技术实现思路
为了克服已有技术的不足，本专利技术的目的是要寻找一个能对丹参酮IIA磺酸钠及其制剂中丹参酮I磺酸钠的含量进行精确测定的简便易行的测定方法。本专利技术通过如下步骤实现本专利技术公开了一种丹参酮IIA磺酸钠及其制剂中丹参酮I磺酸钠的测定方法，是由以下步骤组成1)采用高效液相色谱法，用十八烷基硅烷键合硅胶、十六烷基硅烷键合硅胶、辛烷基硅烷键合硅胶及氰基键合硅胶的至少一种为填充剂；以甲醇-乙腈-缓冲液为流动相，流动相中甲醇的体积比为0％～90％，乙腈的体积比为0％～90％，缓冲液的体积比为5％～90％，缓冲液的pH值为2～5；2)将样品注入高效液相色谱仪中，进行色谱分离，紫外检测。上述的测定方法，所述的缓冲液为磷酸盐缓冲液，体积比为5％～50％。所述的缓冲液也可以为三氟乙酸缓冲液，体积比为5％～50％。上述的测定方法，所述的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液，乙腈与磷酸盐缓冲液的体积比为8∶2。上述的磷酸盐缓冲液最好为重量体积比0.2％的磷酸二氢钾溶液，磷酸调pH值至3.0。本专利技术的含量测定方法，对丹参酮IIA磺酸钠中丹参酮I磺酸钠、丹参酮IIA磺酸钠及丹参酮IIA分离良好，峰面积对浓度呈良好的线性关系，可以准确测定丹参酮IIA磺酸钠及其制剂中丹参酮I磺酸钠的含量，并具有测量简便、可靠的特点。附图说明图1为实施例1的色谱2为实施例2的色谱3为实施例3的色谱4为实施例4的色谱5为实施例5的色谱6为实施例6的色谱中，1-丹参酮I磺酸钠，2-丹参酮IIA磺酸钠，3-丹参酮IIA具体实施例方式下面将通过实施例对本专利技术作进一步的描述，这些描述并不是对本
技术实现思路
作进一步的限定。本领域的技术人员应理解，对本
技术实现思路
所作的等同替换，或相应的改进，仍属于本专利技术的保护范围之内。实施例1 色谱条件 色谱柱diamonsil ODS(250×4.6mm，5μm)；流动相乙腈-磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾2.0g，加水1000ml，用磷酸调pH值至3.0)(二组分体积比8∶2)，流速1ml/min；检测波长270nm；进样量20μl。在此色谱条件下，丹参酮I磺酸钠、丹参酮IIA磺酸钠及丹参酮IIA的保留时间分别为5.2分钟、6.0分钟及12.5分钟，各物质分离良好。以丹参酮I磺酸钠的峰面积对浓度作曲线，按最小二乘法计算回归方程和相关系数，相关系数r＝0.9994，说明峰面积对浓度呈良好的线性关系。(见附图1)实施例2 色谱条件 色谱柱symmetryshield RP18(3.9×150mm，5μm)；流动相甲醇-磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢铵3.45g，加水1000ml，用磷酸调pH值至3.3)(二组分体积比65∶35)，流速1ml/min；检测波长270nm；进样量20μl。在此色谱条件下，丹参酮I磺酸钠、丹参酮IIA磺酸钠及丹参酮IIA的保留时间分别为3.7分钟、4.4分钟及21.8分钟，各物质分离良好。以丹参酮I磺酸钠的峰面积对浓度作曲线，按最小二乘法计算回归方程和相关系数，相关系数r＝0.9992，说明峰面积对浓度呈良好的线性关系。(见附图2)实施例3 色谱条件 色谱柱inertsil CN-3(4.6×150mm，5μm)；流动相甲醇-磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢铵3.45g，加水1000ml，用磷酸调pH值至3.3)(二组分体积比65∶35)，流速1ml/min；检测波长270nm；进样量20μl。在此色谱条件下，丹参酮IIA、丹参酮IIA磺酸钠及丹参酮I磺酸钠的保留时间分别为4.1分钟、6.0分钟及6.6分钟，各物质分离良好。以丹参酮I磺酸钠的峰面积对浓度作曲线，按最小二乘法计算回归方程和相关系数，相关系数r＝0.9987，说明峰面积对浓度呈良好的线性关系。(见附图3)实施例4 色谱条件 色谱柱symmetryshield RP18(3.9×150mm，5μm)；流动相乙腈-0.1％三氟乙酸溶液(二组分体积比50∶50)，流速1ml/min；检测波长270nm；进样量20μl。在此色谱条件下，丹参酮I磺酸钠、丹参酮IIA磺酸钠及丹参酮IIA的保留时间分别为3.1分钟、3.5分钟及34.2分钟，各物质分离良好。以丹参酮I磺酸钠的峰面积对浓度作曲线，按最小二乘法计算回归方程和相关系数，相关系数r＝0.9990，说明峰面积对浓度呈良好的线性关系。(见附图4)实施例5 色谱条件 色谱柱diamonsil ODS(250×4.6mm，5μm)；流动相乙腈-甲醇-磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾2.0g，加水1000ml，用磷酸调pH值至3.0)(三组分体积比76∶4∶20)，流速1ml/min；检测波长270nm；进样量20μl。在此色谱条件下，丹参酮I磺酸钠、丹参酮IIA磺酸钠及丹参酮IIA的保留时间分别为6.5分钟、7.7分钟及16.5分钟，各物质分离良好。以丹参酮I磺酸钠的峰面积对浓度作曲线，按最小二乘法计算回归方程和相关系数，相关系数r＝0.9992，说明峰面积对浓度呈良好的线性关系。(见附图5)实施例6 色谱条件 色谱柱diamonsil ODS(250×4.6mm，5μm)；流动相乙腈-甲醇-磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾2.0g，加水1000ml，用磷酸调pH值至3.0)(三组分体积比5∶90∶5)，流速1ml/min；检测波长270nm；进样量20μl。在此色谱条件下，丹参酮I磺酸钠、丹参酮IIA磺酸钠及丹参酮IIA的保留时间分别为6.7分钟、7.6分钟及8.4分钟，各物质分离良好。以丹参酮I磺酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种丹参酮ⅡＡ磺酸钠及其制剂中丹参酮Ⅰ磺酸钠的测定方法，其特征在于：是由以下步骤组成，　　　　１）采用高效液相色谱法，用十八烷基硅烷键合硅胶、十六烷基硅烷键合硅胶、辛烷基硅烷键合硅胶及氰基键合硅胶的至少一种为填充剂；以甲醇－乙腈－缓冲液为流动相，流动相中甲醇的体积比为０％～９０％，乙腈的体积比为０％～９０％，缓冲液的体积比为５％～９０％，缓冲液的ｐＨ值为２～５；　　　　２）将样品注入高效液相色谱仪中，进行色谱分离，紫外检测。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孟凡清，蔡西武，
申请(专利权)人：济南百诺医药科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：88[中国|济南]