【技术实现步骤摘要】
一种端粒酶活性检测试剂盒及端粒酶活性检测方法
本专利技术涉及生化检测
，尤其涉及一种端粒酶活性检测试剂盒及端粒酶活性检测方法，该方法尤其可用于非诊断治疗目的的端粒酶活性检测。
技术介绍
端粒酶是一种逆转录酶，通过在染色体末端添加重复单位(TTAGGG)n，在维持端粒长度方面发挥重要作用。众所周知，在大多数正常细胞的细胞分裂过程中，端粒逐渐缩短，并且没有可检测到的端粒酶活性。端粒酶表达与肿瘤发生有关，因此端粒酶活性检测也是癌症早期诊断的一个重要标准。已经开发了多种方法来检测端粒酶活性，其中端粒重复序列扩增方案(TRAP)最常用，已成为一种黄金方法。虽然TRAP及其改进的检测方法灵敏度高和特异性好，但这些基于聚合酶链反应(PCR)的方法也存在明显的缺点，如操作复杂、耗时、假阳性、无法原位检测。近年来，荧光方法由于灵敏且简单而备受关注，并且已广泛用于靶标的可视化检测。分子信标(MB)是基于荧光共振能量转移(FRET)的发夹DNA探针。一般地，分子信标由寡核苷酸序列、荧光基团和淬灭基团组成，其中寡核苷酸序列可以形成茎区...
【技术保护点】
1.一种端粒酶活性检测试剂盒，其特征在于，包括端粒酶底物引物、dNTPs、端粒酶逆转录缓冲液、量子点分子信标，其中所述量子点分子信标由寡核苷酸茎环、量子点荧光基团和淬灭基团组成，所述端粒酶底物引物为5’-AAT CCG TCG AGC AGA GTT-3’(SEQ ID NO:1)，所述寡核苷酸茎环的序列为5’-G*G*G*G*G*G*G*G*G*G*AA AAA CCC TAA CCC TAA CCC TAAAAC TCT GCT CCT CTT TAG GGT TAG GG-3’(SEQ ID NO:2)，其中*表示硫代磷酸酯键，所述量子点荧光基团与所述寡核苷酸茎环的序...
【技术特征摘要】
1.一种端粒酶活性检测试剂盒，其特征在于，包括端粒酶底物引物、dNTPs、端粒酶逆转录缓冲液、量子点分子信标，其中所述量子点分子信标由寡核苷酸茎环、量子点荧光基团和淬灭基团组成，所述端粒酶底物引物为5’-AATCCGTCGAGCAGAGTT-3’(SEQIDNO:1)，所述寡核苷酸茎环的序列为5’-G*G*G*G*G*G*G*G*G*G*AAAAACCCTAACCCTAACCCTAAAACTCTGCTCCTCTTTAGGGTTAGGG-3’(SEQIDNO:2)，其中*表示硫代磷酸酯键，所述量子点荧光基团与所述寡核苷酸茎环的序列的5’端连接，所述淬灭基团与所述寡核苷酸茎环的序列的3’端连接。
2.根据权利要求1所述的端粒酶活性检测试剂盒，其特征在于，所述荧光基团为CdTe:Zn2+量子点、CdZnTeS量子点或CdTe/Cds量子点，所述淬灭基团为BHQ1、BHQ2或BHQ3。
3.根据权利要求2所述的端粒酶活性检测试剂盒，其特征在于，所述荧光基团为CdTe:Zn2+量子点，所述淬灭基团为BHQ2。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的端粒酶活性检测试剂盒，其特征在于，所述端粒酶逆转录缓冲液包含20mMTris-HCl(pH＝8.3),1.5mMMgCl2,63mMKCl,0.005％Tween20,BSA0.1mg/mL。
5.根据权利要求4所述的端粒酶活性检测试剂盒，其特征在于，...
【专利技术属性】
技术研发人员：马英新，黄卫人，钟玉城，
申请(专利权)人：深圳市第二人民医院，
类型：发明
国别省市：广东;44
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