肿瘤特异性动物蛋白制造技术

本发明专利技术公开了ＣＡＳＢ７４３９多肽和多核苷酸、包含它们的免疫原性组合物以及通过重组技术生产这样的多肽的方法。也公开了ＣＡＳＢ７４３９多肽和多核苷酸在诊断学上的使用方法以及用于预防性和治疗性治疗癌症，尤其是结肠直肠癌、自身免疫病和相关病症的疫苗。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及用于诱导针对肿瘤相关抗原的免疫应答的药用组合物和方法。更具体地说，本专利技术涉及多核苷酸(本文称为CASB7439多核苷酸)、由它们编码的多肽(本文称为CASB7439多肽)、用于生产它们的重组材料和方法。另一方面，本专利技术涉及这样的多肽和多核苷酸的使用方法，包括治疗癌症、更特别是结肠直肠癌和自身免疫病和其它相关病症的疗法。另一方面，本专利技术涉及含有CASB7439多肽和多核苷酸的药用组合物、涉及这种组合物的生产方法及其在医药领域的应用。再一方面，本专利技术涉及用本专利技术提供的材料鉴定激动剂和拮抗剂/抑制剂的方法以及用所鉴定的化合物治疗与CASB7439多肽不平衡相关的病症的方法。又一方面，本专利技术涉及用于检测与不适当CASB7439多肽活性或水平相关的疾病的诊断分析。
技术介绍
本专利技术的多肽和多核苷酸被认为是针对肿瘤的专一性预防性或治疗性免疫接种的重要免疫原，因为与在正常细胞中的表达相比，它们在肿瘤中特异性表达或高度过量表达，因此可以通过抗原特异性免疫机制靶向它们，导致破坏肿瘤细胞。它们还可以用于诊断肿瘤细胞的存在。此外，它们在某些情况下不适当的表达可以引起诱导自身免疫、即不适当的免疫应答，通过用所述多肽或多核苷酸适当地接种疫苗可能矫正所述不适当的免疫应答。在这方面，对我们的目的而言，最重要的生物活性是本专利技术多肽的抗原活性和免疫原性活性。本专利技术的一种多肽还可能表现出一种CASB7439多肽的至少一种其它生物活性，它可能被看作是不同于与所述免疫应答相关的治疗性或预防性干涉的治疗性或预防性干涉的靶。
技术实现思路
第一方面，本专利技术涉及CASB7439多肽。这种肽包括分离的多肽，所述多肽包含的一段氨基酸序列在SEQ ID NO2、SEQ ID NO3、SEQID NO7、SEQ ID NO10、SEQ ID NO11、SEQ ID NO12或SEQ IDNO14的全长上分别与SEQ ID NO2、SEQ ID NO3、SEQ ID NO7、SEQ ID NO10、SEQ ID NO11、SEQ ID NO12或SEQ ID NO14的氨基酸序列具有至少70％同一性、优选至少80％同一性、更优选至少90％同一性、再更优选至少95％同一性、最优选至少97-99％同一性，前提是所述分离的多肽不是SEQ ID NO2、SEQ ID NO12或SEQ IDNO14。这种多肽包括含SEQ ID NO3、SEQ ID NO7、SEQ ID NO10和SEQ ID NO11的氨基酸的多肽。本专利技术的其它肽包括分离的多肽，其中所述氨基酸序列在SEQ IDNO2、SEQ ID NO3、SEQ ID NO7、SEQ ID NO10、SEQ ID NO11、SEQ ID NO12或SEQ ID NO14的全长上分别与SEQ ID NO2、SEQ IDNO3、SEQ ID NO7、SEQ ID NO10、SEQ ID NO11、SEQ ID NO12或SEQ ID NO14的氨基酸序列具有至少70％同一性、优选至少80％同一性、更优选至少90％同一性、再更优选至少95％同一性、最优选至少97-99％同一性，前提是所述分离的多肽不是SEQ ID NO2、SEQID NO12或SEQ ID NO14。这种多肽包括SEQ ID NO3、SEQ IDNO7、SEQ ID NO10和SEQ ID NO11的多肽。优选上述多肽通过重组产生。最优选按照本专利技术的多肽是经纯化的，并且基本上不含任何其它蛋白或污染性宿主来源的材料。本专利技术的其它肽包括由包含在SEQ ID NO1中所含序列的多核苷酸编码的分离的多肽。本专利技术也提供CASB7439多肽的免疫原性片段，即CASB7439多肽的一个连续部分，所述免疫原性片段具有与包含下述氨基酸序列的多肽相同或相似的免疫原性特性SEQ ID NO2、SEQ ID NO3、SEQID NO7、SEQ ID NO10、SEQ ID NO11、SEQ ID NO12或SEQ IDNO14。也就是说，所述片段(如有必要，与载体偶联或作为较大融合蛋白的一部分)能够产生识别所述CASB7439多肽的免疫应答。这样的免疫原性片段可以包括例如缺乏N-末端前导序列、跨膜结构域或C-末端锚着结构域的CASB7439多肽。在一个优选的方面，按照本专利技术的CASB7439免疫原性片段包含多肽的基本上全部的胞外结构域，所述多肽在SEQ ID NO2、SEQ ID NO3、SEQ ID NO7、SEQ ID NO10、SEQ ID NO11、SEQ ID NO12或SEQ ID NO14的全长上分别与SEQID NO2、SEQ ID NO3、SEQ ID NO7、SEQ ID NO10、SEQ ID NO11、SEQ ID NO12或SEQ ID NO14的氨基酸序列具有至少70％同一性、优选至少80％同一性、更优选至少90％同一性、再更优选至少95％同一性、最优选至少97-99％同一性。按照本专利技术的免疫原性片段最好包含至少一个表位。掺入CASB7439表位的肽片段通常包含得自SEQ ID NO2的至少7个、优选9个或10个连续氨基酸。优选的表位示于SEQ ID NO16至SEQ ID NO33中。掺入这些表位的肽构成本专利技术的一个优选方面。与这些表位的特征相同的模拟表位(mimotope)和包含这些模拟表位、产生与在CASB7439分子环境中的表位有交叉反应的免疫应答的免疫原，也构成本专利技术的一部分。因此，本专利技术包括包含这些表位本身及其任何模拟表位的分离的肽。模拟表位的含义被定义为与天然CASB7439表位足够相似、以致能够被识别所述天然分子的抗体识别的实体；(Gheysen，H.M.等，1986，Synthetic peptides as antigens.Wiley，Chichester，Ciba foundationsymposium 119，第130-149页；Gheysen，H.M.，1986，MolecularImmunology，23，7，709-715)；或者当与合适载体偶联时能够产生抗体的实体，其中所述抗体与所述天然分子有交叉反应。以上所鉴定的表位的肽模拟表位可以通过添加、缺失或取代选定氨基酸，设计为供特定目的使用。因而，可以对本专利技术的肽进行修饰，以便易于与蛋白质载体缀合。例如，对于某些化学缀合方法，可能理想的是所述表位包括一个末端半胱氨酸。另外，对于与蛋白质载体缀合的肽，可能理想的是包括一个远离所述肽的缀合末端的疏水性末端，以便所述肽的游离未缀合的末端保留与所述载体蛋白质的表面缔合。这降低了所述肽的构象自由度，因而增加了以与在所述完整分子的情况下存在的肽构象最为类似的构象呈递所述肽的机率。例如，所述肽可以被改变成具有一个N-端半胱氨酸和一个C-端疏水性酰胺化尾。另一方面，可以进行一个或多个所述氨基酸的D-立体异构体形式的添加或取代，以产生有益的衍生物，例如增强所述肽的稳定性。本领域技术人员会认识到，这种经修饰的肽或模拟表位可以是全部或部分非肽模拟表位，其中所述组成残基不一定限于20种天然存在的氨基酸。另外，可以通过本领域已知的技术将其环化，以将所述肽限制在密切类似所述肽序列在完整分子环境中的形状的构象。将肽环化的一个优选本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种免疫原性组合物，所述组合物包含安全有效量的ＣＡＳＢ７４３９多肽或其免疫原性片段以及药学上可接受的载体，其中所述ＣＡＳＢ７４３９多肽为ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：２。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：TEV卡贝宗斯尔瓦，JP卡萨特，T科彻，SRJT高利斯，C维纳尔斯Y德巴索尔斯，
申请(专利权)人：TEV卡贝宗斯尔瓦，JP卡萨特，T科彻，SRJT高利斯，C维纳尔斯Y德巴索尔斯，
类型：发明
国别省市：BE[比利时]