一种用于检测可溶性生长激素表达基因2蛋白的试剂盒制造技术

本公开涉及一种用于检测可溶性生长激素表达基因2蛋白的试剂盒。具体而言，本公开涉及一种检测人样本中sST2浓度和/或含量的胶乳增强免疫浊度检测试剂盒。该试剂盒可以应用于透射光免疫比浊法和散射光免疫比浊法。试剂盒中包含缓冲体系、抗干扰组分、胶乳微球、抗sST2抗体等。本公开的胶乳增强免疫比浊试剂可以检测样本中<400ng/ml范围内的sST2蛋白，灵敏度可达0.1ng/ml，特异性高，准确性，精密度高。能够适用于全自动生化分析仪和散射分析仪，使用方便快捷，成本低，可以应用于临床sST2蛋白的检测。

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测可溶性生长激素表达基因2蛋白的试剂盒
本公开涉及一种用于检测人血液中可溶性生长激素表达基因2及其蛋白产物(sST2)试剂盒。具体而言，本公开涉及一种检测sST2浓度或含量的胶乳增强免疫浊度检测试剂盒。该试剂盒可以应用于透射光免疫比浊法和散射光免疫比浊法。
技术介绍
Tominaga描述了通过在BALB/c-3T3细胞中的生长刺激特异性表达的鼠基因的分离；他们将这些基因之一称作“St2”(代表生长刺激表达基因2)。St2基因编码两种蛋白质产物：ST2，其是可溶性分泌形式；和ST2L，一种与白介素-1受体非常相似的跨膜受体形式。HUGO命名委员会将人同源称为白介素1受体样1(IL1R-L1)。ST2是白介素-1受体家族成员，具有跨膜(ST2L)和可溶性(sST2)两种存在方式。作为Th(辅助性T细胞，helperTcell)，能分泌多种细胞因子。Th均表达CD4，通常所称的CD4+T细胞即指Th。艾滋病病毒能特异性地破坏Th细胞，导致患者免疫系统瘫痪。ST2L具有免疫调节功能，在T细胞介导的免疫性疾病如哮喘和类风湿性关节炎中发挥重要作用。使用ST2L封闭性抗体或sST2会阻断ST2L与配体结合从而下调Th2(Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-10等，主要功能为刺激B细胞增殖并产生免疫球蛋白G1和免疫球蛋白E抗体，与体液免疫有关)。淋巴细胞功能提示sST2具有抑制炎症反应的作用。
技术实现思路
根据本申请的一些实施方案，提供了一种可溶性生长激素表达基因2蛋白的检测试剂盒，其包含：-第一试剂、-第二试剂、-任选地，校准品、-任选地，质控品。在一些实施方案中，第一试剂包含：10mmol/L至500mmol/L缓冲剂，pH范围为5.0至8.0、10mmol/L至700mmol/L离散剂、按w/v计0.05％至5％促凝剂、抗干扰组合物、和任选地，按w/v计0.05％至0.5％防腐剂。在一些实施方案中，第二试剂包含：10mmol/L至500mmol/L缓冲剂、按w/v计0.05％至0.25％胶乳微球、和抗sST2抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，第一试剂和第二试剂中的缓冲剂选自以下的一种或组合：HEPES缓冲液、甘氨酸缓冲液、Tris缓冲液、PBS缓冲液、MOPS缓冲液、硼酸缓冲液。在具体的实施方案中，第二试剂的缓冲剂为硼酸缓冲液，pH9.0。在一些实施方案中，离散剂选自以下的一种或组合：盐离子、硫氰酸盐、有机分散剂、表面活性剂。在一些实施方案中，促凝剂选自以下的一种或组合：聚乙二醇、甲基丙烯酰氧基磷脂胆碱、聚醚二胺。在一些实施方案中，防腐剂选自以下的一种或组合：叠氮化物、PC防腐剂。在一些实施方案中，所述胶乳微球的表面官能团选自以下的一种：羧基、巯基、氯甲基、或无表面官能团。在一些实施方案中，所述胶乳微球的平均粒径为300nm至600nm，优选350nm至450nm。在一些实施方案中，所述抗sST2抗体选自以下的一种或组合：非亲和性IgG抗体、亲和性IgG抗体、IgY抗体。在一些实施方案中，抗sST2抗体源自鼠、兔、羊、禽。在一些实施方案中，抗sST2抗体是单克隆抗体或多克隆抗体。在具体的实施方案中，所述抗原结合片段选自：Fab、Fab’、(Fab’)2、Fv或scFv。在一些实施方案中，所述抗sST2抗体或其抗原结合片段共价结合至所述胶乳微球的表面。在一些实施方案中，所述的抗干扰组合物包含：按w/v计0.1％至10％表面活性剂、和0.5KU/L至10KU/L脂质消化酶。在一些实施方案中，所述表面活性剂选自以下的一种或组合：TritonX、Tween、AEO、Thesit、Brij、NP。在一些实施方案中，所述脂质消化酶选自以下的一种或组合：脂肪酶、甘油三酯氧化酶。在一些实施方案中，胶乳微球表面的封闭剂选自以下的一种或组合：聚乙二醇、聚乙二醇多胺、牛血清白蛋白、葡聚糖凝胶、酪蛋白。在一些实施方案中，第一试剂还包含阻断剂；所述阻断剂选自以下的一种或组合：小鼠血清、鼠IgG、鼠IgM、羊IgG、羊IgM；所述阻断剂的浓度为按w/v计0.1％至5％。在一些实施方案中，校准品包含已知浓度的sST2。在具体的实施方案中，校准品包含25g/mL、50g/mL、100g/mL、200g/mL、或400ng/mLsST2蛋白。在一些实施方案中，质控品包含已知浓度的sST2。在具体的实施方案中，所述质控品包含：30g/mL或100ng/mLsST2蛋白。在一些实施方案中，所述质控品或校准品包含选自以下的缓冲剂：磷酸盐缓冲液、HEPES缓冲液、MOPS缓冲液、MES缓冲液、PIPES缓冲液。在一些实施方案中，所述缓冲剂浓度为5mmol/至250mmol/L；pH为4.0-8.0。所述质控品或校准品还包含按w/v计1.0％至10％的保护剂(例如选自：牛血清白蛋白、糖、醇)。所述质控品或校准品还包含按w/v计0.05％至1.5％的防腐剂(例如选自：叠氮钠、PC、二硫苏糖醇)。在具体的实施方案中，提供一种可溶性生长激素表达基因2蛋白的检测试剂盒，包含：第一试剂，包含200mmol/L氯化钠、1％表面活性剂、0.1％叠氮钠、100mmol/lHPEPS缓冲液，pH8.0；第二试剂，包含按w/v计0.1％的400nm胶乳微球、30μg/ml抗sST2单克隆抗体。在另一具体的实施方案中，提供一种可溶性生长激素表达基因2蛋白的检测试剂盒，包含：第一试剂，包含150mmol/L氯化钠、1％表面活性剂、0.1％叠氮钠、5KU/L脂肪酶、0.5％甲基丙烯酰氧基磷脂胆碱、100mmol/lTris缓冲液，pH7.4；第二试剂包含：按w/v计0.15％的400nm胶乳微球、20μg/mlsST2抗体Fab片段、100mmol/L甘氨酸缓冲液pH8.0、0.1％NaCl、0.5％甲基丙烯酰氧基磷脂胆碱、0.1％NaN3。在另一具体的实施方案中，提供一种可溶性生长激素表达基因2蛋白的检测试剂盒，包含：第一试剂，包含1％表面活性剂、0.1％叠氮钠、5KU/L脂肪酶、2％胆酸钠、5mmol/lCaCl2、2.0％甲基丙烯酰氧基磷脂胆碱、3％阻断剂HBR-8TM、200mmol/lTris缓冲液，pH7.4；第二试剂，包含按w/v计0.15％的400nm胶乳微球、20μg/mlsST2抗体Fab片段、100mmol/L甘氨酸缓冲液pH8.0、0.1％NaCl、0.5％甲基丙烯酰氧基磷脂胆碱、0.1％NaN3。上述试剂盒任选包含校准品和/或质控品，其包含sST2、100mmol/L磷酸缓冲液pH5.5、150mmol/LNaCl、5％BSA、10％山梨醇、0.1％NaN3。根据本申请的实施方案，还提本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种可溶性生长激素表达基因2蛋白的检测试剂盒，其包含：/n-第一试剂、/n-第二试剂、/n-任选地，校准品、/n-任选地，质控品；/n其中，所述第一试剂包含：/n10mmol/L至500mmol/L缓冲剂，pH范围为5.0至8.0、/n10mmol/L至700mmol/L离散剂、/n按w/v计0.05％至5％促凝剂、/n抗干扰组合物、和/n任选地，按w/v计0.05％至0.5％防腐剂；/n所述第二试剂包含：/n10mmol/L至500mmol/L缓冲剂、/n按w/v计0.05％至0.25％胶乳微球、和/n抗sST2抗体或其抗原结合片段；/n所述缓冲剂选自以下的一种或组合：HEPES缓冲液、甘氨酸缓冲液、Tris缓冲液、PBS缓冲液、MOPS缓冲液、硼酸缓冲液；/n优选，所述第二试剂的缓冲剂为硼酸缓冲液，pH9.0；/n所述离散剂选自以下的一种或组合：盐离子、硫氰酸盐、有机分散剂、表面活性剂；/n所述促凝剂选自以下的一种或组合：聚乙二醇、甲基丙烯酰氧基磷脂胆碱、聚醚二胺；/n所述防腐剂选自以下的一种或组合：叠氮化物、PC防腐剂；/n所述胶乳微球的表面官能团选自以下的一种：羧基、巯基、氯甲基、或无表面官能团；/n所述胶乳微球的平均粒径为300nm至600nm，优选350nm至450nm；/n所述抗sST2抗体选自以下的一种或组合：非亲和性IgG抗体、亲和性IgG抗体、IgY抗体；/n所述抗sST2抗体源自鼠、兔、羊、骆驼、禽；/n所述抗sST2抗体是单克隆抗体或多克隆抗体；/n所述抗原结合片段选自：Fab、Fab’、(Fab’)...

【技术特征摘要】
1.一种可溶性生长激素表达基因2蛋白的检测试剂盒，其包含：
-第一试剂、
-第二试剂、
-任选地，校准品、
-任选地，质控品；
其中，所述第一试剂包含：
10mmol/L至500mmol/L缓冲剂，pH范围为5.0至8.0、
10mmol/L至700mmol/L离散剂、
按w/v计0.05％至5％促凝剂、
抗干扰组合物、和
任选地，按w/v计0.05％至0.5％防腐剂；
所述第二试剂包含：
10mmol/L至500mmol/L缓冲剂、
按w/v计0.05％至0.25％胶乳微球、和
抗sST2抗体或其抗原结合片段；
所述缓冲剂选自以下的一种或组合：HEPES缓冲液、甘氨酸缓冲液、Tris缓冲液、PBS缓冲液、MOPS缓冲液、硼酸缓冲液；
优选，所述第二试剂的缓冲剂为硼酸缓冲液，pH9.0；
所述离散剂选自以下的一种或组合：盐离子、硫氰酸盐、有机分散剂、表面活性剂；
所述促凝剂选自以下的一种或组合：聚乙二醇、甲基丙烯酰氧基磷脂胆碱、聚醚二胺；
所述防腐剂选自以下的一种或组合：叠氮化物、PC防腐剂；
所述胶乳微球的表面官能团选自以下的一种：羧基、巯基、氯甲基、或无表面官能团；
所述胶乳微球的平均粒径为300nm至600nm，优选350nm至450nm；
所述抗sST2抗体选自以下的一种或组合：非亲和性IgG抗体、亲和性IgG抗体、IgY抗体；
所述抗sST2抗体源自鼠、兔、羊、骆驼、禽；
所述抗sST2抗体是单克隆抗体或多克隆抗体；
所述抗原结合片段选自：Fab、Fab’、(Fab’)2、Fv、scFv；
所述抗sST2抗体或其抗原结合片段共价结合至所述胶乳微球的表面；
所述校准品包含已知浓度的sST2；
所述质控品包含已知浓度的sST2。


2.根据权利要求1所述可溶性生长激素表达基因2蛋白的检测试剂盒，其中所述的抗干扰组合物包含：
按w/v计0.1％至10％表面活性剂、和
0.5KU/L至10KU/L脂质消化酶；
所述表面活性剂选自以下的一种或组合：TritonX、Tween、AEO、Thesit、Brij、NP；
所述脂质消化酶选自以下的一种或组合：脂肪酶、甘油三酯氧化酶。


3.根据权利要求1所述可溶性生长激素表达基因2蛋白的检测试剂盒，其中所述胶乳微球表面的封闭剂选自以下的一种或组合：聚乙二醇、聚乙二醇多胺、牛血清白蛋白、葡聚糖凝胶、酪蛋白。


4.根据权利要求1所述可溶性生长激素表达基因2蛋白的检测试剂盒，其中所述第一试剂还包含阻断剂；
所述阻断剂选自以下的一种或组合：小鼠血清、鼠IgG、鼠IgM、羊IgG、羊IgM；
所述阻断剂的浓度为按w/v计0.1％至5％。


5.根据权利要求1所述可溶性生长激素表达基因2蛋白的检测试剂盒，其中
所述校准品包含：25g/mL、50g/mL、100g/mL、200g/mL、或400ng/mLsST2蛋白；
所述质控品包含：30g/mL或100ng/mLsST2蛋白；
所述质控品或校准品包含选自以下的缓冲剂：磷酸盐缓冲液、HEPES缓冲液、MOPS缓冲液、MES缓冲液、PIPES缓冲液；
所述缓冲剂浓度为5mmol/至250mmol/L；
所述缓冲剂pH为4.0-8.0；
所述质控品或校准品包含按w/v计1.0％至10％的保护剂，其选自：牛血清白蛋白、糖、醇；
所述质控品或校准品包含按w/v计0.05％至1.5％的防腐剂，其选自：叠氮钠、PC、二硫苏糖醇。


6.根据权利要求1所述可溶性生长激素表达基因2蛋白的检测试剂盒，其是选自以下的试剂盒：
1)第一试剂盒：
第一试剂包含：200mmol/L氯化钠、按w/v计1％表面活性剂、按w/v计0.1％叠氮钠、100mmol/lHPEPS缓冲液，pH8.0；
第二试剂包含：按w/v计0.1％的400nm胶乳微球、30μg/ml抗sST2单克隆抗体；
2)第二试剂盒：
第一试剂包含：150mmol/L氯化钠、按w/v计1％表面活性剂、按w/v计0.1％叠氮钠、5KU/L脂肪酶、按w...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘瑶，刘希，
申请(专利权)人：北京九强生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11