一组反应黄曲霉中毒的标志物制造技术

本发明专利技术涉及一组反应黄曲霉中毒的标志物，所述的血液指标为谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶和胆碱酯酶。本发明专利技术的血液指标中ALT、AST、LDH、ALP、CHE对黄曲霉毒素中毒动物敏感，通过检测血清(血浆)中的ALT、AST、LDH、ALP、CHE等含量以及分析与黄曲霉中毒的相关性来建立检测模型，进而实现对黄曲霉中毒的检测，解决目前临床上动物黄曲霉中毒不能早发现、早治疗、检测难度大、成本高的问题，及时发现黄曲霉中毒，及早进行治疗，减少对畜牧业造成的经济损失。

A group of markers reflecting aflatoxin

【技术实现步骤摘要】
一组反应黄曲霉中毒的标志物
本专利技术属于动物中毒检测领域，涉及一组反应黄曲霉中毒的标志物。
技术介绍
黄曲霉毒素(AFT)是由黄曲霉菌、寄生曲霉菌等产毒菌株产生的次级代谢产物，目前已经被分离和鉴定出来的黄曲霉毒素有20多种，主要有B和G两大类。其中黄曲霉毒素B1(AFB1)是黄曲霉毒素种类中最主要的一类，也是迄今为止发现的毒性最强的生物性毒素，在1993年被世界卫生组织(WHO)列为I类致癌物。发达国家AFT的检出率较低；在发展中国家农作物和饲料AFT污染率比较高；在我国黄曲霉毒素在华中、华南、华北地区分布较广，污染较为严重，而东北，西北地区则较轻。被霉菌毒素污染的饲料，将会影响畜禽的生产性能，引发各种疾病，一定程度上限制了农牧产品进出口贸易的发展。目前常用于检测黄曲霉毒素中毒的方法有很多，如薄层层析法、液相色谱法、免疫亲和柱法、酶联免疫吸附法、微柱筛选法、一步式黄曲霉毒素检测金标试纸法等，但都存在着一些问题，如薄层层析法对黄曲霉毒素分离不理想、液相色谱法分析成本高且价格昂贵、免疫亲和柱法交叉反应率高且生产批次差异大、酶联免疫吸附法操作过程繁琐、微柱筛选法只可分析少量样品、一步式黄曲霉毒素检测金标试纸法准确率低等问题，血液生化指标具有检测简单、快速、检测成本低、可以大量检测等优势。因此，可将血液生化指标用于检测动物是否黄曲霉中毒。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一组反应黄曲霉中毒的标志物，克服目前检测黄曲霉毒素中毒的方法只可分析少量样品或者准确率低等问题。本专利技术通过以下技术方案来实现：一组反应黄曲霉中毒的标志物，所述的标志物为血液的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)和胆碱酯酶(CHE)指标。进一步的，所述的黄曲霉中毒分为轻度黄曲霉中毒和重度黄曲霉中毒。进一步的，所选用的动物模型为大鼠。进一步的，所述的大鼠轻度黄曲霉中毒界值为谷丙转氨酶63.50U/L、谷草转氨酶141.50U/L、碱性磷酸酶288.23U/L、乳酸脱氢酶1351.83U/L和胆碱酯酶260.75U/L。进一步的，所述的大鼠重度黄曲霉中毒界值为谷丙转氨酶94.00U/L、谷草转氨酶228.25U/L、碱性磷酸酶321.10U/L、乳酸脱氢酶2030.78U/L和胆碱酯酶340.75U/L。具体的，采集连续灌胃8周AFB1的SD大鼠的血液，室温条件下血液自然凝固20分钟，离心20分钟(3000转/分)，收集上清。检测血清(血浆)中TP、ALB、GLB、A/G、TBA、ALT、AST、ST/LT、ALP、LDH、AMY、CHOL、TG、HDL-C、LDL、K、Na、Cl、P、Mg、CO2、BUN、CREA、BUN/CR、URIC、AFU、PA、CHE、Fe的含量；利用MedCalc、IBMSPSS22.0、excel等统计学软件分析，确定了用血清(血浆)中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、胆碱酯酶(CHE)等指标来检测黄曲霉中毒疾病。采用上述技术方案的积极效果：本专利技术的血液指标中血清(血浆)中ALT、AST、LDH、ALP、CHE对黄曲霉毒素中毒动物敏感，通过检测血清(血浆)中的ALT、AST、LDH、ALP、CHE等含量以及分析与黄曲霉毒素中毒的相关性来建立模型，进而实现对黄曲霉毒素中毒疾病的检测，解决目前临床上动物黄曲霉中毒不能早发现、早治疗、检测难度大、成本高的问题，及时发现动物黄曲霉中毒，及早进行治疗，减少对畜牧业造成的经济损失。附图说明图1是血液指标ALT的独立样本Kruskal-Wallis检验结果示意图；图2是血液指标AST的独立样本Kruskal-Wallis检验结果示意图；图3是血液指标ALP的独立样本Kruskal-Wallis检验结果示意图；图4是血液指标LDH的独立样本Kruskal-Wallis检验结果示意图；图5是血液指标HDL-C的独立样本Kruskal-Wallis检验结果示意图；图6是血液指标CHE的独立样本Kruskal-Wallis检验结果示意图；图7是血液指标ST/LT的独立样本Kruskal-Wallis检验结果示意图；图8是血液指标TG的独立样本Kruskal-Wallis检验结果示意图；图9是血液指标Na的独立样本Kruskal-Wallis检验结果示意图；图10是血液指标CO2的独立样本Kruskal-Wallis检验结果示意图；图11是血液指标AFU的独立样本Kruskal-Wallis检验结果示意图；图12是血液指标Fe的独立样本Kruskal-Wallis检验结果示意图；图13是与低剂量毒素组的显著性比较示意图；图14是与高剂量毒素组的显著性比较示意图；图15是血液指标黄曲霉毒素中毒情况分析表(雷达图)；图16是对照组大鼠指标代入雷达图的结果示意图；图17是低剂量毒素组大鼠指标代入雷达图的结果示意图；图18是高剂量毒素组大鼠指标代入雷达图的结果示意图。具体实施方式下面结合附图对本专利技术的技术方案做进一步的说明，但不应理解为对本专利技术的限制：实施例1选取四周龄SD大鼠24只，随机分为对照组、低剂量毒素组(0.025μg/KgAFB1)、高剂量毒素组(0.25μg/KgAFB1)等三组，连续灌胃AFB18周，8周后采集大鼠腹主动脉血液，室温血液自然凝固20分钟，离心20分钟(3000转/分)，收集上清，利用全自动生化分析仪进行血液生化指标的检测。数据分析：数据应用IBMSPSS22.0、MedCalc、excel软件进行统计分析，结果以平均值±标准差的形式表示，结果如表1所示：表1为试验大鼠血液相关指标特征*表示该组与对照组差异显著p＜0.05，**表示该组与对照组差异极显著p＜0.01由表1可知，低剂量毒素组、高剂量毒素组中ALT、AST、ST/LT、ALP、LDH、TG、HDL-C、Na、CO2、AFU、CHE、Fe等指标存在与对照组相比显著或极显著的情况。血液指标(ALT、AST、ST/LT、ALP、LDH、TG、HDL-C、Na、CO2、AFU、CHE、Fe)的独立样本Kruskal-Wallis检验的结果如图1所示。由图1可知，ALT、AST、LDH、ALP、CHE、HDL-C等6个指标显著性P＜0.05，且呈显著上升趋势。血液指标ROC曲线分析结果如表2、表3所示：表2低剂量毒素组与对照组ROC曲线分析结果表3高剂量毒素组与对照组ROC曲线分析结果血液指标ROC曲线分析结果示意图见图13、图14。由表2、表3和图13、图14所示，谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、胆碱酯酶等5个指标ROC曲线下本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一组反应黄曲霉中毒的标志物，其特征在于：所述的标志物为血液的谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶和胆碱酯酶指标。/n

【技术特征摘要】
20191224 CN 20191134336911.一组反应黄曲霉中毒的标志物，其特征在于：所述的标志物为血液的谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶和胆碱酯酶指标。


2.根据权利要求1所述的一组反应黄曲霉中毒的标志物，其特征在于：所述的黄曲霉中毒分为轻度黄曲霉中毒和重度黄曲霉中毒。


3.根据权利要求2所述的一组反应黄曲霉中毒的标志物，其特征在于：所选用的动物模型为大鼠。


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【专利技术属性】
技术研发人员：陈媛媛，张弘弢，徐闯，陈起良，李福华，李晶，吴倩，高颖，余星潼，于佳颖，杨欣，
申请(专利权)人：黑龙江八一农垦大学，
类型：发明
国别省市：黑龙;23