用于确定肝素诱导的血小板减少症的规程和装置制造方法及图纸

本发明专利技术采用诸如血栓弹性描记器↑［＊］（ＴＥＧ＊）止血分析仪等止血分析仪对止血过程进行连续实时检测以产生血液止血参数，所述止血过程从初始纤维蛋白形成开始，并包括血小板－纤维蛋白相互作用和溶解。采用所测定的血液止血参数可以确定肝素诱导的血小板减少症Ⅱ复合物（ＨｉＴⅡ）。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于确定肝素诱导的血小板减少症(HiT)的规程和装置。
技术介绍
血液是将氧气和营养物质携带到各组织并带走二氧化碳和各种排泄代谢产物的机体循环组织。全血包含浅黄或灰黄液体，即血浆，其中悬浮有红细胞、白细胞、血小板和止血因子。对于某些外科和内科操作，以及时和有效的方式对患者血液的凝固和溶解(即止血)能力进行准确检测是至关重要的。快速(迅速)而准确地检测异常止血对于下述的适当治疗也是特别重要的，所述治疗为对患有凝血病的患者的治疗，以及需要对患者施用抗凝血剂、抗纤维蛋白溶解剂、血栓溶解剂、抗血小板剂或血液成分的治疗，所施用物质的量的确切确定需要考虑到患者血液中的异常成分或“因子”和可能导致目前止血紊乱的以前止血治疗。止血是动态的涉及许多相互作用因子的极端复杂的过程，所述相互作用因子包括凝固和纤维蛋白溶解蛋白、激活剂、抑制剂以及诸如血小板细胞骨架、血小板细胞质颗粒和血小板细胞表层等细胞成分。因此，在激活过程中没有静止的或孤立工作的因子。凝固过程的起始是血小板聚集(图1a)和酶促反应的初始阶段。凝固过程的最终结果是形成聚合的纤维蛋白(原)纤维的三维网络，该聚合的纤维蛋白(原)的三维网络与血小板糖蛋白IIb/IIIa(GPIIb/IIIa)受体结合一起形成最终的凝块(图1b)。该网络结构的独特性质是它表现为刚性弹性固体，能够抗循环血液的变形剪切力。最终凝块的抗变形剪切力的强度取决于纤维蛋白纤维网络的结构和密度以及参与其中的血小板所施加的作用力。因此，作为激活凝固的结果而形成并粘附于受损的血管系统且抗循环血液的变形剪切力的凝块，实质上是一种为提供“临时塞子”而形成的机械装置，其在血管愈合过程中抗循环血液的剪切力。所述凝块的动力学、强度和稳定性，即其抗循环血液的变形剪切力的物理性能，决定了该凝块发挥止血作用的能力，其阻止出血而不会形成不当的血栓。这正是准备让下述的血栓弹性描记器(Thrombelastograph)(TEG)止血分析系统所要进行的工作，即，检测初始纤维蛋白形成所需的时间、所述凝块达到最大强度所需的时间、实际最大强度以及该凝块的稳定性。自从Helmut Hartert教授于20世纪40年代在德国开发出血液止血分析仪设备以后，这类设备就已经为人们所知。在共同转让的专利号为No.5,223,227和No.6,225,126的美国专利中记载了一种类型的血液止血分析仪，在此通过参考的方式明确地引入所述专利所公开的内容。当血液在类似静脉缓慢血流的低剪切环境下被诱导凝块时，用该设备(TEG止血分析系统)来检测血液的弹性。形成中的凝块的剪切弹性的变化模式使确定凝块形成的动力学以及所形成的凝块的强度和稳定性成为可能；简而言之，使确定形成中的凝块的机械性能成为可能。如上所述，凝块的动力学、强度和稳定性提供了有关凝块完成“机械工作”能力的信息，所述机械工作即抗循环血液的变形剪切力；实质上，凝块是止血的基本结构，TEG止血分析系统可以检测凝块在其结构形成整个过程中执行机械工作的能力。TEG止血分析系统以非孤立或静止的方式，从检测起始的时间到初始纤维蛋白形成，经由凝块速度加快阶段和通过借助血小板GPIIb/IIIa受体的纤维蛋白血小板结合的最终凝块强度以及凝块溶解，以全血成分的净产物形式连续检测患者止血的全部阶段。肝素是最广泛使用的抗凝血剂处方药之一并且已经非常成功。但是，肝素也有一些潜在的不利影响。和任何其它抗凝血剂一样，也存在出血的危险。肝素还与骨质疏松症、皮肤反应和称为肝素诱导的血小板减少症(HiT)的疾病的危险性增加有关。经观测，HiT以两种形式发生。第一种即I型或非免疫HiT(HiTI)经常发现于接受全剂量静脉内的未分馏肝素的患者中。HiT I中由肝素诱导的血小板计数的下降是暂时性的，即使继续进行肝素疗法，也不会产生任何不利的影响，并且所述血小板计数的下降在肝素可溶解的范围内是自我限制性的。这主要是肝素直接与血小板结合的结果。II型或免疫介导的HiT(HiT II)是抗原-抗体反应的结果。在HiT II中，由于患者的血液频繁地接触肝素，因此可以形成肝素诱导的抗体。肝素和血小板因子4(PF4)具有很高的亲和性。PF4一旦与肝素分子结合，就会暴露出抗原决定簇，该抗原决定簇引发免疫系统并产生免疫球蛋白G(IGH)。IGH抗体通过Fc片段结合到抗原和血小板上。相邻的Fc受体在血小板膜上的占据引起血小板的剧烈激活，导致血小板数下降(血小板减少症)和白色凝块血栓形式的血栓症，从而引起高风险的发病率和死亡率。此处肝素-PF4-IGH称为HiT II复合物。用于HiT II的实验室诊断的测定主要有两类激活(功能性)测定和抗原测定。功能性测定包括血小板聚集测定和5-羟色胺释放测定。在实验室中进行的血小板聚集测定具有超过90％的特异性。缺点是灵敏度低，低于35％，即相对较高的假阴性概率。5-羟色胺释放测定检测5-羟色胺从血小板聚集体的释放。其依赖于在存在肝素的情况下来自患者的血小板的聚集。该测定具有高灵敏度和高特异性。缺点是该测定技术上要求高并涉及放射性物质的使用。在各种可行的功能性测定中，据认为采用洗涤血小板的血小板聚集反应和血小板5-羟色胺释放是最准确的。另一类测定是抗原测定。肝素-PF4酶联免疫吸附测定(ELISA)依赖于HiT IGH抗体对肝素-PF4复合物的特异性。对于检测肝素诱导的抗体，所述测定比5-羟色胺释放测定灵敏10倍。但是，肝素-PF4ELISA费用高而且耗时。该测定还比功能性测定更容易对临床上非显著性抗体产生反应，因此具有较低的特异性，即相对较高的假阳性。因此，大部分用于HiT II诊断的可行的实验室检验费用高、耗时、经常自相矛盾而且在灵敏度和特异性上不稳定。由于用额外的肝素或血小板治疗HiT II患者存在相关的发病率和死亡率风险，因此在怀疑是HiT II时临床医生必须经常不必要地转而推荐使用另外一种抗凝血剂来代替肝素。然而，其它物质所需的费用更高，并且难以或不可能检测抗凝血程度以给病人正确用药来防止缺血性事件。这些抗凝血剂还缺乏使它们的抗凝血作用逆转的必要物质，这可能导致无法控制手术后的出血。因此，需要用于确定肝素诱导的血小板缺少症的方法和装置。附图说明图1a是表示血小板聚集机制的图示。图1b是表示纤维蛋白/血小板网络的图示。图2是根据本专利技术优选实施方案的止血分析仪的示意图。图3是说明由图2所示的止血分析仪产生的止血概况的图。图4是根据本专利技术的一个实施方案的止血分析仪的示意图。图5是说明根据本专利技术实施方案的规程和装置获得的几种止血概况。
技术实现思路
根据本专利技术的优选实施方案，采用止血分析仪(例如可由Haemoscope Corp.，Niles，Illinois获得的血栓弹性描记器(TEG)止血分析仪)连续实时地检测从初始纤维蛋白形成，经由血小板-纤维蛋白GPIIb/IIIa结合和溶解的止血过程。虽然为确定患者是否具有肝素诱导的血小板减少症(HiT)而对具体规程和装置进行讨论，但是应该理解，本专利技术在与HiT有关或无关的其它诊断技术方面具有实用性。根据本文描述的本专利技术的实施方案，根据本专利技术的规程采用止血分析仪利用患者全血或利用正常供血者富含血小板的血浆(PRP)与HiT II本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种确定肝素诱导的血小板减少症Ⅱ复合物（ＨｉＴ　　Ⅱ）的方法，该方法包括：　　　　在存在肝素时检测第一血样以确定第一血样的特征；　　　　在不存在实质性血小板激活时检测第二血样以确定第二血样的特征；和　　　　将所述第一血样的特征与所述第二血样的特征进行比较以确定ＨｉＴ　　Ⅱ的存在。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：伊莱科恩，罗斯林科恩，罗杰C卡罗尔，
申请(专利权)人：希缪司构普公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]