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抗CRISPR多肽用于Cas核酸酶特异性激活的用途制造技术

技术编号:24505487 阅读:41 留言:0更新日期:2020-06-13 07:40
本发明专利技术涉及包含(i)编码抗CRISPR(Acr)多肽的序列和(ii)miRNA靶序列的多核苷酸、并且涉及包含其的载体和宿主细胞。本发明专利技术还涉及一种试剂盒,其包含(I)包含(i)编码抗CRISPR(Acr)多肽的序列和(ii)RNA干扰(RNAi)靶序列的第一多核苷酸;和Cas核酸酶或包含编码Cas核酸酶的可表达基因的第二多核苷酸;(II)包含(i)编码抗CRISPR(Acr)多肽的序列和(ii)RNA干扰(RNAi)靶序列的第一多核苷酸,和包含编码Cas核酸酶的第二片段的可表达基因的第二多核苷酸,所述第一多核苷酸还包含编码Cas核酸酶的第一片段的可表达基因,其中所述Cas核酸酶的第一片段和第二片段一起重构活性Cas核酸酶;或(III)包含(i)编码抗CRISPR(Acr)多肽的序列、(ii)RNA干扰(RNAi)靶序列、和(iii)编码Cas核酸酶的序列的第一多核苷酸;和包含编码抑制性RNA的可表达基因的第二多核苷酸,所述抑制性RNA优选为与所述RNAi靶序列杂交的siRNA或miRNA,更优选为与所述RNAi靶序列杂交的siRNA。此外,本发明专利技术涉及与上述元件有关的方法和用途。

Application of anti CRISPR peptide in specific activation of CAS nuclease

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗CRISPR多肽用于Cas核酸酶特异性激活的用途本专利技术涉及包含(i)编码抗CRISPR(Acr)多肽的序列和(ii)miRNA靶序列的多核苷酸,并且涉及包含其的载体和宿主细胞。本专利技术还涉及一种试剂盒,其包含(I)包含(i)编码抗CRISPR(Acr)多肽的序列和(ii)RNA干扰(RNAi)靶序列的第一多核苷酸;和Cas核酸酶或包含编码Cas核酸酶的可表达基因的第二多核苷酸;(II)包含(i)编码抗CRISPR(Acr)多肽的序列和(ii)RNA干扰(RNAi)靶序列的第一多核苷酸,和包含编码Cas核酸酶的第二片段的可表达基因的第二多核苷酸,所述第一多核苷酸还包含编码Cas核酸酶的第一片段的可表达基因,其中所述Cas核酸酶的第一片段和第二片段一起重构活性Cas核酸酶;或(III)包含(i)编码抗CRISPR(Acr)多肽的序列、(ii)RNA干扰(RNAi)靶序列、和(iii)编码Cas核酸酶的序列的第一多核苷酸;和包含编码抑制性RNA的可表达基因的第二多核苷酸,所述抑制性RNA优选为与所述RNAi靶序列杂交的siRNA或miRNA,更优选为与所述RNAi靶序列杂交的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种多核苷酸,其包含(i)编码抗CRISPR(Acr)多肽的序列和(ii)miRNA靶序列。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170818 EP 17186885.41.一种多核苷酸,其包含(i)编码抗CRISPR(Acr)多肽的序列和(ii)miRNA靶序列。


2.根据权利要求1所述的多核苷酸,其中所述miRNA是组织特异性miRNA和/或细胞类型特异性miRNA。


3.根据权利要求1或2所述的多核苷酸,其中所述多核苷酸包含至少两个与相同miRNA基本互补的miRNA靶序列,更优选至少两个与miRNA的相同核酸序列基本互补的靶序列。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的多核苷酸,其中所述多核苷酸包含至少两个不同的miRNA靶序列,更优选彼此具有小于80%同一性的至少两个miRNA靶序列,甚至更优选彼此具有小于70%同一性的至少两个miRNA靶序列,最优选彼此具有小于60%同一性的至少两个miRNA靶序列。


5.根据权利要求1至4中任一项所述的多核苷酸,其中所述编码Acr多肽的序列位于所述miRNA靶序列的上游,优选位于可表达核酸序列中包含的所有miRNA靶序列的上游。


6.根据权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸,其中所述Acr多肽是AcrIIA4多肽。


7.根据权利要求1至6中任一项所述的多核苷酸,其中所述编码Acr多肽的序列包含
a)SEQIDNO:21的核酸序列;
b)与SEQIDNO:21的序列具有至少70%同一性的核酸序列;
c)编码包含氨基酸序列SEQIDNO:20的多肽的核酸序列;或
d)编码以下多肽的核酸序列,该多肽包含与SEQIDNO:20的序列具有至少70%同一性的氨基酸序列。


8.根据权利要求1至7中任一项所述的多核苷酸,其中所述多核苷酸还包含至少编码CRISPR相关(Cas)核酸酶的片段的核酸序列。


9.一种载体,其包含根据权利要求1至8中任一项所述的多核苷酸。


10.一种宿主细胞,其包含根据权利要求1至8中任一项所述的多核苷酸和/或根据权利要求9所述的载体。


11.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员:多米尼克·尼奥佩克罗兰·艾尔斯迪尔克·格林姆马赖克·丹妮拉·霍夫曼克莱尔·多门格茱莉亚·法克希里扎比内·阿申布雷纳卡洛琳·施梅拉斯
申请(专利权)人:海德堡大学德国癌症研究中心
类型:发明
国别省市:德国;DE

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