【技术实现步骤摘要】
用于检测病原体的引物组、试剂盒和检测方法
本专利技术涉及病原微生物检测
，具体涉及一种用于检测病原体的引物组、试剂盒和检测方法。
技术介绍
病原微生物在临床上的传统诊断方法主要包括：(1)镜检。凡在形态和染色性上具有特征的致病菌，直接涂片染色后显微镜观察有助于初步诊断。(2)细菌培养。选择适宜的培养基、pH、培养时间、温度等，提供特定细菌生长所需的必要条件。(3)生化试验。细菌生化反应是依据各种细菌具有不同的酶系统，对营养物质的分解所产生的代谢产物不同，以此来鉴别细菌。(4)血清学鉴定。根据相应抗原与抗体反应的特异性，采用含有已知特异抗体的免疫血清，对其分离的待检测菌进行属、种和血清型鉴定。(5)抗原抗体检测。原理是用已知的特异性抗体测未知的细菌抗原成分。(6)分子生物学方法。随着分子生物学技术的应用，微生物学的检测技术从生物学检查进展到分子生物学的鉴定，不同种的病原微生物具有不同的基因序列，故可通过检测病原微生物的特异性基因序列的存在与否进行检测。常用的方法主要有核酸杂交和聚合配链反应(PCR)等。当前，应用...
【技术保护点】
1. 一种用于检测病原体的引物组，其特征在于，所述引物组包括至少60对引物对，每对所述引物对由正向引物与反向引物组成，所述引物对选自SEQ ID NO：1~154所示核苷酸；/n任选地，所述引物组用于在同一反应体系中，对所述病原体的特异序列进行多重PCR靶向扩增。/n
【技术特征摘要】
1.一种用于检测病原体的引物组，其特征在于，所述引物组包括至少60对引物对，每对所述引物对由正向引物与反向引物组成，所述引物对选自SEQIDNO：1~154所示核苷酸；
任选地，所述引物组用于在同一反应体系中，对所述病原体的特异序列进行多重PCR靶向扩增。
2.根据权利要求1所述的引物组，其特征在于，所述引物组还包括如SEQIDNO：155~156所示的内参引物。
3.一种用于检测病原体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1或2所述的引物组。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括多重PCR靶向扩增试剂组分、末端修复试剂组分、接头连接试剂组分、文库PCR扩增试剂组分、逆转录试剂组分中的一种或多种；
任选地，所述多重PCR靶向扩增试剂组分包括靶向扩增缓冲液和靶向扩增酶，优选地，所述靶向扩增酶是ExTaq聚合酶；
任选地，所述末端修复试剂组分包括末端修复缓冲液和末端修复酶，优选地，所述末端修复酶包括T4DNA聚合酶、T4PNK和rTaq；
任选地，所述接头连接试剂组分包括连接缓冲液、磷酸激酶、连接酶和接头序列；优选地，所述连接缓冲液中含有聚乙二醇；优选地，所述磷酸激酶是T4PNK；优选地，所述连接酶是T4DNA连接酶；优选地，所述接头序列如SEQIDNO：157~158所示；
任选地，所述文库PCR扩增试剂组分包括PCR反应酶-缓冲液混合液和PCR反应引物；优选地，所述PCR反应酶-缓冲液混合液是KAPAHIFI热启动预混液；所述PCR反应引物如SEQIDNO：159~160所示；
任选地，所述逆转录试剂组分包括逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT和dNTP；优选地，所述逆转录酶是SuperScriptⅡ逆转录酶。
5.一种用于扩增病原体的多重PCR反应体系，其特征在于，所述反应体系包括如权利要求1所述的引物组、ExTaq聚合酶、dNTP和ExTaq聚合酶的缓冲液；任选地，所述反应体系还包括如SEQIDNO：155~156所示的内参引物。
6.权利要求1或2所述的引物组、权利要求3或4所述的试剂盒、或权利要求5所述的反应体系在检测脑炎和/或脑膜炎病原体中的应用；
任选地，所述病原体选自阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、鲍曼不动杆菌、单增生李斯特菌、屎肠球菌、脑膜炎奈瑟球菌、肺炎链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、头葡萄球菌、结核分枝杆菌属、布鲁氏菌属、人单纯疱疹病毒1型、人单纯...
【专利技术属性】
技术研发人员：李英镇，宫艳萍，申奥，李晴晴，袁剑颖，吴红龙，
申请(专利权)人：深圳华大因源医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44
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