制备与筛选改变特异性蛋白酶的方法技术

一种鉴别断裂底物序列蛋白酶的方法，其中包括，生成蛋白酶序列库，其中相对于野生型支架序列、序列库的每个成员具有Ｎ种变异的蛋白酶支架；测定序列库每个成员断裂底物序列的活性；然后，将每个成员的活性与序列库平均活性相比较；由此，鉴别出具有最高断裂活性的蛋白酶；其中Ｎ是正整数。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及制备并筛选在特定底物序列断裂靶蛋白的蛋白酶的方法。蛋白酶是识别靶蛋白内氨基酸或者氨基酸底物序列的蛋白降解酶。基于识别底物序列，蛋白酶催化了靶蛋白内肽键的水解或者断裂。基于肽键在靶蛋白全长序列范围内的位置，这种靶蛋白的水解可以使其钝化。通过蛋白质工程可以改变蛋白酶的特异性。如果蛋白酶设计成识别靶蛋白内底物序列或者(1)改变功能的蛋白，即通过基于催化肽键水解使靶蛋白钝化，并且(2)认定或者并未认定，靶蛋白是特殊疾病或者多种疾病的分子介入点，那么工程蛋白酶具有通过蛋白水解-介导的治疗效果。特别是，蛋白酶可以设计成断裂跨膜与细胞因子结合区域之间的受体。因此，起到将蛋白受体栓在细胞表面或者环区域的茎状区域从多肽链的球状结构功能区分开。 在一具体实施方式中，需要断裂的靶蛋白涉及病症，并且在特定底物序列断裂靶蛋白可以用于治疗上述病症。 在一具体实施方式中，蛋白酶断裂了涉及类风湿性关节炎的蛋白。例如，蛋白酶断裂了在跨膜功能区域与细胞因子结合功能区域之间的肿瘤坏死因子受体。这种断裂可以钝化上述受体。因此，通过抑制肿瘤坏死因子(TNF)的作用可以治疗类风湿性关节炎。 蛋白酶断裂了与活本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：杰克·内盖耶，克里斯·撒安斯，桑德拉·沃·拉格斯，查尔斯·S·克雷克，
申请(专利权)人：催化剂生物科学有限公司，加利福尼亚大学董事会，
类型：发明
国别省市：