将样品中蛋白错误折叠疾病的蛋白聚集体定量的方法技术

技术编号:25233431 阅读:46 留言:0更新日期:2020-08-11 23:20
本发明专利技术涉及将复杂样品中蛋白错误折叠疾病的蛋白聚集体定量的方法。公开了装置、试剂盒以及该装置和试剂盒的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】将样品中蛋白错误折叠疾病的蛋白聚集体定量的方法本专利技术涉及将样品中蛋白错误折叠疾病的蛋白聚集体定量的方法。现有技术从现有技术中已知色谱分离方法,例如尺寸排阻色谱法和基于超速离心法的分离方法,以使混合物中的蛋白彼此分离。借助不同的离心技术,可以例如将具有β淀粉样蛋白的样品分级,以使得在不同级分中存在不同的β淀粉样蛋白物类。然后可以将它们通过ELISA、蛋白印迹、UV-VIS、质谱或SDS-PAGE进行分析,如例如由Funke等人已知(S.A.Funke,T.vanGroen,I.Kadish,D.Bartnik,L.Nagel-Steger,O.Brener,T.Sehl,R.Batra-Safferling,C.Moriscot,G.Schoehn,A.H.C.Horn,A.Muller-Schiffmann,C.Korth,H.Sticht,D.Willbold.OralTreatmentwiththeD-EnantiomericPeptideD3ImprovesthePathologyandBehaviorofAlzheimer'sDiseaseT本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.将样品中蛋白错误折叠疾病的蛋白聚集体定量的方法,/n其特征在于以下步骤:/na) 将针对蛋白错误折叠疾病单体的捕获分子A布置在基底上;/nb) 选择包含蛋白错误折叠疾病聚集体的复杂样品,其中该聚集体在聚集体表面上具有单体表位;/nc) 从样品中去除不溶成分;/nd) 使根据步骤c)的包含蛋白错误折叠疾病聚集体的样品在基底的一部分上与捕获分子A接触,并且将其中包含的单体布置在捕获分子A上;/ne) 使校准标准在基底的另一部分上与捕获分子A接触并布置在其上,其中在校准标准的表面上布置着要检测的蛋白错误折叠疾病的特定数量的单体;/nf) 使针对蛋白错误折叠疾病单体的至少一种捕获分子B与样品的聚集...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171123 DE 102017010842.01.将样品中蛋白错误折叠疾病的蛋白聚集体定量的方法,
其特征在于以下步骤:
a)将针对蛋白错误折叠疾病单体的捕获分子A布置在基底上;
b)选择包含蛋白错误折叠疾病聚集体的复杂样品,其中该聚集体在聚集体表面上具有单体表位;
c)从样品中去除不溶成分;
d)使根据步骤c)的包含蛋白错误折叠疾病聚集体的样品在基底的一部分上与捕获分子A接触,并且将其中包含的单体布置在捕获分子A上;
e)使校准标准在基底的另一部分上与捕获分子A接触并布置在其上,其中在校准标准的表面上布置着要检测的蛋白错误折叠疾病的特定数量的单体;
f)使针对蛋白错误折叠疾病单体的至少一种捕获分子B与样品的聚集体和校准标准两者接触,并布置到蛋白错误折叠疾病单体上,其中该捕获分子B可以发出可探测的信号;
g)将布置在样品聚集体上的一种或多种捕获分子B的信号与布置在校准标准上的捕获分子B的信号进行比较,以将样品聚集体定量,其中步骤a)至g)不必相继进行。


2.根据前一项权利要求所述的方法,其特征在于,选择与蛋白错误折叠疾病单体的相同靶区域结合的分子作为根据步骤a)的捕获分子A和根据步骤f)的捕获分子B。


3.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其特征在于,选择单克隆抗体作为捕获分子A和作为捕获分子B。


4.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其特征在于,选择包含至少两种针对蛋白错误折叠疾病单体的单克隆抗体的捕获分子B。


5.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其特征在于,在步骤b)中使用含有阿尔茨海默氏痴呆的β淀粉样蛋白单体的复杂样品。


6.根据前一项权利要求所述的方法,其特征在于,使用单克隆抗体作为步骤a)中的捕获分子A和作为步骤f)中的捕获分子B,它们以β淀粉样蛋白3-8作为单体的相同靶区域。


7.根据前一项权利要求所述的方法,其特征在于,在步骤e)中,将具有蛋白错误折叠疾病聚集体的尺寸的颗粒用作校准标准。


8.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其特征在于,在步骤e)中,将在颗粒表面上具有要检测的聚集体的特定数量的单体的颗粒用作校准标准。


9.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其特征在于,在步骤e)中,将具有约20nm尺寸和表面上约30个β淀粉样蛋白单体的二氧化硅纳米颗粒用作校准标准。


10.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其特征在于,在步骤b)中,选择动物,特别是患有阿尔茨海默氏痴呆的转基因小鼠的脑匀浆作为复杂样品。


11.用于将复杂样品中蛋白错误折叠疾病的蛋白聚集体定量的装置,其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员:C扎菲乌D维尔博尔德B卡斯
申请(专利权)人:于利奇研究中心有限公司
类型:发明
国别省市:德国;DE

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