一种检测维生素C药物中降解杂质含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测维生素C药物中降解杂质含量的方法，采用高效液相色谱法进行检测，检测条件如下：色谱柱：HILIC色谱柱，流动相：缓冲盐溶液和乙腈的混合液，等度洗脱；检测器：蒸发光散射检测器；所述缓冲盐溶液为甲酸铵溶液、乙酸铵溶液中的一种或按任意比例混合的两种。本发明专利技术能够同时检测出维生素C药物中降解杂质L‑木糖、L－苏糖酸和脱氢VC的含量，灵敏度高，专属性强，保证了维生素C药物的质量控制。

【技术实现步骤摘要】
一种检测维生素C药物中降解杂质含量的方法
本专利技术涉及药物分析
，尤其涉及一种采用高效液相色谱法检测维生素C药物中降解杂质含量的方法，该方法用于检测维生素C原料药及制剂中降解杂质L－苏糖酸、脱氢VC和L－木糖的含量。
技术介绍
维生素C药物中的主药为维生素C，维生素C的化学名称为L-坏血酸，分子式为C6H8O6，分子量为176.13，结构式为：维生素C参与氨基酸代谢、神经递质的合成、胶原蛋白和组织细胞间质的合成，可降低毛细血管的通透性，加速血液的凝固，刺激凝血功能，促进铁在肠内的吸收，促使血脂下降，增加对感染的抵抗力，参与解毒功能，且有抗组胺的作用及阻止致癌物质(亚硝胺)生成的作用。维生素C是一种具有还原性的化合物，易被氧化，因此在接触到氧的环境里，维生素C可降解产生L－苏糖酸和脱氢VC，同时在无氧环境下，维生素C也可发生无氧降解产生L－木糖，L－苏糖酸的结构式为：脱氢VC的结构式为：L－木糖的结构式为：根据国家食品药品监督管理局的要求，应对药品的相关杂质进行控制，但上述降解杂质L－苏糖酸和L－木糖均是基本无紫外吸收的小分子极性化合物，不适合采用普通的紫外检测器进行检测，亦不适合采用气相色谱法检测，而薄层色谱法又无法达到相应的检测灵敏度。因此，有必要研发一种能够同时准确检测维生素C原料药及制剂中降解杂质L－苏糖酸、脱氢VC和L－木糖含量的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于解决现有技术中存在的上述问题，提供一种检测维生素C药物中降解杂质含量的方法，本专利技术能够同时检测出维生素C药物中降解杂质L-木糖、L－苏糖酸和脱氢VC的含量，灵敏度高，专属性强，保证了维生素C药物的质量控制。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种检测维生素C药物中降解杂质含量的方法，其特征在于：采用高效液相色谱法进行检测，检测条件如下：色谱柱：HILIC色谱柱，规格为4.6×250mm，5μm；流动相：缓冲盐溶液和乙腈的混合液，等度洗脱；检测器：蒸发光散射检测器；所述缓冲盐溶液为甲酸铵溶液、乙酸铵溶液中的一种或按任意比例混合的两种。所述混合液中缓冲盐溶液与乙腈的质量比为15—20：80—85。所述缓冲盐溶液的浓度为0.05—0.2mol/L。所述流动相的流速为0.8—1.2ml/min。所述色谱柱的柱温为25—40℃。所述检测器的漂移管温度为80—100℃。所述检测器的气体流速为1.5—3.0L/min。所述的检测方法包括如下步骤：取系统适用性试验溶液、供试品溶液和多组浓度不同的线性对照品溶液各10μl，分别进样，记录色谱图；根据线性对照品溶液的浓度和峰面积，计算线性对照品溶液中各组分浓度的对数值与相应的峰面积对数值的线性回归方程，并用回归方程计算出供试品中各杂质的含量；其中，所述供试品溶液由维生素C药物经稀释剂稀释而成，供试品溶液中维生素C含量为40mg/ml；所述线性对照品溶液由取相同量的脱氢VC对照品储备液、L-木糖对照品储备液和L-苏糖酸钙对照品储备液在10ml量瓶中经稀释剂均匀稀释至刻度而成，多组浓度不同的线性对照品溶液是指各组线性对照品溶液中对照品储备液的取样量不同；所述系统适用性试验溶液由脱氢VC对照品储备液、L-木糖对照品储备液和L-苏糖酸钙对照品储备液混合并经稀释剂稀释而成，系统适用性试验溶液中脱氢VC、L-木糖和L-苏糖酸钙的含量均为60μg/ml。所述脱氢VC对照品储备液由脱氢VC经稀释剂稀释而成，脱氢VC对照品储备液中脱氢VC的含量为1mg/ml；所述L-木糖对照品储备液由L-木糖经稀释剂稀释而成，L-木糖对照品储备液中L-木糖的含量为1mg/ml；所述L-苏糖酸钙对照品储备液由L-苏糖酸钙经水溶解而成，L-苏糖酸钙对照品储备液中L-苏糖酸钙的含量为1mg/ml。所述稀释剂为水与乙腈的混合溶液，且水与乙腈的质量比为40—80：20—60。采用本专利技术的优点在于：1、本专利技术提供了一种维生素C药物中小分子极性化合物杂质含量的新检测方法，各色谱峰之间分离度高，相互之间无干扰，可以同时实现对脱氢VC、L-木糖、L-苏糖酸的准确检测，而且操作简便，容易控制，检测成本低，并具有良好的线性关系，专属性、精密度、灵敏度、耐用性，检测结果准确可靠，为监控维生素C药物中杂质的含量提供了一种行之有效的检测方法，进一步保证了维生素C产品的质量和患者的用药安全。2、本专利技术中所述维生素C药物中还包括其它杂质，如杂质C、杂质D、5-羟甲糠醛、糠醛、异维生素C，其中，杂质C的结构式为：杂质D的结构式为5-羟甲糠醛的结构式为糠醛的结构式为：异维生素C的结构式为但这些杂质均不会影响脱氢VC、L-木糖、L-苏糖酸的准确检测(详见实施例部分的专属性试验)，从而保证了检测结构的准确性。3、本专利技术检测的L-木糖、L-苏糖酸是一类没有紫外吸收的化合物，不适用普通的紫外检测器，因此本专利技术采用蒸发光散射检测器(ELSD)，蒸发光散射检测器是一种通用型质量检测器，可以检测没有紫外吸收的有机物质，消除了常见于传统HPLC检测方法的难点，不同于紫外和荧光检测器，蒸发光散射检测器的响应不依赖于样品的光学特性，任何挥发性低于流动相的样品均能被检测，不受其官能团的影响。4、本专利技术检测的L-木糖、L-苏糖酸是一类极性较强的化合物，在普通反相柱上几乎无保留，因此本专利技术采用亲水性的HILIC色谱柱，HILIC色谱柱是近年来色谱领域研究的热点之一，此类色谱柱对极性化合物有较高的选择性，且性能更优于传统的氨基柱、氰基柱。附图说明图1为实施例1中检测系统适用性试验溶液的色谱图；图2为实施例2中检测系统适用性试验溶液的色谱图；图3为实施例3中检测系统适用性试验溶液的色谱图；具体实施方式本专利技术公开了一种检测维生素C药物中降解杂质含量的方法，采用高效液相色谱法进行检测，检测条件如下：高效液相色谱仪：沃特世E2695；色谱柱：HILIC色谱柱，规格为4.6×250mm，5μm；柱温：25—40℃；流动相：缓冲盐溶液和乙腈的混合液，等度洗脱；流速：0.8—1.2ml/min；检测器：蒸发光散射检测器；检测器的漂移管温度：80—100℃；检测器的气体流速：1.5—3.0L/min；进样量：10μl。其中，所述混合液中缓冲盐溶液与乙腈的质量比为15—20：80—85，所述缓冲盐溶液的浓度为0.05—0.2mol/L，所述缓冲盐溶液为甲酸铵溶液、乙酸铵溶液中的一种或按任意比例混合的两种。所述的检测方法包括如下步骤：1，先制备系统适用性试验溶液、供试品溶液和线性对照品溶液，具体的：所述供试品溶液由维生素C药物经稀释剂稀释而成，供试品溶液中维生素C含量为40mg/ml。所述线性对照品溶液由取相同量的脱氢VC对照品储备液、L-木本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测维生素C药物中降解杂质含量的方法，其特征在于：采用高效液相色谱法进行检测，检测条件如下：/n色谱柱：HILIC色谱柱；/n流动相：缓冲盐溶液和乙腈的混合液，等度洗脱；/n检测器：蒸发光散射检测器；/n所述缓冲盐溶液为甲酸铵溶液、乙酸铵溶液中的一种或按任意比例混合的两种。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测维生素C药物中降解杂质含量的方法，其特征在于：采用高效液相色谱法进行检测，检测条件如下：
色谱柱：HILIC色谱柱；
流动相：缓冲盐溶液和乙腈的混合液，等度洗脱；
检测器：蒸发光散射检测器；
所述缓冲盐溶液为甲酸铵溶液、乙酸铵溶液中的一种或按任意比例混合的两种。


2.如权利要求1所述的一种检测维生素C药物中降解杂质含量的方法，其特征在于：所述混合液中缓冲盐溶液与乙腈的质量比为15—20：80—85。


3.如权利要求2所述的一种检测维生素C药物中降解杂质含量的方法，其特征在于：所述缓冲盐溶液的浓度为0.05—0.2mol/L。


4.如权利要求1所述的一种检测维生素C药物中降解杂质含量的方法，其特征在于：所述流动相的流速为0.8—1.2ml/min。


5.如权利要求1所述的一种检测维生素C药物中降解杂质含量的方法，其特征在于：所述色谱柱的柱温为25—40℃。


6.如权利要求1所述的一种检测维生素C药物中降解杂质含量的方法，其特征在于：所述检测器的漂移管温度为80—100℃。

【专利技术属性】
技术研发人员：冯舟，王佳，张真珍，
申请(专利权)人：成都平和安康医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51