活性生物补片及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种由脐带组织组成的活性生物补片。所述活性生物补片为片状物，所述脐带组织形成于通过机械方式去除血管细胞的脐带。本发明专利技术的所述脐带组织形成于通过机械方式去除所述血管的脐带，有效降低了免疫原性，无须使用化学试剂进行处理以去除免疫成分，就能够使所述活性生物补片具有良好的使用安全性并最大限度保留生物活性，且所述脐带组织包含活细胞，所述活细胞的存活率不低于70％，有利于进一步促进组织的愈合效果。

Active biological patch and its preparation

【技术实现步骤摘要】
活性生物补片及其制备方法
本专利技术涉及生物医用材料
，尤其涉及活性生物补片及其制备方法。
技术介绍
在运动损伤及伤口护理领域，存在大量与肌腱、神经或创面相关的疾病或急慢性损伤，如肌腱炎、神经炎、肌腱断裂、肩袖损伤、术后肌腱神经粘连、烧烫伤和慢性溃疡等，因此对可以促进愈合以及抑制炎症的生物活性材料需求极大。目前大部分生物补片的主要组成成分为高分子材料，尽管使用的高分子材料具有一定的生物相容性，但作为惰性材料，因缺乏生物活性，不可避免地会使人体产生排异、侵蚀或瘢痕化等不良反应。公开号为CN109453428A的中国专利申请以动物组织为原料，去除细胞、DNA等免疫成分，切成细条状后捻成线，然后经过编织形成了生物修补网片。然而，制备该生物修补网片的过程包括使用多种化学试剂，包括有机试剂、酶试剂以及酸性溶液进行处理以去除免疫成分，以及超声和编织过程，容易对生物活性造成不利影响，进而影响肩袖组织的愈合效果。因此，有必要开发一种新型的活性生物补片以解决现有技术中存在的上述问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种活性生物补片及其制备方法，以具有良好的生物活性，从而有利于软组织的愈合效果。为实现上述目的，本专利技术的所述活性生物补片由脐带组织组成，所述活性生物补片为片状物，所述脐带组织形成于通过机械方式去除血管细胞的脐带，所述脐带组织包含活细胞，所述活细胞的存活率不低于70％。本专利技术的所述活性生物补片的有益效果在于：所述活性生物补片是由脐带组织组成，所述脐带组织形成于通过机械方式去除所述血管的脐带，有效降低了免疫原性，无须使用化学试剂进行处理以去除免疫成分，就能够使所述活性生物补片具有良好的使用安全性并最大限度保留生物活性，且所述脐带组织中的活细胞的存活率不低于70％，有利于软组织的愈合效果。优选的，所述活细胞包括上皮细胞和基质细胞。其有益效果在于：有利于促进组织的愈合效果。优选的，所述活性生物补片的含水率不高于10％。其有益效果在于：有利于延长贮存时间并最大限度保留生物活性。进一步优选的，所述活性生物补片的缝合强度不小于3牛顿，拉伸强度不小于1兆帕，撕裂强度不小于3牛顿，同一体外降解条件和同一降解时间下所述活性生物补片的组织残留率与新鲜原始脐带的组织残留率之间的差值为-5％-+5％。优选的，所述活性生物补片包含第一表面，所述第一表面主要由华通氏胶组成，且具有若干凸起结构，所述凸起结构的高度不超过0.2毫米，相邻的两个所述凸起结构之间的距离为0.5-5毫米。其有益效果在于：后续临床应用中选择含有华通氏胶的所述第一表面贴合待修复的部位，有利于细胞长入材料，加速材料整合，从而促进组织愈合。优选的，所述活性生物补片的厚度为0.01-0.6毫米。优选的，所述脐带组织来源于人体。其有益效果在于：避免患者产生排异反应。本专利技术的所述活性生物补片的制备方法包括：提供原始脐带，并对所述原始脐带顺次进行低温预处理、低温压制和冷冻干燥，以得到所述活性生物补片；所述低温预处理包括：通过机械方式去除所述原始脐带中的血管以形成待整形的脐带组织，将所述待整形的脐带组织修整为片状脐带组织，以及清洗所述原始脐带、所述待整形的脐带组织以及所述片状脐带组织中的任意一种或多种以形成去除血污的片状脐带组织；所述低温压制包括：将所述去除血污的片状脐带组织放置于模具中压制为片状，然后采用透气无菌包装袋包装后，进行所述低温干燥；所述冷冻干燥包括对经所述低温压制后得到的片状脐带组织顺次进行的常压预冷冻、真空冻干和真空干燥，所述常压预冷冻的降温速率为5-10摄氏度/分钟，所述真空干燥的升温速率为5-10摄氏度/分钟。本专利技术的所述制备方法的有益效果在于：通过机械方式去除所述原始脐带中的血管，有效降低了免疫原性，无须使用化学试剂进行处理以去除免疫成分就能使所述活性生物补片具有良好的使用安全性，结合控制所述低温预处理中去除所述血管的方式，控制所述常压预冷冻的降温速率以及控制所述真空干燥的升温速率，有利于使所述活性生物补片保持良好的生物活性最大限度保留生物活性，以有利于组织的愈合效果。优选的，所述常压预冷冻包括至少两次分步预冷冻，所述真空冻干包括至少两次分步真空冻干，所述真空干燥包括至少两次分步真空干燥，每次分步预冷冻使经所述低温压制得到的样品以5-10摄氏度/分钟的速率降温至冷冻温度，然后在所述冷冻温度下进行120-240分钟的冷冻，所述冷冻温度不高于-0摄氏度且不低于-15摄氏度；每次分步真空冻干的温度不高于-0摄氏度且不低于-15摄氏度，真空度小于27帕，冻干时间为240-480分钟；每次分步真空干燥使经所述真空冻干得到的样品以5-10摄氏度/分钟的速率升温至干燥温度，然后在所述干燥温度下进行不少于240分钟的干燥，所述干燥温度不高于28摄氏度。其有益效果在于：有利于最大程度保留生物活性。优选的，所述低温预处理过程中，控制通过所述机械方式去除所述原始脐带中的血管所用的时长不超过10分钟，以利于最大限度保留生物活性。进一步优选的，所述机械方式包括使用环形钻头去除所述血管，所述环形钻头的内径为1.5-8毫米，厚度不超过0.5毫米。优选的，所述低温压制的过程使所述去除血污的片状脐带组织的含有华通氏胶的一面形成压痕。其有益效果在于：后续临床应用中选择含有华通氏胶的所述第一表面贴合待修复的部位，有利于细胞长入材料，加速材料整合，从而促进组织愈合。优选的，所述低温预处理和所述低温压制的过程在0-10摄氏度的环境温度下进行，以利于最大限度保留生物活性。进一步优选的，所述低温预处理过程中，进行所述清洗所使用的清洗液的温度高于所述清洗液的冰点，且不超过10摄氏度。附图说明图1为本专利技术实施例的活性生物补片的第一表面的表面形貌照片；图2为本专利技术实施例的原始脐带的组织学染色照片；图3为本专利技术实施例的完成低温预处理后得到的脐带组织的组织学染色照片；图4为本专利技术实施例的活性生物补片和新鲜原始脐带通过体外降解性能测试得到的组织残留率随降解时间的变化趋势对比图；图5为本专利技术实施例的不同活性生物补片、空白对照、阴性对照以及阳性对照通过体外细胞毒性测试得到的小鼠成纤维细胞的增殖率对比图。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面结合附图对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。除非另外定义，此处使用的技术术语或者科学术语应当为本专利技术所属领域内具有一般技能的人士所理解的通常意义。本文中使用的“包括”等类似的词语意指出现该词前面的元件或者物件涵盖出现在该词后面列举的元件或者物件及其等同，而不排除其他元件或者物件。本专利技术实施例的环形钻头来源于苏州六六视觉科技股份有限公司。针对现有技术存在的问本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种活性生物补片，应用于软组织修复，其特征在于，所述活性生物补片由脐带组织组成，所述活性生物补片为片状物，所述脐带组织形成于通过机械方式去除血管细胞的脐带，所述脐带组织包含活细胞，所述活细胞的存活率不低于70％。/n

【技术特征摘要】
1.一种活性生物补片，应用于软组织修复，其特征在于，所述活性生物补片由脐带组织组成，所述活性生物补片为片状物，所述脐带组织形成于通过机械方式去除血管细胞的脐带，所述脐带组织包含活细胞，所述活细胞的存活率不低于70％。


2.根据权利要求1所述的活性生物补片，其特征在于，所述活细胞包括上皮细胞和基质细胞。


3.根据权利要求1所述的活性生物补片，其特征在于，所述活性生物补片的含水率不高于10％。


4.根据权利要求3所述的活性生物补片，其特征在于，所述活性生物补片的缝合强度不小于3牛顿，拉伸强度不小于1兆帕，撕裂强度不小于3牛顿，同一体外降解条件和同一降解时间下所述活性生物补片的组织残留率与新鲜原始脐带的组织残留率之间的差值为-5％-+5％。


5.根据权利要求3所述的活性生物补片，其特征在于，所述活性生物补片包含第一表面，所述第一表面主要由华通氏胶组成，且具有若干凸起结构，所述凸起结构的高度不超过0.2毫米，相邻的两个所述凸起结构之间的距离为0.5-5毫米。


6.根据权利要求1所述的活性生物补片，其特征在于，所述活性生物补片的厚度为0.01-0.6毫米。


7.根据权利要求1所述的活性生物补片，其特征在于，所述脐带组织来源于人体。


8.一种如权利要求1-7中任一项所述的活性生物补片的制备方法，其特征在于，包括：提供原始脐带，并对所述原始脐带顺次进行低温预处理、低温压制和冷冻干燥，以得到所述活性生物补片；
所述低温预处理包括：通过机械方式去除所述原始脐带中的血管以形成待整形的脐带组织，将所述待整形的脐带组织修整为片状脐带组织，以及清洗所述原始脐带、所述待整形的脐带组织以及所述片状脐带组织中的任意一种或多种以形成去除血污的片状脐带组织；
所述低温压制包括：将所述去除血污的片状脐带组织放置于模具中压制为片状，然后进行所述冷冻干燥；<...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱雪晶，鄢和新，
申请(专利权)人：动之医学技术上海有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31