利用-氧化氮抑制鼻病毒感染制造技术

产生一氧化氮的化合物或能在原位诱导合成一氧化氮的化合物，它们可以用来抑制鼻病毒感染。一氧化氮能够抑制病毒复制以及细胞因子的合成，特别是促炎症细胞因子的合成。因此，通过增加呼吸道中一氧化氮的治疗手段，可以减缓鼻病毒感染的症状。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及病毒学领域。更具体地，本专利技术涉及人鼻病毒领域。
技术介绍
鼻病毒感染是一般感冒的主要原因(18)，是人发病率最高的呼吸道疾病。近来还有证据表明鼻病毒感染在以下疾病的恶化过程中发挥着重要的作用哮喘(21、22、37)、慢性支气管炎(35)、窦炎(19、50)以及中耳炎(3)。尽管在鼻病毒感染上已经投入了巨额的医疗费用，但是对于病毒感染导致临床症状出现的潜在发病过程还知之甚少。上皮细胞是鼻病毒的主要侵袭位点(6、51)。但是与流感病毒等其他呼吸道病毒不同，上皮细胞在感染后出现的细胞损伤似乎与鼻病毒感染的发病机理无关，因为在感染后的人上皮细胞培养物(49)或者患者鼻黏膜上(53、54)都没有观察到细胞毒性。有鉴于此，研究重点就集中到了这样的思路上，即症状是由于促炎细胞介素的作用引发的，而这些细胞介质正是鼻病毒感染引发产生的。这一设想的证据来源于以下两方面1)对实验诱发或天然发生感冒的受试者研究发现，包括细胞分裂素(36、4)、白介素1(IL-1)(40)以及白介素6(IL-6)在内的几种细胞介素在鼻腔分泌物中的水平升高，以及2)发现用鼻病毒感染纯化的人上皮细胞群，可以引发包括白介素8(IL-8)、白介素6(IL-6)以及粒细胞巨嗜细胞-集落刺激因子(GM-CSF)在内的促炎细胞因子的生成(49、55)，这些因子可能与疾病的发病机理有关。然而，迄今为止，对与上述这些鼻病毒导致产生的细胞因子中的每种有关的特定生化事件还一无所知，并且感冒过程中出现的特定细胞因子以及其他细胞介素的作用还有待研究。专利技术概述本专利技术一个目的是提供减轻鼻病毒感染引发症状的方法。本专利技术另一目的是提供减少鼻病毒复制的方法。本专利技术一个目的是提供减少因鼻病毒诱发生成的细胞因子的方法。本专利技术还有另一目的是提供一种对化合物进行筛选从而鉴定出能用于鼻病毒感染治疗或预防的药物。本专利技术的上述以及其他目的可以通过下述提供一种能够减轻因鼻病毒感染诱发症状的方法来实现，该方法包括向感染鼻病毒的患者施用一种化合物。该化合物能够释放出一氧化氮(NO)。化合物的用量足以减轻与所述感染有关的一种或多种症状。根据本专利技术的另一方面，提供了一种用于减少鼻病毒复制的方法。该方法包括让感染有鼻病毒的人呼吸道上皮细胞与一种化合物接触。所述化合物能够释放出NO。施用足量的化合物可以抑制鼻病毒的复制。根据本专利技术的另一方面，还提供了用于减少因鼻病毒感染诱发生成的细胞因子的方法。该方法包括下述步骤让感染有鼻病毒的人呼吸道上皮细胞与一种化合物接触。所述化合物能够释放出NO。施用足量的化合物可以抑制鼻病毒的复制。本专利技术的另一个实施方案是一种用于减轻鼻病毒诱发症状的方法。该方法包括向感染了鼻病毒的人施用有效量的化合物。所述化合物能够诱导人呼吸道上皮细胞中的一氧化氮合成酶(NOS)，从而减轻感染引发的症状。本专利技术另外还有一个实施方案提供了一种用于减少鼻病毒复制的方法。该方法包括让感染有鼻病毒的人呼吸道上皮细胞与一种化合物接触。所述化合物能够诱导人呼吸道上皮细胞中的NOS。该化合物以能够有效抑制鼻病毒复制的量施用。本专利技术的另一方面还提供了一种减少鼻病毒诱发生成的细胞因子的方法。该方法包括让感染有鼻病毒的人呼吸道上皮细胞与一种化合物接触。所述化合物能够诱导人呼吸道上皮细胞中的NOS。该化合物以能够有效抑制鼻病毒复制的量施用。本专利技术还有另一个实施方案是一种用于测试化合物从中鉴定出能用于治疗或预防一般感冒或与鼻病毒感染有关的其他疾病的侯选药物的方法。该方法包括下述步骤用人鼻病毒感染人呼吸道上皮细胞；让这些细胞与一种待测化合物接触；以及对至少一种促炎或嗜曙红一活性细胞因子的量进行测定，其中一种待测化合物能够减少上述细胞因子的生成量，它就是可以用于预防或治疗人鼻病毒感染的侯选药物。本专利技术的另一个方面是另外一种用于测试化合物从中鉴定出能用于治疗或预防一般感冒或与鼻病毒感染有关的其他疾病的侯选药物的方法。该方法包括下述步骤用人鼻病毒感染人呼吸道上皮细胞；让这些细胞与一种待测化合物接触；对上述呼吸道上皮细胞中复制的鼻病毒基因组的量进行测定，其中一种化合物能够减少被复制的鼻病毒基因组的量，该化合物就是可以用于治疗或预防人鼻病毒感染的侯选药物。根据本专利技术的另一方面，提供了一种用于治疗鼻病毒感染的药物组合物。该组合物包括一种液体制剂，该液体制剂中含有一种能释放出NO的化合物。所述液体制剂是滴鼻剂。本专利技术的另一实施方案是用于将药物组合物施用到人鼻腔中的鼻用喷雾或点滴瓶。这种瓶包括一种液体制剂，该液体制剂中含有一种能释放出NO的化合物。本专利技术另一方面是一种用于将一种抗鼻病毒组合物释放到人呼吸道的吸入器或喷雾器。这种装置包括一种液体制剂，该液体制剂中含有一种能够释放出NO的化合物。因此，本专利技术向本领域提供了用于治疗鼻病毒感染的组合物、装置及方法，而且还提供了用于鉴定其他侯选治疗及预防药物的方法。附图简述附图说明图1用几株人鼻病毒(HRV)分别感染BEAS细胞24小时后细胞因子的生成情况。图1A显示的是IL-8的生成情况，图1B显示的是IL-6的生成情况。图2HRV-14感染的BEAS-2B中，IL-8(左)和IL6(右)的稳定态mRNA水平及蛋白的诱导时程。图2A和图2B显示的是各种细胞因子及持家基因GAPDH的Northern印迹分析。图2C和图2D显示的是光密度比率，图2E和图2F给出的是在标记出的各个时间点生成的蛋白水平。数据出自典型实验(n＝3)。图3HRV-16感染的BEAS-2B中，IL-8(左)和IL6(右)的稳定态mRNA水平及蛋白的诱导时程。图3A和B显示的是各种细胞因子及持家基因GAPDH的典型Northern印迹分析。图3C和3D给出的值是4个实验的光密度比率的平均值±标准误。图3E和3F给出的是各个时间点4个实验生成蛋白的平均值加SEM。星号表示各个数据相对于零时间点对照的显著增加(所有情况均为p＜0.05)。图4放线菌酮没有改变HRV-16感染后1小时测量的IL-8(左)和IL-6(右)的稳定态mRNA水平。图4A和4B显示的是典型Northern印迹实验，图4C和4D显示的是4个实验的光密度比率的平均值±标准误。图5布地奈德(budesonide)(10-7M)对HRV-16感染的BEAS-2B细胞中IL-8(左)和IL-6(右)的稳定态mRNA水平及蛋白的影响。图5A和5B显示的典型Northern印迹实验使用的是感染后1小时提取的mRNA。图5C和5D给出的是来自3个实验的光密度比率的平均值±标准误。图5E和5F给出的是3个实验中感染后7小时生成蛋白平均值±标准误。图6HRV-16感染的BEAS-2B细胞中细胞因子生成受NONOate剂量依赖性抑制。图6A给出的是4个实验中HRV-16感染后4小时和24小时IL8生成的平均值±标准误，图6B显示的是IL-6生成的数据。星号表示在NONOate缺乏情况下感染后同一时间点的生成水平相比有显著抑制(所有情况均为p＜0.05)。图7接种病毒24小时后收获的BEAS-2B上清液中HRV-16的滴度受NONOate剂量依赖性抑制。数据代表来自4个实验的平均值±标准误。星号表示与NONOate缺乏情况下的生成水平相比有显著抑制(所有情况均本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于减缓鼻病毒感染引发症状的方法，该方法包括：向感染了鼻病毒的患者施用有效量的化合物，其中所述的化合物能释放出一氧化氮（ＮＯ）。

【技术特征摘要】
US 1997-7-11 60/052,3071.一种用于减缓鼻病毒感染引发症状的方法，该方法包括向感染了鼻病毒的患者施用有效量的化合物，其中所述的化合物能释放出一氧化氮(NO)。2.权利要求1的方法，其中所述的鼻病毒能够导致一般感冒。3.权利要求1的方法，其中所述的鼻病毒能够导致哮喘。4.权利要求1的方法，其中所述的鼻病毒能够导致窦炎。5.权利要求1的方法，其中所述的鼻病毒能够导致中耳炎。6.权利要求1的方法，其中所述的鼻病毒能够导致支气管炎。7.权利要求1的方法，其中所述的化合物能够以可控制的方式释放NO。8.权利要求1的方法，其中所述的化合物在病理生理pH值下释放NO。9.权利要求1的方法，其中所述的化合物包括一个N2O2-部分。10.权利要求1的方法，其中所述的化合物是3-(2-羟基-2-亚硝基-1-丙基肼基)-1-丙胺。11.权利要求1的方法，其中所述的化合物以滴鼻的方式给药。12.权利要求1的方法，其中所述的化合物以局部方式给药。13.权利要求1的方法，其中所述的化合物以吸入方式给药。14.权利要求1的方法，其中所述的化合物以喷雾方式给药。15.一种用于减少鼻病毒复制的方法让感染有鼻病毒的人呼吸道上皮细胞与一种化合物接触，该化合物能够释放出有效量的NO，从而抑制鼻病毒的复制。16.一种用于减少鼻病毒诱发生成的细胞因子的方法，该方法包括让感染有鼻病毒的人呼吸道上皮细胞与一种化合物接触，该化合物能够释放出有效量的NO，从而抑制细胞因子的生成。17.权利要求16的方法，其中所述的细胞因子是一种促炎症因子。18.权利要求16的方法，其中所述的细胞因子是白介素-8。19.权利要求16的方法，其中所述的细胞因子是白介素-6。20.权利要求15的方法，其中所述的化合物包括一个N2O2-部分。21.权利要求15的方法，其中所述的化合物是3-(2-羟基-2-亚硝基-1-丙基肼基)-1-丙胺。22.权利要求16的方法，其中所述的化合物包括一个N2O2-部分。23.权利要求16的方法，其中所述的化合物是3-(2-羟基-2-亚硝基-1-丙基肼基)-1-丙胺。24.权利要求1的方法，其中所述的化合物是S-亚硝基-1-乙酰青霉胺。25.权利要求15的方法，其中所述的化合物是S-亚硝基-1-乙酰青霉胺。26.权利要求16的方法，其中所述的化合物是S-亚硝基-1-乙酰青霉胺。27.一种用于减缓鼻病毒感染引发症状的方法，该方法包括向感染了鼻病毒的患者施用有效量的化合物...

【专利技术属性】
技术研发人员：SP桑德斯，D普洛德，
申请(专利权)人：约翰斯霍普金斯大学医学院，
类型：发明
国别省市：US[美国]