一种结核分枝杆菌耐药菌株的检测方法技术

本发明专利技术实施例公开了一种结核分枝杆菌耐药菌株的检测方法，包括将核酸探针与从待检测结核分枝杆菌中提取的结核分枝杆菌耐药相关基因组分别添加至缓冲液中进行杂交处理，所述核酸探针包含与已知的结核分枝杆菌耐药菌株的基因突变位点完全互补的核酸片段，且所述核酸探针能够与所述待检测结核分枝杆菌耐药相关基因组形成杂交核酸双链；杂交处理后，向反应体系中添加单链核酸酶进行酶切反应和灭活处理；对灭活处理后的产物进行核酸检测，并根据检测结果确定结核分枝杆菌是否为耐药菌株；本发明专利技术核酸探针用于结核分枝杆菌耐药菌株检测中，能够实现快速、准确地鉴定结核分枝杆菌的耐药性质，且检测方法成本较低。

A method for the detection of drug-resistant strains of Mycobacterium tuberculosis

【技术实现步骤摘要】
一种结核分枝杆菌耐药菌株的检测方法
本专利技术实施例涉及结核分枝杆菌耐药菌株检测
，具体涉及一种结核分枝杆菌耐药菌株的检测方法。
技术介绍
结核病是由结核分枝杆菌感染引起的慢性疾病，结核分枝杆菌可以感染人体多个器官，以肺部感染为主，最终引发肺结核；据WHO报道，2015年，新感染的结核患者上升到1040万，其中120万患者携带人免疫缺陷病毒，死于结核杆菌感染的人数为140万，其中40万为艾滋病阳性，结核杆菌感染是世界前十位致死疾病之一。治疗结核杆菌感染的药物分为一线药物和二线药物；目前，一线药物主要包括异烟肼(INH)、利福平(RIF)、乙胺丁醇(EMB)、吡嗪酰胺(PZA)和链霉素(SM)；二线药物主要包括氟喹诺酮类抗生素(FQs)、对氨基水杨酸(PAS)和乙硫异烟胺(ETH)；临床上治疗结核杆菌感染时，通常采用两种或两种以上药物联合的化疗方案；由于治疗结核杆菌感染是一个长期用药的过程，因此容易产生抗药性，并且产生耐多药或者广泛耐药的结核杆菌，耐药结核分支杆菌分为以下四类：1)单耐药结核分枝杆菌：患者感染的结核分枝杆菌只本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种结核分枝杆菌耐药菌株的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(a)将核酸探针与从待检测结合分枝杆菌中提取的结核分枝杆菌耐药相关基因组分别添加至缓冲液中进行杂交处理，所述核酸探针包含与已知的结核分枝杆菌耐药菌株的基因突变位点完全互补的核酸片段，且所述核酸探针能够与所述待检测结核分枝杆菌耐药相关基因组形成杂交核酸双链；/n(b)杂交处理后，向反应体系中添加单链核酸酶进行酶切反应，然后进行灭活处理；/n(c)对灭活处理后的产物进行核酸检测，并根据检测结果确定结核分枝杆菌是否为耐药菌株。/n

【技术特征摘要】
1.一种结核分枝杆菌耐药菌株的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
(a)将核酸探针与从待检测结合分枝杆菌中提取的结核分枝杆菌耐药相关基因组分别添加至缓冲液中进行杂交处理，所述核酸探针包含与已知的结核分枝杆菌耐药菌株的基因突变位点完全互补的核酸片段，且所述核酸探针能够与所述待检测结核分枝杆菌耐药相关基因组形成杂交核酸双链；
(b)杂交处理后，向反应体系中添加单链核酸酶进行酶切反应，然后进行灭活处理；
(c)对灭活处理后的产物进行核酸检测，并根据检测结果确定结核分枝杆菌是否为耐药菌株。


2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述核酸探针为核苷酸单链，且核苷酸个数为10-30个。


3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述核酸探针由脱氧核苷酸、核苷酸和核苷酸衍生物中的任意一种或多种构成。


4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述核苷酸衍生物包括锁核苷酸、肽核苷酸、硫代核苷酸、...

【专利技术属性】
技术研发人员：关一夫，高雪芹，张斌，
申请(专利权)人：辽宁中晨优智医疗技术有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁;21