一种测定酚磺乙胺药物中含有的杂质及其主药含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种测定酚磺乙胺药物中含有的杂质及其主药含量的方法，采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以四丁基氢氧化铵水溶液为流动相A，甲醇为流动相B，进行梯度洗脱。能够快速有效的分离酚磺乙胺的所有杂质，为监控酚磺乙胺及其药物提供了有效的检测方法，保证了酚磺乙胺产品质量和用药安全；采用自身对照法进行杂质的定量测定，采用外标法进行基因毒性杂质和主药含量的测定，操作简便，检测成本低，且具有良好的灵敏度，线性，专属性，精密度，准确度，稳定性和耐用性，是控制酚磺乙胺及其药物的有效检测方法。

【技术实现步骤摘要】
一种测定酚磺乙胺药物中含有的杂质及其主药含量的方法
本专利技术涉及药品质量检测
，特别涉及一种测定酚磺乙胺药物中含有的杂质及其主药含量的方法。
技术介绍
酚磺乙胺(Etamsylate)，又名止血敏，临床用于血小板功能不全引起出血和胃肠道出血、脑出血及泌尿道出血等多种出血，并用于预防和治疗术中和术后出血。其结构式为：分子式为：C10H17NO5S；分子量：263.31。酚磺乙胺遇碱不稳定，光照易变色，有关物质也会发生变化。目前没有关于酚磺乙胺有关物质与含量检测方法的专利文献。而在非专利文献中，兰文等人，有一篇关于国产酚磺乙胺的有关物质研究(中南药学2014年10月第12卷第10期)，该研究采用HPLC法，用AgilentZOBAXNH2(4.6×250mm，5μm)色谱柱，以甲醇-0.2％磷酸二氢钾溶液(10：90)位流动相，检测波长220nm，柱温35℃，流速1.0ml/min，对已知杂质进行定性，定量分析。结果显示氢醌出峰时间约为3.5min，酚磺乙胺出峰时间约9.3min。关于酚磺乙胺有关物质含量测定的非专利文献较多。采用液相检测的大概有以下两篇，分别是刘近荣等人的HPLC法测定酚磺乙胺注射液有效成分含量的方法研究(亚太传统医药第8卷第1期)，该方法同兰文等人的研究方法大致相同，只是柱温稍作了修改；任心慈等人的高效液相色谱法测定酚磺乙胺片的含量(安徽医药2009May13(5))，该方法也是采用C18(4.6×250mm，5μm)色谱柱，以甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾为流动相(10：90)；流速为1.0ml/min；检测波长300nm，室温，结果显示酚磺乙胺在4.2min处出峰。关于酚磺乙胺含量测定的方法，除了用上述HPLC方法的，还有杨凤珍等人的可见分光光度法测定药物酚磺乙胺的含量(沧州师范学院学报2015年第31卷第1期)，该方法应用酚磺乙胺在碱性条件下易被空气中的氧氧化成有色化合物，并在470nm处有最大吸收的特点，对其进行定量分析；贺艰等人的拉曼光谱快速检测酚磺乙胺注射液(中国现代应用药学2015年1月第32卷第1期)，该发的测定条件：显微拉曼光谱仪，激发光波长785nm，物镜为·50×，激光功率3mW，信号采集时间为60s，此方法除了对酚磺乙胺含量，还能对其进行鉴别；蔡鹏等人的离子色谱法测定酚磺乙胺注射液的含量(中国药品标准2017年第18卷第4期)，该方法采用离子色谱法，色谱柱为CS17A(4mm×250mm)，保护住为CG17A(4mm×50mm)，检测器采用带DIONEXCSRS3004-mm抑制器电导检测器，流动相为5mmol/L甲磺酸溶液。流量为1ml/min，柱温30℃；最后还有杨凤珍等人的注射液中酚磺乙胺及焦亚硫酸钠含量的同时测定(化学研究与应用2016年11月第28卷第11期)，该方法应用IFIS-D型智能流动注射进样器，MPI-A型毛细管电泳化学发光检测仪，利用酚磺乙胺在酸性图文80-罗丹明6G体系中产生化学发光的特性，对酚磺乙胺进行含量测定。以上是关于酚磺乙胺非专利文献的不完全统计，也有国家食品药品监督管理总局的国家标准酚磺乙胺(WS1-(YH-001)-1995-2010)提到关于酚磺乙胺氢醌及含量检测的方法，均是用氨基键合硅胶为填充剂的色谱柱，甲醇-0.2％磷酸二氢钾(10：90)为流动相，检测波长223nm。由于酚磺乙胺极性大，合成工艺及降解产生的杂质也是极性大的物质，再加上近年来对基因毒性杂质的控制，以上所述液相检测方法对酚磺乙胺有关物质的检测不能有很好的分离与检出，用其它方法检测一是所用检测设备不普及，二是没有提到对有关物质的研究情况，因此急需一种灵敏度高、有关物质能够有效分离、普及范围比较广的检测方法；酚磺乙胺含量测定HPLC法所用色谱柱是用的氨基柱，氨基柱没有一般的C18重复性及耐用性好，其它检测方法同样是普及率不高，而用一般的流动相与C18酚磺乙胺又无保留，因此，急需一种能普遍使用且方便的方法。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种测定酚磺乙胺药物中含有的杂质及其主药含量的方法，本专利技术的测定方法，检测的灵敏度高，杂质的检出与分离效果好，稳定性强。为实现上述目的，本专利技术提供的技术方案是：一种测定酚磺乙胺药物中含有的杂质及其主药含量的方法，包括以下步骤：S1、分别精密称取适量的各杂质和酚磺乙胺，并用稀释剂溶解稀释至要求浓度，配置成杂质储备液；S2、分别精密量取等量的上述各杂质储备液，混合均匀，并用稀释剂稀释至要求浓度，配置成杂质混合溶液；S3、称取适量酚磺乙胺，用上述杂质混合溶液溶解稀释至要求浓度，配置成系统适用性溶液；S4、精密称取适量待测酚磺乙胺样品，用稀释剂溶解稀释至要求浓度，配置成供试品溶液；S5、精密量取一定量的上述供试品溶液，用稀释剂稀释至要求浓度，配置成自身对照溶液；S6、精密量取适量的上述杂质储备液、杂质混合溶液、系统适用性溶液、供试品溶液和自身对照溶液，采用高效液相色谱法进行测定，记录色谱图，并通过对色谱图上测得的数据计算得到待测酚磺乙胺样品中含有的杂质以及所含杂质的含量。本专利技术通过采用高效液相色谱法，解决了用普通液相条件测定酚磺乙胺中所含杂质无保留、灵敏度低及难分离的问题，得到了灵敏度高、重复性好、检测条件普遍、可以准确定量酚磺乙胺中各杂质及含量的分析方法。优选的，本专利技术的测定方法还包括检测酚磺乙胺和各杂质的检测限与定量限，具体检测步骤如下：a、精密称取适量的各杂质和酚磺乙胺，并用稀释剂溶解稀释至设定浓度，配置成杂质母液；b、分别精密量取适量上述各杂质母液和酚磺乙胺母液，并用稀释剂稀释至要求浓度，配置成检测限溶液；c、分别精密量取适量上述各杂质母液和酚磺乙胺母液，并用稀释剂稀释至要求浓度，配置成定量限溶液；d、采用高效液相色谱法对上述检测限溶液和定量限溶液进行测定，并根据测定的数据计算出各杂质以及酚磺乙胺的检测限和定量限，用以表征检测的灵敏度。对酚磺乙胺和各杂质的检测限与定量限进行测定，分析计算检测数据，将检测结果与限度浓度进行比较分析，可以表征本测定方法的灵敏度。本专利技术的测定方法，酚磺乙胺和各杂质的检测限及定量限远小于限度浓度，说明本方法的检测灵敏高，定量限连续6次进样后，酚磺乙胺及各杂质的平均S/N约为10，符合要求。优选的，所述稀释剂采用甲醇：水为5：95的甲醇水混合液。优选的，步骤S4中所述的供试品溶液的浓度为每1ml含酚磺乙胺2mg-20mg，临用新制。优选的，步骤S6中所述的高效液相色谱法，其液相色谱条件控制如下：色谱柱，采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，其规格为250mm×4.6mm，5μm；流动相，包括流动相A和流动相B，其中流动相A采用0.1％-0.5％的四丁基氢氧化铵水溶液，流动相B采用甲醇，流动相A和流动相B，按设定的梯度程序进行洗脱；所述洗脱梯度为：0分钟时，流动相A为95％-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定酚磺乙胺药物中含有的杂质及其主药含量的方法，采用高效液相色谱法进行测定，其特征在于，采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以四丁基氢氧化铵水溶液为流动相A，甲醇为流动相B，进行梯度洗脱。/n

【技术特征摘要】
1.一种测定酚磺乙胺药物中含有的杂质及其主药含量的方法，采用高效液相色谱法进行测定，其特征在于，采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以四丁基氢氧化铵水溶液为流动相A，甲醇为流动相B，进行梯度洗脱。


2.根据权利要求1所述的测定酚磺乙胺药物中含有的杂质及其主药含量的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的具体步骤为：
0分钟时，流动相A为95％-70％且流动相B为5％-30％；18分钟时，流动相A为30％-45％且流动相B为70％-55％；23分钟时，流动相A为10％-20％且流动相B为90％-80％；25分钟时，流动相A为95％-70％且流动相B为5％-30％；40分钟时，流动相A为95％-70％且流动相B为5％-30％。


3.根据权利要求1所述的测定酚磺乙胺药物中含有的杂质及其主药含量的方法，其特征在于，所述四丁基氢氧化铵水溶液的浓度为0.1％-0.5％，并用磷酸调pH值为3.0-6.0。


4.根据权利要求1所述的测定酚磺乙胺药物中含有的杂质及其主药含量的方法，其特征在于，采用紫外检测器为检测器。


5.根据权利要求1所述的测定酚磺乙胺药物中含有的杂质及其主药含量的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的液相色谱条件为：所述流动相的流速为0.8ml-1.2ml/min，所述色谱柱的柱温为20℃-40℃，检测波长为200nm-300nm。

【专利技术属性】
技术研发人员：冯舟，倪瑛，彭琳，包安丽，
申请(专利权)人：成都平和安康医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51