用于保护以抗猪链球菌的疫苗制造技术

本发明专利技术涉及包含猪链球菌的IgM蛋白酶抗原的疫苗，供保护猪以抗血清型2的猪链球菌的感染和抗血清型9的猪链球菌的感染的方法中使用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于保护以抗猪链球菌的疫苗专利
本专利技术涉及保护猪以抗各种血清型的猪链球菌（Streptococcussuis）细菌致病性感染。专利技术背景猪链球菌（猪链球菌（S.suis））是猪中接触传染性细菌性疾病的主要病原体之一。病原体可引起多种临床综合征，包括脑膜炎、关节炎、心包炎、多发性浆膜炎、败血病、肺炎和猝死。猪链球菌是革兰氏阳性兼性厌氧球菌，最初被定义为兰斯斐尔德（Lancefield）类群R、S、R/S或T。以后，提出了一种基于位于细胞壁中的类型特异性荚膜多糖抗原的新分型系统。这产生了包含35种血清型的系统（Rasmussen和Andresen,1998,“16SrDNAsequencevariationsofsomeStreptococcussuisserotypes”,Int.J.Syst.Bacteriol.48,1063-1065），其中的血清型2、9、1、7和1/2最为普遍。猪群中猪链球菌的控制看来似乎非常困难。猪链球菌是猪的机会共生体。显然，并不是在每一次感染时都触发免疫系统。紧跟在这之后的是，猪链球菌是充分被有荚膜的病原体，并使用毒力因子库来逃避宿主免疫系统。这些特征已共同向开发有效疫苗来对抗这种重要病原体提出了挑战。最近，关于抗猪链球菌的疫苗的综述文章已经发表（MarielaSegura:“Streptococcussuisvaccines:candidateantigensandprogress,ExpertReviewofVaccines,第14卷,2015,第12期,第1587-1608页）。在这个综述中，已搜集并比较了临床现场信息（clinicalfieldinformation）和实验数据，以概述抗猪链球菌的疫苗开发的现状，如下文所概述的。当前使用的疫苗主要是全细胞菌苗。然而，现场报告描述了在疾病控制和管理中的困难，且特别地“疫苗失败（vaccinefailures）”是常见的。携带者猪是主要的传染源，且垂直传递和水平传递两者都与疾病在畜群中的扩散有关。在应激性条件下，例如断奶和运输，将携带者动物与易感动物混合通常导致临床疾病。早期投药的断奶和分开的早期断奶实践没有消除猪链球菌感染。因此，预防疾病的有效控制措施的关键将在于预防/补救性预防（metaphylactic）程序（在允许的场合）和接种。目前，现场免疫工作已集中在商业或自体菌苗的使用上。这些疫苗策略已应用于小猪或母猪。自断奶及以后，由于与断奶亦及后来常见的运输相关的应激，小猪更易感猪链球菌感染。因此，经常使用母猪的分娩前（prepartum）免疫来对小猪尝试且传递被动免疫，并在一生中早期的这些应激性情况下提供抗猪链球菌的保护。此外，母猪接种成本较低且劳动强度较低，因而代表了小猪接种的经济备择方案。然而，可用的结果似乎表明用菌苗进行母猪接种也是一个有争论的问题。在许多情况下，接种的母猪，甚至当在分娩前接种两次时，对接种的反应也不良或根本没有反应，这导致传递到幼崽的母体免疫低。而且即使母体免疫以足够的水平传递，在许多情况下，母源性抗体仍然太低以致于无法在4-7周龄的最关键时期中提供保护。在小猪中，在现场频繁地使用自体菌苗，尤其是在欧洲。它们是从有临床问题的农场分离的强毒株制备的，并应用于同一农场。自体菌苗的缺点之一是缺乏疫苗安全性数据并且可能发生严重的不利反应。采样错误（由于仅使用一头或两头猪或一个或两个样品）可能导致不能鉴定与最近的暴发有关的菌株或血清型。这种失败在地方性畜群中可能尤其成问题。最后，自体菌苗最重要的困境是对它们的实际功效尚缺少研究。由于自体疫苗的应用是根据经验性的，所以使用这些疫苗获得的结果不一致也就不令人惊讶了。本领域还描述了其他实验性疫苗。Kai-JenHsueh等人表明（“ImmunizationwithStreptococcussuisbacterinplusrecombinantSaoproteininsowsconveyspassiveimmunitytotheirpiglets”,BMCVeterinaryResearch,BMCseries–open,inclusiveandtrusted,13:15,2017年1月7日）菌苗+亚基可能是成功接种母猪以给予其小猪保护性免疫的基础。在本领域中也已预期活减毒疫苗。猪链球菌血清型2的未被有荚膜的同基因突变体已被清楚地表明是无毒性的。然而，基于未被有荚膜的血清型2突变体的活疫苗制剂仅诱导对抗死亡率的部分保护，且未能阻止用野生型菌株攻击的猪中临床病征的发展（WisselinkHJ,Stockhofe-ZurwiedenN,HilgersLA等人“Assessmentofprotectiveefficacyofliveandkilledvaccinesbasedonanon-encapsulatedmutantofStreptococcussuisserotype2.”VetMicrobiol.2002,84:155–168）。在最近两三年中，已经报道了抗原性或免疫原性猪链球菌分子的广泛清单，并且已通过使用来自感染的猪或人的恢复期血清和/或实验室产生的免疫血清的免疫蛋白质组学发现了这些中的大多数。WO2015/181356（IDTBiologikaGmbH）已显示，IgM蛋白酶抗原（完整蛋白或仅相当于全部蛋白约35%的高度保守的Mac-1结构域）可以在任选与含菌苗的最初接种（primevaccination）组合的施用两剂IgM蛋白酶抗原的接种方案中的小猪中引发保护性免疫应答。要指出的是，WO2017/005913（IntervaccAB）也描述了IgM蛋白酶抗原（特别是与核苷酸酶融合的IgM蛋白酶多肽）的用途。然而，仅已显示了能够引起血清应答（seroresponse）的性质。在这个国际专利申请中未显示IgM蛋白酶抗原的保护作用。增加提供抗猪链球菌的足够保护的问题的另一个因素是现有疫苗的异源保护的缺乏。例如，PorcilisStrepsuis®是注册的疫苗（可从MSDAnimalHealth和CoopersAnimalHealth获得）以保护猪以抗猪链球菌血清型2。它还通过摄取初乳来被动地保护后代以抗血清型2。同样，如从WO2010/108977中已知的，当将疫苗施用给母猪时，后代似乎具有一些（非常低）水平的抗异源攻击的保护。然而，这种被动保护仅是非常短暂的。紧跟在这之后的是，所述疫苗从未被注册用于通过摄取初乳保护后代以抗任何其他血清型的猪链球菌细菌，因此显然异源保护水平太低以致于无法满足注册标准。这与以下公知常识一致：对于猪链球菌疫苗，不发生抗疫苗中未包含的血清型的细菌的保护。这尤其在2001年12月6日发表的HendrikusJanWisselink的题目为“Streptococcussuisinfectioninpigs:Useofvirulence-associatedmarkersindiagnosticsandvaccines”的PhD论文中得到了证实。在概述（第129页）中其指出，“预防由猪链球菌引起的疾病的策略是通过使用疫苗。杀死的全本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.猪链球菌的IgM蛋白酶抗原，供保护猪以抗血清型2的猪链球菌的致病性感染和抗血清型9的猪链球菌的致病性感染的方法中使用。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171215 EP 17207763.81.猪链球菌的IgM蛋白酶抗原，供保护猪以抗血清型2的猪链球菌的致病性感染和抗血清型9的猪链球菌的致病性感染的方法中使用。


2.根据权利要求1的供使用的IgM蛋白酶抗原，其特征在于所述方法包括仅对猪施用一次抗原。


3.根据前述权利要求任一项的供使用的IgM蛋白酶抗原，其特征在于所述方法包括在最多28日龄向猪施用抗原。


4.根据前述权利要求任一项的供使用的IgM蛋白酶抗原，其特征在于所述方法包括在猪断奶的龄期之前施用抗原。


5.根据前述权利要求任一项的供使用的IgM蛋白酶抗原，其特征在于所述方法包括向具有母体...

【专利技术属性】
技术研发人员：AAC雅各布斯，
申请(专利权)人：英特维特国际股份有限公司，
类型：发明
国别省市：荷兰;NL