【技术实现步骤摘要】
利用多模式层析介质Captoadhere去除乙脑疫苗制品中残留宿主DNA的方法
本专利技术涉及在病毒疫苗制品中去除宿主DNA及宿主蛋白的方法，具体涉及利用多模式层析介质Captoadhere去除乙脑疫苗制品中残留宿主DNA的方法。
技术介绍
乙脑疫苗是将病毒接种于适合的动物细胞上，经繁殖后病毒释放到培养液中，与此同时一些残余的宿主细胞或其碎片也会进入到培养液中，经澄清，超滤浓缩，凝胶过滤层析后，提取得到的乙脑疫苗原液中会产生游离的宿主DNA与宿主蛋白，以及与抗原蛋白结合的宿主DNA和宿主蛋白，浓缩，凝胶过滤层析工艺会将一定比例的游离DNA与宿主蛋白去除，但仍会有残余DNA和宿主蛋白的存在，特别是与病毒或抗原蛋白结合的DNA与宿主蛋白会残留在原液中，若去除不彻底，这部分DNA与宿主蛋白会随着疫苗一起被注入到人体内，可能会在人体内引起不良反应，或具有导致癌症发生的可能。目前乙脑疫苗普遍采用浓缩、凝胶过滤层析等传统工艺进行提取，所得到的乙脑疫苗，存在以下缺陷：病毒疫苗提取后残留的宿主DNA含量过高；病毒疫苗提取后仍...
【技术保护点】
1.一种利用多模式层析介质Capto adhere去除乙脑疫苗制品中残留宿主DNA的方法，其特征在于，将乙脑疫苗浓缩灭活液进行多模式介质Capto adhere层析，使DNA与宿主蛋白牢固吸附在多模式层析介质Capto adhere上，而病毒蛋白直接穿透，再将收集的纯化液进行凝胶过滤层析，从而达到去除宿主DNA与宿主蛋白的目的，具体包括以下步骤：使用缓冲液pH6.0～8.0和NaCl 0.1mol/L～1.0mol/L平衡多模式层析介质Capto adhere至紫外、电导平衡，然后将乙脑疫苗浓缩灭活液加载到多模式层析介质Capto adhere中，宿主DNA与宿主蛋白牢固吸...
【技术特征摘要】
1.一种利用多模式层析介质Captoadhere去除乙脑疫苗制品中残留宿主DNA的方法，其特征在于，将乙脑疫苗浓缩灭活液进行多模式介质Captoadhere层析，使DNA与宿主蛋白牢固吸附在多模式层析介质Captoadhere上，而病毒蛋白直接穿透，再将收集的纯化液进行凝胶过滤层析，从而达到去除宿主DNA与宿主蛋白的目的，具体包括以下步骤：使用缓冲液pH6.0～8.0和NaCl0.1mol/L～1.0mol/L平衡多模式层析介质Captoadhere至紫外、电导平衡，然后将乙脑疫苗浓缩灭活液加载到多模式层析介质Captoadhere中，宿主DNA与宿主蛋白牢固吸附在多模式层析介质Captoadhere上，而乙脑病毒蛋白直接穿透出来，紫外检测波长280nm，收集吸收峰，当样品全部加载后，继续用缓冲液pH6.0～8.0、NaCl0.1mol/L～1.0mol/L洗脱，直到紫外吸收值降到基线，收集的穿透峰为一步纯化液；再将一步纯化液经过凝胶过滤层析，收集第一个吸收峰，即乙脑病毒蛋白最终纯化液。
2.按照权利要求1所述的利用多模式层析介质Captoadhere去除乙脑疫苗制品中残留宿主DNA的方法，其特征在于，具体步骤为：使用AKTAava...
【专利技术属性】
技术研发人员：李庆岸，于海，曹鹏，孙非非，高军，
申请(专利权)人：辽宁成大生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁;21
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