肝细胞癌的复发预测及治疗中lncRNA01622的应用制造技术

本发明专利技术首次证实lncRNA01622的高表达能够作为诊断或预测HCC复发的指标；并且可喜的是，沉默lncRNA01622能够预防或治疗肝癌，对抗癌细胞成瘤有显著的抑制效果。本发明专利技术为此提出两方面的应用：实施检测LNCRNA01622表达水平的试剂在制备肝细胞癌患者复发诊断或复发预测的试剂的应用，以及沉默LNCRNA01622的试剂在制备肝癌预防或治疗药物的应用。这些应用为肝细胞癌的临床预防及治疗提供新的标志物及治疗靶点。

【技术实现步骤摘要】
肝细胞癌的复发预测及治疗中lncRNA01622的应用
本专利技术属于生物医药领域，更具体地涉及肝细胞癌的复发预测及治疗中lncRNA01622的应用。
技术介绍
肝细胞癌(HepatocellularCarcinoma,HCC)是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，也是肿瘤相关死亡的第四主因。尽管近年来HCC在系统性治疗方面取得了巨大的进步，但是HCC患者的5年生存率仍然不超过20％。造成HCC患者生存率低下的主要原因是出现局部和远处肿瘤的复发。近年来，长链非编码RNA(longnoncodingRNA,lncRNA)在肿瘤发生发展中的作用逐渐成为研究热点。与miRNA功能相似，lncRNA是一类长度大于200核苷酸且不具备编码作用的RNA。但相对于miRNA靶向作用于靶基因3’非编码区(3’-UTR)这一简单的作用机制，lncRNA通过多种生物学调控作用，多层面参与转录调控、转录后表观遗传调控及翻译水平调控。lncRNA的主要作用机制包括：1.影响编码蛋白基因上游启动子区的转录，调控其表达水平；2.作为miRNAs的吸附分子，阻断miRNA对靶基因的抑制或降解，调控miRNA靶基因的表达；3.作为结构组分，lncRNA可与蛋白质结合，调节相应蛋白的活性或细胞内定位。目前，大量的研究证实lncRNA涉及调控肿瘤细胞多种生物学功能。因此，寻找HCC早期复发相关的lncRNA，探索其在HCC复发过程中的生物学功能及其分子机制，将为HCC的临床预防及治疗提供新的标志物及治疗靶点。
技术实现思路
专利技术目的：本专利技术的目的是为HCC的临床预防及治疗提供新的标志物及治疗靶点——lncRNA01622。术语解释：“LINC01622”(longintergenicnon-proteincodingRNA1622，lncRNA01622)，EntrezGene:285768，本文LINC01622表达水平主要包括LINC01622的转录水平，lncRNA01622基因具有两个转录本，分别为NR_027116和NR_027115，如无特别说明，本文检测lncRNA01622表达水平包括检测NR_027116水平和NR_027115水平。“复发”：是指患者经过治疗，肿瘤病灶清除一段时间后，又出现肿瘤，其通常包括局部复发、区域性复发以及远处复发。“复发预测”是指患者经过治疗，肿瘤病灶清除一段时间后，对未来发生复发的风险进行预测，通常包括预测患者复发风险高低、预测患者无复发生存率，预测患者无复发生存时间等。“复发诊断”是指患者经过治疗，肿瘤病灶清除一段时间后，对患者是否发生复发进行判断或辅助判断。专利技术详述：本专利技术前期通过大量临床标本研究、lncRNA芯片分析、信号通路生物学功能分析等技术手段，意外地发现了HCC复发标志物LINC01622。实施检测LNCRNA01622表达水平的试剂在制备肝细胞癌患者复发诊断或复发预测的试剂的应用。实施检测LNCRNA01622表达水平的试剂用于检测取自肝细胞癌患者的肿瘤样本。优选地方案中，实施检测LNCRNA01622表达水平的试剂用于检测肝细胞癌患者的肝细胞癌组织或肝细胞癌细胞。实施检测LNCRNA01622表达水平的试剂通过采取检测mRNA的方式进行，例如优选的RT-PCR、探针杂交方式。更具体地方案中，所述实施检测LNCRNA01622表达水平的试剂包括与LNCRNA01622杂交的探针或特异性检测LNCRNA01622的引物，探针和引物的设计可根据转录产物序列进行常规设计。在具体地实施方案中，复发诊断可以根据大量临床肝细胞癌患者样本的LNCRNA01622检出水平(如可区分无复发和复发的患者的检测值)，设定适当的阈值，当大于所设阈值，则可判定或辅助判定肝细胞癌患者出现复发。在具体地实施方案中，复发预测可以根据大量临床肝细胞癌患者样本的LNCRNA01622检出水平(如中位值)，设定适当的阈值，当大于所设阈值，则可预测肝细胞癌患者出现复发的风险高。在进一步优选地方案中，所述复发预测包括预测无复发生存率或无复发生存时间。沉默LNCRNA01622的试剂在制备肝癌预防或治疗药物的应用。在一些方案中，所述肝癌预防或治疗药物能够抑制肝癌细胞成瘤。在一些方案中，所述成瘤包括降低肝肿瘤负荷、体积、肿瘤等指标。在一些方案中，所述沉默的方式包括siRNA、shRNA、反义寡核苷酸、CRISPRi或敲除。这里沉默的方式还包括对沉默LNCRNA01622的试剂进行一些成药修饰。具体地方案中，所述肝癌为肝细胞癌。在一些方案中，所述沉默LNCRNA01622的试剂能上调以下任意miRNA：miR-146a-5p、miR-532-5p或miR-940。具体地方案中，沉默LNCRNA01622的试剂能同时上调以下miRNA：miR-146a-5p、miR-532-5p或miR-940，进而发挥抗肝癌作用。专利技术优点：本专利技术首次证实lncRNA01622的高表达能够作为诊断或预测HCC复发的指标；并且可喜的是，沉默lncRNA01622能够预防或治疗肝癌，对抗癌细胞成瘤有显著的抑制效果。本专利技术为此提出两方面的应用：实施检测LNCRNA01622表达水平的试剂在制备肝细胞癌患者复发诊断或复发预测的试剂的应用，以及沉默LNCRNA01622的试剂在制备肝癌预防或治疗药物的应用。这些应用为肝细胞癌的临床预防及治疗提供新的标志物及治疗靶点。附图说明图1：复发与无复发HCC组织样本中lncRNA01622的表达水平；non表示无复发HCC组织样本，Recur表示复发HCC组织样本；图2：LNCRNA01622的表达水平与无复发生存率的关系；L表示LNCRNA01622低表达，H表示LNCRNA01622高表达；图3：高表达或沉默LNCRNA01622对HCC体内成瘤的影响；A为不同细胞中LNCRNA01622的表达情况，B为高表达LNCRNA01622的细胞模型，C为低表达LNCRNA01622的细胞模型，D为移植瘤的外观，E为HCC组织H&E染色，F和G为移植瘤的体积，H和I为移植瘤的重量；图4：高表达或沉默LNCRNA01622对HCC细胞模型的悬浮成球能力和凋亡能力的影响；图5：TargetScan预测分析；图6：高表达LNCRNA01622对HCC细胞中miR-146a-5p、miR-532-5p或miR-940表达水平的影响；图7：沉默LNCRNA01622对HCC细胞中miR-146a-5p、miR-532-5p或miR-940表达水平的影响；图8：高表达miR-146a-5p、miR-532-5p或miR-940对高表达LNCRNA01622细胞的悬浮成球能力和凋亡能力的影响。具体实施方式本专利技术的目的、特征及效果将结合实施例进一步详细描述。应该理解，这些实施例仅用于说明本专利技术，而不用于限定本专利技术的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.实施检测LNCRNA01622表达水平的试剂在制备肝细胞癌患者复发诊断或复发预测的试剂的应用。/n

【技术特征摘要】
1.实施检测LNCRNA01622表达水平的试剂在制备肝细胞癌患者复发诊断或复发预测的试剂的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述实施检测LNCRNA01622表达水平的试剂用于检测肝细胞癌患者的肝细胞癌组织或肝细胞癌细胞。


3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述实施检测LNCRNA01622表达水平的试剂通过采用RT-PCR或探针杂交的方式进行检测。


4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述实施检测LNCRNA01622表达水平的试剂包括与LNCRNA01622杂交的探针或特异...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜春林，周新科，黄冠群，刘阳萍，任栋，
申请(专利权)人：广州医科大学附属第五医院，
类型：发明
国别省市：广东;44