诊断病毒感染的方法技术

一种用于诊断没有合并细菌感染的病毒感染的方法，该方法包括测定生物学样品中的Ｃ－反应蛋白和ＭｘＡ蛋白；用于判断没有合并细菌感染的病毒感染的试剂盒，该试剂盒包括用于测定生物学样品中的Ｃ－反应蛋白的试剂和用于测定生物学样品中的ＭｘＡ蛋白的试剂。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及用于和用于判断的试剂盒。
技术介绍
自从1928年发现青霉素以来，就有可能通过抗生素治疗大量的细菌感染，所述抗生素相继问世并且完善。不过，这一事实并不意味着包括细菌感染在内的所有感染都可以治疗。很多感染患者仍然需要治疗，并因此一直需要开发用于选择治疗方法的诊断方法。不过，在目前阶段，在临床上还没有用于区分细菌感染和病毒感染的明确而且快速的方法。迄今为止，为了区分患者的细菌感染和其他感染，采用了患者的症状、外周血白细胞数量和C-反应蛋白值。所述C-反应蛋白是急性期反应物质之一，并且已知是用于诊断和逐步观察各种感染的指标。在健康成年人血液中，所述C-反应蛋白值为0.006mg/dL。当血液中所述C-反应蛋白值为1-10mg/dL时，被诊断为中度增加的疾病，并且，当所述值为10mg/dL或更高时，被诊断为高度增加的疾病。当所述诊断是中度增加的疾病时，除了细菌感染之外，还怀疑患有慢性风湿病，血管炎，风湿热，恶性肿瘤，心肌梗塞，和外伤。另外，当所述诊断是高度增加的疾病时，怀疑患有严重细菌感染和活动的风湿病。如上文所述，利用用于诊断细菌感染的血液中的C-反应蛋白值难于理想地诊断细菌感染。最近，作为病毒感染的特异性指标，MxA蛋白引起了人们的注意。MxA蛋白是由I型干扰素(IFN-α和IFN-β)在淋巴细胞内诱导的，在病毒感染时这种蛋白会增加，但是根本不受诸如IL-1，IL-6和TNF-α的其他炎性细胞因子的影响，这些细胞因子的产量在细菌感染和慢性炎性疾病中会增加。因此，业已考虑将MxA蛋白在淋巴细胞中的表达用于检测所有病毒感染，并且报道了其临床应用的可能性。。在医学领域，存在这样的倾向将抗生素用于被怀疑患有细菌感染的患者。抗生素的这种应用导致了出现多种抗药性细菌的严重问题，如能够抗各种抗生素的甲氧苯青霉素抗性金黄色葡萄球菌(MRSA)。抗生素的适当应用，预计不仅能够预防抗多种药物的细菌的出现，而且还能够抑制医疗成本的增加，这在目前也被认为是一个问题。因此，明确区分病毒感染和细菌感染是重要的，但是，区分这两种感染的方法至今尚属未知。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供用于诊断没有合并细菌感染的病毒感染的方法和用于所述诊断的试剂盒。本专利技术涉及用于诊断没有合并细菌感染的病毒感染的方法，该方法包括测定生物学样品中的C-反应蛋白和MxA蛋白。另外，本专利技术涉及用于诊断没有合并细菌感染的病毒感染的试剂盒，包括用于测定生物学样品中的C-反应蛋白的试剂和用于测定生物学样品中的MxA蛋白的试剂。为了诊断没有合并细菌感染的病毒感染，测定所述C-反应蛋白和MxA蛋白。所述用于测定C-反应蛋白的方法没有特别限制，只要它是于测定C-反应蛋白的方法就行。例子包括利用抗C-反应蛋白的抗体的免疫学测定方法。作为免疫学测定方法，包括任何方法，只要它利用抗原-抗体反应就行，如免疫测定，免疫印迹方法，凝集反应，补体-固定反应，溶血反应，沉淀反应，金胶体方法，层析方法或免疫染色方法，并且优选免疫测定。所述免疫测定是通过利用各种标记过的抗原或抗体检测或测定抗体或抗原的方法。所述方法包括放射免疫测定(RIA)，酶免疫测定(EIA或ELISA)，荧光免疫测定(FIA)，发光免疫测定，物理化学测定(TIA，LAPIA，PCIA)，和流式细胞术等，这些方法的使用取决于标记所述抗原或抗体的方法。作为用于测定C-反应蛋白的方法，优选物理化学测定。具体地讲，所述测定方法是通过将作为抗原的C-反应蛋白与抗体或抗血清结合而进行的，所述抗体特异性地结合在所述C-反应蛋白上，以便形成凝集物，并且检测所述凝集物。其他物理化学测定包括利用毛细管方法进行测定的方法，一维免疫扩散方法，免疫浊度测定，或乳胶免疫浊度测定等。例如，在乳胶免疫浊度测定中，当抗原抗体反应是在通过利用相应的抗原或抗体进行过抗体或抗原固定的粒度为约0.1-1μm的聚苯乙烯乳胶上诱导时，在反应混合物中的散射光加强，而透射光减弱。所述C-反应蛋白可以通过测定吸光度或累计球浊度的改变确定。用于测定C-反应蛋白的具体试剂包括由Kyowa Medex公司生产的Determiner T CRP和ExtelCRP，和由Nitto Boseki公司生产的N-Assay TIA-CRP-H试剂盒等。用于测定MxA蛋白的方法没有特别限制，只要它是于测定MxA蛋白的方法就行。例子包括利用抗MxA蛋白的抗体的免疫学测定方法。作为免疫学测定方法，可以使用任何方法，只要它利用抗原-抗体反应就行，如免疫测定，免疫印迹方法，凝集反应，补体-固定反应，溶血反应，沉淀反应，金胶体方法，层析方法或免疫染色方法。作为用于测定MxA蛋白的方法，优选免疫测定。所述免疫测定是通过利用各种标记过的抗原或抗体检测或测定抗体或抗原的方法。所述方法包括放射免疫测定(RIA)，酶免疫测定(EIA或ELISA)，荧光免疫测定(FIA)，发光免疫测定，物理化学测定(TIA，LAPIA，PCIA)，和流式细胞术等，这些方法的使用取决于标记所述抗原或抗体的方法，并且优选流式细胞术。作为用于流式细胞术的荧光标记，可以使用任何已知的荧光标记(Akira Kawaoi，荧光抗体方法(Keiko Koutai Ho)，由Soft ScienceInc.出版)。例如，可以使用FITC，和RITC等。具体地讲，让能够特异性地结合MxA蛋白的抗体或抗血清与进行石蜡固定的外周淋巴细胞反应，然后让在所述淋巴细胞中表达的能特异性地结合MxA蛋白的抗体与荧光标记的合适的第二抗体反应，并且通过流式细胞术检测荧光强度的差异。本专利技术的用于诊断没有合并细菌感染的病毒感染的试剂盒，包括用于测定C-反应蛋白的试剂和用于测定MxA蛋白的试剂。本专利技术的试剂盒可以是用于测定C-反应蛋白的试剂和用于测定MxA蛋白的试剂的各个独立试剂盒的组合，以及将用于测定C-反应蛋白的试剂和用于测定MxA蛋白的试剂包括在一个试剂盒中的试剂盒。另外，在将用于测定C-反应蛋白的试剂和用于测定MxA蛋白的试剂包括在一个试剂盒中的试剂盒中，各个试剂的共同试剂可以共同使用。所述共同试剂包括用于生物学样品的稀释溶液，抗体固定的固相，反应缓冲液，洗涤液，标记过的第二抗体或其抗体片段，和用于检测标记的试剂等。本专利技术的试剂盒可以与适用于测定的工具组合，以便形成其他试剂盒。即使结构或形式不同，任何试剂盒都包括在本专利技术的试剂盒中，只要它包括基本上与用于测定C-反应蛋白的试剂或用于测定MxA蛋白的试剂的独立组成成分相同的物质或基本上与它的一部分相同即可。用于测定C-反应蛋白的试剂包括与C-反应蛋白反应的抗体，并且，如果必要的话，还包括用于生物学样品的稀释溶液，抗体固定的固相，反应缓冲液，洗涤液，标记过的第二抗体或其抗体片段，用于检测标记的试剂，和C-反应蛋白的标准物质等。与C-反应蛋白反应的抗体没有特殊限制，只要它是C-反应蛋白反应的抗体就行，并且，其例子包括可通过商业渠道获得的山羊，兔、大鼠等的抗人C-反应蛋白多克隆抗体，以及鼠抗人C-反应蛋白单克隆抗体(由SIGMA公司生产)。所述用于生物学样品的稀释溶液包括含有诸如BSA或酪蛋白的蛋白，还包括表面活性剂的水溶液和缓冲液等。所述抗体固定的固相包括一种固相，其中，将抗体或抗体片段固定在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于诊断没有合并细菌感染的病毒感染的方法，该方法包括测定生物学样品中的Ｃ－反应蛋白和ＭｘＡ蛋白。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：宫胁利男，
申请(专利权)人：协和美帝克斯股份有限公司，
类型：发明
国别省市：JP[日本]