LINC01843作为肝癌诊治标志物的应用制造技术

本发明专利技术公开了LINC01843作为肝癌诊治标志物的应用。本发明专利技术首次发现了LINC01843在肝癌患者中表达上调，提示LINC01843可作为生物标志物用于肝癌的诊疗。本发明专利技术通过实验进一步证实了抑制LINC01843的表达可以显著抑制肝癌细胞的增殖、克隆形成集落数、侵袭转移能力，提示干预LINC01843表达可能成为肝癌治疗的新途径，同时本发明专利技术为肝癌机制的研究提供了理论基础。

【技术实现步骤摘要】
LINC01843作为肝癌诊治标志物的应用
本专利技术属于生物医药领域，涉及LINC01843作为肝癌诊治标志物的应用。
技术介绍
原发性肝癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，其发病率居所有癌症的第六位，死亡率居所有癌症的第二位。根据病理分型，原发性肝癌可分为肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)、肝内胆管细胞癌、肝细胞癌-肝内胆管细胞癌混合型等不同类型。原发性肝癌中超过90％为肝细胞癌。肝癌的发生是一个多步骤、复杂的过程，多是在肝脏既有慢性炎症及其改变了的肝脏微环境基础上，众多癌基因或抑癌基因发生突变，特别是其表达逐渐发生改变，最终诱发肝癌的发生。由于在肝癌的早期，患者多没有典型临床症状和体征，临床上难以发现，而一旦出现典型症状，多已是中、晚期肝癌，此时往往伴随着肝癌的肝内外转移，由于肝癌细胞对化疗的不敏感性，目前对全身播散的肝癌细胞尚无有效治疗方法。随着现代细胞分子生物学的进展，现已证明肝癌的形成多伴随一系列分子及信号通路的异常。因此，从分子水平探索肝癌发生发展的机制，并将特征性分子作为抗肿瘤靶点，可为临床预防和治疗肝癌开辟新的途径。随着高通量测序技术的发展，对肝癌全基因组及转录组测序的结果表明肝癌具有显著的分子特征异质性，如有些肝癌样本中只存在少至5个基因的突变，也有些肝癌样本中存在多至121个基因的突变，但是肝癌中尚没有发现普遍存在的的基因突变。因此基因的表达调控，特别是表观遗传修饰，如DNA甲基化、组蛋白修饰及非编码RNA表达的异常，对肝癌中众多差异表达基因的调控作用值得深入探讨。长链非编码RNA(longnoncodingRNA,1ncRNA)是一类转录本长度超过200nt的，不具有蛋白质编码能力的RNA分子。相对于蛋白编码序列及microRNA，lncRNA的研究还处于起步阶段，其功能有待进一步阐明。最近有研究表明在许多病理情况下，包括肿瘤中，lncRNAs的表达水平发生改变，并且在生理及病理情况下lncRNAs可有多种功能，如调节细胞增殖、凋亡、细胞周期、细胞迁移等。lncRNAs参与基因组印记、染色质修饰、转录调控、mRNA稳定性、蛋白质翻译调节、microRNA功能调节、蛋白质功能调节等多种重要的信号转导调控过程。因此研究lncRNA在肝癌中的作用，对于揭示肝癌发病的分子机制以及肝癌的治疗具有重要的意义。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的之一，提供一种诊断早期肝癌的产品，使患者在早期就得以治疗，进而提高生存率和生活质量。本专利技术的目的之二，提供一种治疗手段和药物组合物，实现肝癌的精准分子治疗。本专利技术的目的之三，提供一种筛选预防或治疗肝癌潜在物质的方法。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了检测LINC01843的试剂在制备诊断肝癌的产品中的应用。所述试剂包括RT-PCR、实时定量PCR、原位杂交、northernblotting、芯片或高通量测序平台检测LINC01843表达水平用试剂。进一步，所述试剂选自：特异性识别LINC01843的探针；或特异性扩增LINC01843的引物。进一步，所述特异性扩增LINC01843的引物序列如SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示。本专利技术提供了一种诊断肝癌的产品，所述产品所述产品包括检测样本中LINC01843表达水平的试剂。所述“样本”包括(但不限于)细胞、组织、脏器、体液(血液、淋巴液等)、消化液、咳痰、肺胞支气管清洗液、尿、粪便等。优选的，所述样本为组织、血液。进一步，所述产品包括芯片、制剂或试剂盒；其中，所述芯片包括固相载体以及固定在固相载体的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测LINC01843转录水平的针对LINC01843的寡核苷酸探针；所述试剂盒包括用于检测LINC01843转录水平的引物或芯片。固相载体可采用基因芯片领域的各种常用材料，例如但不限于尼龙膜，经活性基团(如醛基、氨基等)修饰的玻片或硅片、未修饰的玻片、塑料片等。“探针”指能与另一分子的特定序列或亚序列或其它部分结合的分子。除非另有指出，术语“探针”通常指能通过互补碱基配对与另一多核苷酸(往往称为“靶多核苷酸”)结合的多核苷酸探针。根据杂交条件的严谨性，探针能和与该探针缺乏完全序列互补性的靶多核苷酸结合。探针可作直接或间接的标记，其范围包括引物。杂交方式，包括，但不限于：溶液相、固相、混合相或原位杂交测定法。所述探针具有与靶点基因的特定的碱基序列互补的碱基序列。这里，所谓“互补”，只要是杂交即可，可以不是完全互补。这些多核苷酸通常相对于该特定的碱基序列具有80％以上、优选90％以上、更优选95％以上、特别优选100％的同源性。这些探针可以是DNA，也可以是RNA，另外，可以为在其一部分或全部中核苷酸通过PNA(Polyamidenucleicacid，肽核酸)、LNA(注册商标，lockednucleicacid，BridgedNucleicAcid，交联化核酸)、ENA(注册商标，2′-O,4′-C-Ethylene-bridgednucleicacids)、GNA(Glycerolnucleicacid，甘油核酸)、TNA(Threosenucleicacid，苏糖核酸)等人工核酸置换得到的多核苷酸。本专利技术中基因检测试剂盒或基因芯片可用于检测包括LINC01843在内的多个基因(例如，与肝癌相关的多个基因)的表达水平，将肝癌的多个标志物同时进行检测，可大大提高肝癌诊断的准确率。本专利技术提供了LINC01843在筛选预防或治疗肝癌潜在物质中的应用。进一步，使用LINC01843筛选预防或治疗肝癌潜在物质的方法包括：用候选物质处理表达或含有LINC01843的体系；和检测所述体系中LINC01843的表达；其中，若所述候选物质可降低LINC01843的表达水平(优选显著降低，如低20％以上，较佳的低50％以上；更佳的低80％以上)，则表明该候选物质是预防或治疗肝癌的潜在物质。所述体系选自：细胞体系、亚细胞体系、溶液体系、组织体系、器官体系或动物体系。所述候选物质包括(但不限于)：针对LINC01843或其上游或下游基因设计的干扰分子、核酸抑制物、小分子化合物等。本专利技术提供了LINC01843在制备治疗肝癌的药物组合物中的应用。进一步，所述药物组合物包括LINC01843功能性表达的抑制剂，所述抑制剂能够抑制LINC01843或涉及LINC01843上游或下游途径的物质的表达。进一步，所述抑制剂是针对LINC01843的干扰RNA。干扰RNA包括siRNA、shRNA。在本专利技术中，siRNA可以包括部分纯化的RNA、相当纯的RNA、合成的RNA、或重组产生的RNA、以及通过添加、删除、替换和/或改变一个或多个核苷酸而与天然存在的RNA不同的经改变了的RNA。这样的改变可以包括添加非核苷酸材料至例如siRNA的末端(一个或多个)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测LINC01843的试剂在制备诊断肝癌的产品中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.检测LINC01843的试剂在制备诊断肝癌的产品中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂选自：
特异性识别LINC01843的探针；或
特异性扩增LINC01843的引物。


3.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述特异性扩增LINC01843的引物序列如SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示。


4.一种诊断肝癌的产品，其特征在于，所述产品包括检测样本中LINC01843表达水平的试剂。


5.根据权利要求5所述的产品，其特征在于，所述产品包括芯...

【专利技术属性】
技术研发人员：王冬国，冯继红，
申请(专利权)人：台州市立医院，
类型：发明
国别省市：浙江;33