肝癌诊断的生物标志物及其预后方法技术

本发明专利技术涉及医学分子诊断领域，具体涉及一种蛋白分子作为肝癌生物标志物及其预后方法；肝癌诊断的生物标志物，包括FXR1蛋白，SERPINF1蛋白，MRPS31蛋白，YIPF3蛋白，SNX12蛋白和TMEM70蛋白中的一种或几种蛋白分子。本发明专利技术采用LC‑MS/MS质谱分析法，将大量临床样本进行质谱分析后，在蛋白质检测中筛选出来6个有代表性的蛋白分子。通过癌组织与癌旁组织相应分子含量的差异倍数（大于2或小于0.5）可以确定6个蛋白分子具有良好的检验效益；将FXR1蛋白，SERPINF1蛋白，MRPS31蛋白，YIPF3蛋白，SNX12蛋白和TMEM70蛋白作为生物标志物对被试者进行肝癌诊断，简单易行、诊断过程安全有效、易为病人所接受、诊断标准统一且受主观因素影响较小。

【技术实现步骤摘要】
肝癌诊断的生物标志物及其预后方法
本专利技术涉及医学分子诊断领域，具体涉及一种蛋白分子作为肝癌诊断的生物标志物及其预后方法。
技术介绍
癌症是一种对人类危害极大的疾病，根据相关流行病学资料显示，每年大约会有1100万新发癌症。而在诸多癌症之中，肝癌尤其凶险，其发病率和病死率均较高，分别居世界第五位和第二位。近年来，肝癌的诊断和治疗都取得了相当大的进展，但是目前仍旧有很大一部分患者由于诊断不及时而导致预后不良。有相关的研究显示：在亚洲人群中，能够做到早期诊断（肝癌病灶小于2cm），手术后的5年生存率可以提高到近70%，而如果到了肝癌的中晚期，以目前的诊疗水平其预后仅比胰腺癌略好，5年生存率仅能达到16%。由于尚无有效的早期诊断工具，导致仅有30%-40%的HCC患者能够得到及时的诊断和治疗。目前，甲胎蛋白（AFP）广泛用于临床工作中肝癌的诊断，但是甲胎蛋白的敏感度和特异度均不理想。HCC的诊断还可以依据影像学检查和病理活检，我国是一个乙肝大国，目前患者的定期随诊意识并不高，因此相应的影像学手段也无法定期开展。肝细胞肝癌（HCC）是预后较差的常见恶性肿瘤之一。全球每年新发病例数约65万，其发病率占所有恶性肿瘤的第5位，死亡数约为60万，为所有恶性肿瘤的第3位。肝癌早期症状不明显，具有进展迅速、易早期转移的特点，在临床上早诊困难、预后效果差。当前，B型超声显像、肿瘤标志物甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）的血清含量检查是肝癌筛查的主要方法。然而，B超在小肝癌和肝硬化结节的鉴别上常有困难。甲胎蛋白（AFP）血清水平在诊断肝癌时存在敏感性和特异性较低的缺点，单独用于确诊时的检出率一般只有50%—75%左右。以上方法的局限性极大地限制了肝细胞癌的早期有效诊断，预警作用有限。对于肝细胞癌的早期有效诊断有助于显著提高患者的生存率，因此，开发具有临床早诊潜力的新方法对于降低肝细胞癌的发病率和死亡率具有非常重要的现实意义。从蛋白质水平上讲，一旦机体出现异常（即疾病的早期状态），体内的蛋白质便会有相应的细微改变，然而这一细微改变对疾病发生却有十分重要的作用。目前已证实：无论是肿瘤的出现还是肿瘤的生长过程中都伴随有多种蛋白质的异常表达，因此，肿瘤也是一种蛋白质相关性疾病。肝癌癌前病变是良性病变向恶性病变过渡的移行阶段，是一类具有细胞不典型性和分化异常的增生性病变，持续时间较长。肝硬化－肝癌癌前病变恶性转变促进肝癌的发生、发展，但如果对于肝癌的早期能够进行有效诊断，则有助于显著提高患者的生存率。因此，开发具有临床早期诊断潜力的新方法对于降低肝癌发病率和死亡率具有非常重要的现实意义。
技术实现思路
（一）解决的技术问题针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种蛋白分子作为肝癌生物标志物及其预后方法，采用质谱分析的方法检测生物标志物的含量来诊断肝癌；该方法简单，实用，且通过多种小分子的检测可以更好地提高检测方法的灵敏度与特异性。（二）技术方案为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：肝癌诊断的生物标志物，包括FXR1蛋白，SERPINF1蛋白，MRPS31蛋白，YIPF3蛋白，SNX12蛋白和TMEM70蛋白中的一种或几种蛋白分子。肝癌诊断的生物标志物的预后方法，包括以下步骤：采用LC-MS/MS质谱分析法检测待测样本中FXR1蛋白、SERPINF1蛋白、MRPS31蛋白、YIPF3蛋白、SNX12蛋白或TMEM70蛋白的蛋白质表达量强度值。优选地，样本中FXR1蛋白的蛋白质表达量强度值大于163909524.5，被判为肝癌患者，否则被判为肝硬化患者，且假阳性率为5%。优选地，样本中SERPINF1蛋白的蛋白质表达量强度值大于500436703.5，被判为肝癌患者，否则被判为肝硬化患者，且假阳性率为10%。优选地，样本中MRPS31蛋白的蛋白质表达量强度值大于92966492.5，被判为肝癌患者，否则被判为肝硬化患者，且假阳性率为12.8%。优选地，样本中YIPF3蛋白的蛋白质表达量强度值大于19625579，被判为肝癌患者，否则被判为肝硬化患者，且假阳性率为16.7％优选地，样本中SNX12蛋白的蛋白质表达量强度值大于176599126.5时，被判为肝癌患者，否则被判为肝硬化患者，且假阳性率为15％。优选地，样本中TMEM70蛋白的蛋白质表达量强度值大于291056869时，被判为肝癌患者，否则被判为肝硬化患者，且假阳性率为12.5%。一种用于肝癌的早期诊断、治疗指导及预后判断的试剂盒，包括特异性检测FXR1蛋白的试剂、特异性检测SERPINF1蛋白的试剂、特异性检测MRPS31蛋白的试剂、特异性检测YIPF3蛋白、特异性检测SNX12蛋白的试剂或特异性检测TMEM70蛋白的试剂。优选地，特异性检测FXR1蛋白的试剂是特异性识别FXR1蛋白核酸的引物或探针；特异性检测SERPINF1蛋白的试剂是特异性识别SERPINF1蛋白核酸的引物或探针；特异性检测MRPS31蛋白的试剂是特异性识别MRPS31蛋白核酸的引物或探针；特异性检测YIPF3蛋白的试剂是特异性识别YIPF3蛋白核酸的引物或探针；特异性检测SNX12蛋白的试剂是特异性识别SNX12蛋白核酸的引物或探针；特异性检测TMEM70蛋白的试剂是特异性识别TMEM70蛋白核酸的引物或探针；试剂可用于检测组织样本。（三）有益效果与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：（1）本专利技术采用LC-MS/MS质谱分析方法检测待测样本，将大量临床样本进行质谱分析后，通过将癌组织与癌旁组织相应分子含量的差异倍数（大于2或小于0.5）确定6个蛋白分子具有良好的检验效益。该6个蛋白分子（即FXR1蛋白，SERPINF1蛋白，MRPS31蛋白，YIPF3蛋白，SNX12蛋白和TMEM70蛋白）可以作为诊断肝癌的生物标志物。（2）本专利技术以FXR1蛋白，SERPINF1蛋白，MRPS31蛋白，YIPF3蛋白，SNX12蛋白和TMEM70蛋白为生物标志物对被试者进行肝癌诊断，简单易行、诊断过程安全有效、易为病人所接受、诊断标准统一受个人主观因素影响较小。（3）本专利技术通过质谱分析检测出的生物标志物，该方法可以为日后的抗肝癌药物的研发提供新的治疗靶点和思路。附图说明图1为FXR1蛋白的蛋白质表达量强度值的ROC曲线图；图2为癌组织和癌旁组织中FXR1蛋白的蛋白质表达量强度值图；图3为SERPINF1蛋白的蛋白质表达量强度值的ROC曲线图；图4为癌组织和癌旁组织中SERPINF1蛋白的蛋白质表达量强度值图；图5为MRPS31蛋白的蛋白质表达量强度值的ROC曲线图；图6为癌组织和癌旁组织中MRPS31蛋白的蛋白质表达量强度值图；图7为YIPF3蛋白的蛋白质表达量强度值的ROC曲线图；图8为癌组织和癌旁组织中YIPF3蛋白的蛋白质表达量强度值图；图9为SNX1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.肝癌诊断的生物标志物，其特征在于：包括FXR1蛋白，SERPINF1蛋白，MRPS31蛋白，YIPF3蛋白，SNX12蛋白和TMEM70蛋白中的一种或几种蛋白分子。/n

【技术特征摘要】
1.肝癌诊断的生物标志物，其特征在于：包括FXR1蛋白，SERPINF1蛋白，MRPS31蛋白，YIPF3蛋白，SNX12蛋白和TMEM70蛋白中的一种或几种蛋白分子。


2.肝癌诊断的生物标志物的预后方法，其特征在于，包括以下步骤：采用LC-MS/MS质谱分析法检测待测样本中FXR1蛋白、SERPINF1蛋白、MRPS31蛋白、YIPF3蛋白、SNX12蛋白或TMEM70蛋白的蛋白质表达量强度值。


3.根据权利要求2所述的肝癌诊断的生物标志物的预后方法，其特征在于，样本中FXR1蛋白的蛋白质表达量强度值大于163909524.5，被判为肝癌患者，否则被判为肝硬化患者，且假阳性率为5%。


4.根据权利要求2所述的蛋白分子作为诊断肝癌的生物标志物的预后方法，其特征在于，样本中SERPINF1蛋白的蛋白质表达量强度值大于500436703.5，被判为肝癌患者，否则被判为肝硬化患者，且假阳性率为10%。


5.根据权利要求2所述的蛋白分子作为诊断肝癌的生物标志物的预后方法，其特征在于，样本中MRPS31蛋白的蛋白质表达量强度值大于92966492.5，被判为肝癌患者，否则被判为肝硬化患者，且假阳性率为12.8%。


6.根据权利要求2所述的蛋白分子作为诊断肝癌的生物标志物的预后方法，其特征在于，样本中YIPF3蛋白的蛋白质表达量强度值大于19625579，被判为肝癌患者，否则被判为肝硬化患者，且假阳性率为16.7％。

【专利技术属性】
技术研发人员：张水军，孙耀辉，喻诗哲，张嘉凯，
申请(专利权)人：郑州大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：河南;41