LINC02178作为宫颈癌的诊治标志物的应用制造技术

本发明专利技术公开了LINC02178作为宫颈癌的诊治标志物的应用，本发明专利技术的实验证明：与对照组织相比，LINC02178在宫颈癌组织中表达量低。本发明专利技术还公开了LINC02178可以用于制备治疗宫颈癌的药物。本发明专利技术的研究成果提供了一种新的宫颈癌临床诊断方法，同时提供了一种治疗宫颈癌的药物新靶标。

【技术实现步骤摘要】
LINC02178作为宫颈癌的诊治标志物的应用
本专利技术涉及生物医学领域，更具体地，本专利技术涉及LINC02178作为宫颈癌的诊治标志物的应用。
技术介绍
宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤，在女性生殖器官肿瘤中占首位。根据世界卫生组织2014年统计数据，宫颈癌的年新发病例约为52.8万例，年死亡例数约为26.6万例，其中85％的患者均发生在在发展中国家，且农村高于城市。我国是宫颈癌发病的大国，根据国家肿瘤中心公布的最新癌症统计数据，2015年我国的宫颈癌新发病例约为9.89万例，年死亡例数约为3.05万例，并且该数据呈现逐年上升且发病年轻化的趋势[ChenW,ZhengR,BaadePD,etal.CancerstatisticsinChina,2015[J].CACancerJClin,2016,66(2):115-132]。宫颈癌的发生与多种因素密切相关，如早婚、早育、多产及性生活紊乱等，但人乳头状瘤病毒(Humanpapillomavirus，HPV)感染被认为是宫颈癌发病的必要条件，99.7％的宫颈癌患者HPV筛查呈阳性，且HPV持续感染患者罹患宫颈癌的风险是HPV阴性者的250多倍[WentzensenN,ArbynM.HPV-basedcervicalcancerscreening-facts,fiction,andmisperceptions[J].PrevMed,2017,98:33-35l；TorreLA,IslamiF,SiegelRL,etal.Globalcancerinwomen:burdenandtrends[J].CancerEpidemiolBiomarkersPrev,2017]。自上世纪七八十年代首次明确HPV感染是宫颈癌发病重要的成因后，学者们针对HPV感染诱发宫颈癌发病的机制展开深入研究，并因此开发出了针对宫颈癌的诊断方法和治疗策略，包括敏感特异的癌前诊断方法、靶向性的免疫预防措施以及治疗方法，极大的改善了宫颈癌患者生存及生活质量。随着现代生物检测技术的发展和肿瘤发病机制的不断深入研究，涉及肿瘤发生的多种生物学过程中的多种分子，如核酸、蛋白质、糖类、脂类、小分子代谢物乃至血液中游离的肿瘤细胞，均可作为重要的肿瘤标志物，给临床预防、诊断和治疗提供明确的依据。在宫颈癌中，目前己经发现了一些肿瘤标志物用于宫颈癌的临床预防。Ki-67和p16INK4a是两种常见的用于分析肿瘤细胞增殖状态以及肿瘤恶性程度的分子标志物。其中Ki-67在静默GO期细胞不表达，而高表达于G1,S,G2和M期细胞，因此其可广泛用于分析细胞的增殖活性来评估肿瘤进程[EndlE,GerdesJ.TheKi-67protein:fascinatingformsandanunknownfunction[J].ExpCellRes,2000,257(2):231-237]；同时，由于其表达谱系广泛，作为特异性的肿瘤标志物仍具有一定的缺陷，临床尚需其他分子标志物辅助诊断。p16INK4a作为一种周期调节蛋白，可特异性与CDK4和CDK6结合从而抑制其活性以及下游pRb的磷酸化，调节细胞周期进行及细胞分化过程；有研究发现，p16INK4a表达与HR-HPV持续感染以及宫颈肿瘤病理分级呈正相关，对于患者术后HPV的清除以及持续感染具有一定的指导价值[KohJ,EndersGH,DynlachtBD,etal.Tumour-derivedp16allelesencodingproteinsdefectiveincell-cycleinhibition[J].Nature,1995,375(6531):506-510]。ProExC抗体(BD公司)可特异性的识别因HPV感染而诱导的胞核蛋白MCM2以及拓扑异构酶TOP2A复合物。在宫颈腺体和鳞状细胞不典型增生中，E7癌基因诱导的细胞S期基因会促进TOP2A和MCM2在细胞核内高表达，同时TOP2A可与6个MCM2分子结合形成稳定的结构滞留于细胞核[SantinAD,ZhanF,BignottiE,etal.GeneexpressionprofilesofprimaryHPV16-andHPV18-infectedearlystagecervicalcancersandnormalcervicalepithelium:identificationofnovelcandidatemolecularmarkersforcervicalcancerdiagnosisandtherapy[J].Virology,2005,331(2):269-291]。因其在正常宫颈上皮细胞中不表达，而在HPV诱导的增殖活跃的鳞状细胞内显著高表达，临床上可用于区分不典型增生与鳞状细胞发育不完全或萎缩等类似改变。HPVDNA完整性和稳定性主要是由衣壳蛋白L1与L2蛋白共同形成一个稳定的保护壳来维持。其中，L1蛋白还可通过识别宿主细胞上的相应受体，促进病毒颗粒侵染粘膜基底膜带细胞或宫颈上皮细胞。在HPV侵染的轻度至中度不典型增生过程中会持续检测到L1蛋白的表达，但是随着宫颈癌化程度进展L1蛋白的表达会逐渐消失[McmurrayHR,MccanceDJ.Humanpapillomavirustype16E6activatesTERTgenetranscriptionthroughinductionofc-MycandreleaseofUSF-mediatedrepression[J].JVirol,2003,77(18):9852-9861]。因此HPV-L1表达消失提示病毒基因组己整合在宿主基因组，可用于宫颈癌CIN3期的诊断。Lanminin-5是一种与肿瘤侵袭密切相关的肿瘤标志物，在多种不同类型恶性肿瘤中Lanminin-5基因的表达常与肿瘤的进展密切相关。在宫颈癌的发生过程中，Laminin-5主要表达在肿瘤的早期阶段，特别是在微小浸润的皮损处，因此其可用于宫颈鳞状细胞浸润早期的检测。MIB-I具有与Ki-67类似的表达模式，即在显著的高表达于GINS各期的增殖状态活跃的肿瘤细胞，结合Ki-67检测可用于辅助分析肿瘤细胞所处的周期状态。因此MIB-1是另一重要的检测不典型增生过程中细胞增殖活性的一个重要指标。综上所述，目前虽然己有多种肿瘤标志物用于临床宫颈癌的诊断，但是己有肿瘤标志物因在正常情况下组成性表达、或在非恶性肿瘤疾病中水平也升高，缺乏肿瘤特异性。因此，亟待寻找肿瘤特异性抗原作为生物标志，用于临床宫颈癌的早期诊断和预后判定。
技术实现思路
根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了检测LINC02178表达的产品在制备诊断宫颈癌的工具中的应用。进一步，上面所提到的检测产品包括：通过反转录PCR、实时定量PCR、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测LINC02178的表达水平以诊断宫颈癌的产品。进一步，所述通过反转录PCR检测LINC02178表达水平以诊断宫颈癌的产品至少包括一对特异扩增LINC02178的引物；所述通过实时定量PCR检测LINC02178表达水平本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测LINC02178表达的产品在制备诊断宫颈癌的工具中的应用；优选地，通过反转录PCR、实时定量PCR、原位杂交、芯片、或高通量测序平台检测LINC02178表达水平以诊断宫颈癌的产品。/n

【技术特征摘要】
1.检测LINC02178表达的产品在制备诊断宫颈癌的工具中的应用；优选地，通过反转录PCR、实时定量PCR、原位杂交、芯片、或高通量测序平台检测LINC02178表达水平以诊断宫颈癌的产品。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述通过反转录PCR检测LINC02178表达水平以诊断宫颈癌的产品至少包括一对特异扩增LINC02178的引物；所述通过实时定量PCR检测LINC02178表达水平以诊断宫颈癌的产品至少包括一对特异扩增LINC02178的引物；所述通过原位杂交检测LINC02178表达水平以诊断宫颈癌的产品包括：与LINC02178的核酸序列杂交的探针；所述通过芯片检测LINC02178表达水平以诊断宫颈癌的产品包括与LINC02178的核酸序列杂交的探针。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述通过实时定量PCR检测LINC02178表达水平以诊断宫颈癌的产品至少包括的一对特异扩增LINC02178的引物如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示。


4.一种用于诊断宫颈癌的工具，其特征在于，所述工具能够通过检测样本中LINC02178的表达来诊断宫颈癌。


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【专利技术属性】
技术研发人员：杨承刚，孙耀兰，
申请(专利权)人：青岛泱深生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37