【技术实现步骤摘要】
一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物及其应用
本专利技术涉及一种组合物，尤其是涉及一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物。
技术介绍
脂肪间充质干细胞(adiposetissue-derivedmesenchymalstemcell，ASMCs)系2001年首次报道从脂肪组织分离获得，因其与骨髓间充质干细胞(bonemarrow-derivedstemcells，BMSCs)一样具有高度增殖和自我更新能力，可在脂肪组织中分离获得大量的ASMCs，且能多向分化成为中胚层和非中胚层细胞，使其成为成体干细胞在再生医学应用研究的热点。广泛应用于皮肤组织再生、软骨和骨组织再生、伤口愈合等众多研究领域。外泌体（Exosomes）最早于1983年在研究网织红细胞过程中发现，随着研究的伸入，外泌体被发现是一类携带生物活性的细胞信息载体，且现有技术文献——脂肪干细胞来源的外来体促进皮肤创伤愈合的研究（王娟，华中科技大学硕士学位论文，2016年5月）中公开了脂肪干细胞外泌体具有一定的积极促进创伤愈合的作用，因此具有很大的用于制作各种护肤产品的潜力...
【技术保护点】
1.一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物，其特征是所述组合物由作为活性成分脂肪干细胞外泌体及至少一种可以皮肤外用的辅料组成，所述作为活性成分脂肪干细胞外泌体的重量百分比用量为0.002%~0.005%，所述的脂肪干细胞外泌体以如下方法制备：/nA）将脂肪间充质干细胞，接种于第一培养基中，所述第一培养基为含第一诱导培养试剂的基础培养基，所述基础培养基为低糖DMEM培养基，所述诱导培养试剂为地塞米松、维生素C、维生素D3和1-甲基-3-异丙基-黄嘌呤（IBMX），所述第一诱导培养试剂在培养基中的用量为：地塞米松1μmol/L，维生素C 50mg/L，维生素D
【技术特征摘要】
1.一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物，其特征是所述组合物由作为活性成分脂肪干细胞外泌体及至少一种可以皮肤外用的辅料组成，所述作为活性成分脂肪干细胞外泌体的重量百分比用量为0.002%~0.005%，所述的脂肪干细胞外泌体以如下方法制备：
A）将脂肪间充质干细胞，接种于第一培养基中，所述第一培养基为含第一诱导培养试剂的基础培养基，所述基础培养基为低糖DMEM培养基，所述诱导培养试剂为地塞米松、维生素C、维生素D3和1-甲基-3-异丙基-黄嘌呤（IBMX），所述第一诱导培养试剂在培养基中的用量为：地塞米松1μmol/L，维生素C50mg/L，维生素D310~15μmol/L，1-甲基-3-异丙基-黄嘌呤0.2~0.3mmol/L；将接种了脂肪间充质干细胞的培养基于5%CO237℃的条件下培养48h，然后吸除培养基，加入低糖DMEM培养基，培养24h后收集上清作为上清液A；
B）将脂肪间充质干细胞，接种于第二培养基中，所述第二培养基为含有第二诱导培养试剂的基础培养基，所述第二诱导培养试剂为维甲酸和β-甘油磷酸钠，维甲酸在培养基中的用量为：维甲酸0.5~1μmol/L，β-甘油磷酸钠2~4mmol/L，将接种了脂肪间充质干细胞的培养基于5%CO2，37℃的条件下培养48h，然后吸除培养基，加入低糖DMEM培养基，培养24h后收集上清作为上清液B；
C）分别从上清液A和上清液B中提取外泌体后合并作为组合物活性成分的脂肪干细胞外泌体，上清液A提取的外泌体与上清液B提取的外泌体的蛋白质质量比为1：0.5~1.5。
2.如权利要求1所述的一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物，其特征是上清液A提取的外泌体与上清液B提取的外泌体的蛋白质质量比为1：0.8~1.2。
3.如权利要求2所述的一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物，其特征是上清液A提取的外泌体与上清液B提取的外泌体的蛋白质质量比为1:1。
4.如权利要求1~3任一所述的一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物，其特征是所述的步骤C）中外泌体的提取方法包括以下步骤：
C1）将收集的培养液上清300g离心10min，保留上清液，弃沉淀，去...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈晓波，张健，韩洪起，冯春玲，
申请(专利权)人：优赛生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12
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