检测维生素C药物中维生素C及异维生素C含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测维生素C药物中维生素C及异维生素C含量的方法，采用高效液相色谱法检测，检测条件如下：色谱柱：HILIC色谱柱；流动相：缓冲盐溶液和乙腈的混合液，等度洗脱；检测器：紫外检测器；所述缓冲盐溶液为甲酸铵溶液、醋酸铵溶液中的一种或按任意比例混合的两种。本发明专利技术在检测过程中能使维生素C与其同分异构体异维生素C良好分离，并能够实现维生素C含量的准确检测。而且操作简便，容易控制，检测成本低，并具有良好的专属性、精密度，检测结果准确可靠，为监控维生素C药物中的主药含量提供了一种行之有效的检测方法，进一步保证了维生素C药物的品质和患者的用药安全。

【技术实现步骤摘要】
检测维生素C药物中维生素C及异维生素C含量的方法
本专利技术涉及药物分析
，尤其涉及一种采用高效液相色谱法检测维生素C药物中维生素C及异维生素C含量的方法，主要用于检测维生素C原料药及制剂中主药维生素C及杂质异维生素C的含量。
技术介绍
维生素C药物中的主药为维生素C，维生素C的化学名称为L-坏血酸，分子式为C6H8O6，分子量为176.13，结构式为：维生素C参与氨基酸代谢、神经递质的合成、胶原蛋白和组织细胞间质的合成，可降低毛细血管的通透性，加速血液的凝固，刺激凝血功能，促进铁在肠内的吸收，促使血脂下降，增加对感染的抵抗力，参与解毒功能，且有抗组胺的作用及阻止致癌物质(亚硝胺)生成的作用。目前国内维生素C药物中维生素C含量的测定均采用容量滴定法进行测定，但维生素C中含有同分异构体(异维生素C)，异维生素C结构式为：在滴定过程中异维生素C同样会消耗滴定液，导致检测结果不准确。另外，现有技术中还公开了专属性更强的高效液相色谱(HPLC)法检测维生素C含量的方法，如中国专利公告号为CN103353499A的现有技术在2013年10月16日公开了一种恒流液相色谱法同时测定古龙酸、古龙酸甲酯和维生素C的方法。该方法采用恒流，对仪器设备要求低。该方法同时测定古龙酸、古龙酸甲酯和维生素C，避免了采用两种或以上方法测定同一样品中的不同组份，方法快速，整个分离过程不足10min，且三种组分的分离度均大于1.5，符合相关色谱法对分离度的要求。但该方法仍不能很好地检出测维生素C药物中维生素C含量，这是因为维生素C结构式中含有多个酸性极性基团，在普通的反相柱上保留较弱，与异维生素C分离不开。因此，有必要使用对极性物质选择性更高的色谱柱，开发出能使维生素C药物中的维生素C与异维生素C良好分离，并实现对维生素C含量及异维生素C含量准确检测的新技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于解决现有技术中存在的上述问题，提供一种检测维生素C药物中维生素C及异维生素C含量的方法，本专利技术在检测过程中能使维生素C与其同分异构体异维生素C良好分离，并能够实现对维生素C药物中维生素C和异维生素C含量的准确检测。而且操作简便，容易控制，检测成本低，并具有良好的专属性、精密度，检测结果准确可靠，为监控维生素C药物中的主药含量及杂质含量提供了一种行之有效的检测方法，进一步保证了维生素C药物的品质和患者的用药安全。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种检测维生素C药物中维生素C及异维生素C含量的方法，其特征在于：采用高效液相色谱法检测，检测条件如下：色谱柱：HILIC色谱柱；流动相：缓冲盐溶液和乙腈的混合液，等度洗脱；检测器：紫外检测器；所述缓冲盐溶液为甲酸铵溶液、醋酸铵溶液中的一种或按任意比例混合的两种。所述混合液中缓冲盐溶液与乙腈的体积比为70—85：15—30。所述缓冲盐溶液的浓度为0.05—0.2mol/L。所述色谱柱的柱温为25—40℃。所述流动相的流速为0.8—1.2ml/min。所述检测器波长为210—280nm。所述缓冲盐溶液的PH值为5.5—7.0，缓冲盐的PH值由氨水与醋酸或甲酸配合调节。所述的检测方法包括如下步骤：(1)分别取维生素C药物与异维生素C的对照品，加稀释剂溶解制成每1ml中含维生素C0.1mg、异维生素C0.3—30μg的混合溶液，作为系统适用性试验溶液，精密量取系统适用性试验溶液10μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图，异维生素C与维生素C色谱峰的分离度应不小于1.5，理论塔板数按维生素C峰计算不低于3000；(2)精密称取维生素C药物和维生素C对照品适量，分别加入步骤(1)所述稀释剂，将维生素C药物稀释成每1ml中分别含维生素C0.1mg、0.5mg的溶液，作为供试品溶液1#与供试品溶液2#；将维生素C对照品稀释成每1ml中含维生素C0.1mg的溶液作为对照品溶液；先分别精密量取供试品溶液1#和对照品溶液各10μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算得出维生素C的含量；再精密量取供试品溶液2#10μl注入高效液相色谱仪，以面积归一化法计算得出异维生素C的含量。所述稀释剂为乙腈与有机酸溶液按任意比例的混合。所述有机酸溶液为醋酸铵溶液或冰醋酸溶液，为醋酸铵溶液时，醋酸铵溶液的浓度为0.05mol/L，PH值为6.0；为冰醋酸溶液时，冰醋酸溶液的体积百分比浓度为0.3％。采用本专利技术的优点在于：本专利技术提供了一种检测维生素C药物中主药维生素C含量及杂质异维生素C含量的新方法，在此检测方法中，由于采用了亲水性的HILIC色谱柱，HILIC色谱柱是近年来色谱领域研究的热点之一，此类色谱柱对极性化合物有较高的选择性，维生素C与异维生素C由于空间构型上的不同，使得二者的极性稍有差异，在亲水性的HILIC色谱柱上二者能完全分离开，因此本方法可排除异维生素C的干扰，实现对维生素C含量的准确检测，同时可实现对维生素C中异维生素C含量的准确检测。而且操作简便，容易控制，检测成本低，并具有良好的专属性、精密度，检测结果准确可靠，为监控维生素C药物中的主药含量提供了一种行之有效的检测方法，进一步保证了维生素C药物的品质和患者的用药安全。附图说明图1为实施例1中检测系统适用性试验溶液的色谱图；图2为实施例2中检测系统适用性试验溶液的色谱图；图3为实施例3中检测系统适用性试验溶液的色谱图；图4为实施例4中检测系统适用性试验溶液的色谱图；图5为实施例5中检测系统适用性试验溶液的色谱图；图6为实施例6中检测系统适用性试验溶液的色谱图；图7为实施例7中检测系统适用性试验溶液的色谱图；具体实施方式实施例1本实施例是最优实施例，具体为：一种检测维生素C药物中维生素C及异维生素C含量的方法，采用高效液相色谱法检测，高效液相色谱的检测条件如下：高效液相色谱仪：沃特世E2695；色谱柱：HILIC色谱柱，优选watersXBridgeAmide，规格为4.6×250mm，5μm；柱温：30℃；流动相：缓冲盐溶液和乙腈的混合液，等度洗脱；流速：1.0ml/min；检测器：紫外检测器；检测波长：268nm；进样量：10μl。其中，所述混合液中缓冲盐溶液与乙腈的体积比为80：20，所述缓冲盐溶液为醋酸铵溶液，缓冲盐溶液的浓度为0.1mol/L，缓冲盐溶液的PH值为6.8，缓冲盐的PH值由氨水与醋酸或甲酸配合调节。所述的检测方法包括如下步骤：(1)分别精密称取维生素C药物与异维生素C的对照品适量，加稀释剂溶解制成每1ml中含维生素C0.1mg、异维生素C0.3μg的混合溶液，作为系统适用性试验溶液。其中，所述稀释剂为乙腈与有机酸溶液按任意比例的混合，优选乙腈与有机酸溶液的体积比为50：本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测维生素C药物中维生素C及异维生素C含量的方法，其特征在于：采用高效液相色谱法检测，检测条件如下：/n色谱柱：HILIC色谱柱；/n流动相：缓冲盐溶液和乙腈的混合液，等度洗脱；/n检测器：紫外检测器；/n所述缓冲盐溶液为甲酸铵溶液、醋酸铵溶液中的一种或按任意比例混合的两种。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测维生素C药物中维生素C及异维生素C含量的方法，其特征在于：采用高效液相色谱法检测，检测条件如下：
色谱柱：HILIC色谱柱；
流动相：缓冲盐溶液和乙腈的混合液，等度洗脱；
检测器：紫外检测器；
所述缓冲盐溶液为甲酸铵溶液、醋酸铵溶液中的一种或按任意比例混合的两种。


2.如权利要求1所述的检测维生素C药物中维生素C及异维生素C含量的方法，其特征在于：所述混合液中缓冲盐溶液与乙腈的体积比为70—85：15—30。


3.如权利要求1所述的检测维生素C药物中维生素C及异维生素C含量的方法，其特征在于：所述缓冲盐溶液的浓度为0.05—0.2mol/L。


4.如权利要求1所述的检测维生素C药物中维生素C及异维生素C含量的方法，其特征在于：所述色谱柱的柱温为25—40℃。


5.如权利要求1所述的检测维生素C药物中维生素C及异维生素C含量的方法，其特征在于：所述流动相的流速为0.8—1.2ml/min。


6.如权利要求1所述的检测维生素C药物中维生素C及异维生素C含量的方法，其特征在于：所述检测器波长为210—280nm。


7.如权利要求1所述的检测维生素C药物中维生素C及异维生素C含量的方法，其特征在于：所述缓冲盐溶液的PH值为5.5—7.0，缓冲盐的PH值由氨水与醋酸或甲酸配合调节。


8.如权利要求1—7中任一项所述的检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯舟，王佳，倪瑛，
申请(专利权)人：成都平和安康医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51