一种重组蛋白油乳剂亚单位疫苗的破乳方法技术

本发明专利技术是提供一种重组抗原蛋白亚单位疫苗的破乳方法，是将使用油乳剂作为佐剂的亚单位疫苗在冰浴上进行超声破乳；其中超声破乳，一种具体条件如下：1000‑2500焦耳，超声2‑5秒，停止2‑5秒，共30‑45个循环，超声结束后在室温条件下离心获得水相。本发明专利技术的方法简便、迅速，可在10分钟内完成；抗原分离效果好，同时可保证法氏囊病毒VP2蛋白的稳定性；破乳后分离出的水相中的VP2抗原含量可以采用琼脂扩散试验法进行检测；破乳后水相中抗原回收率高，达40％。适用于对marcol52佐剂乳化的鸡传染性法氏囊病基因工程亚单位疫苗和其他基因工程亚单位疫苗进行破乳，进而对水相进行内毒素含量检测，从而评价成品疫苗的内毒素含量。

Demulsification of recombinant protein oil emulsion subunit vaccine

【技术实现步骤摘要】
一种重组蛋白油乳剂亚单位疫苗的破乳方法
本专利技术属于疫苗质量检测
，具体为一种基因工程亚单位油乳剂灭活疫苗的破乳方法。
技术介绍
传染性法氏囊病发病率高且病程短，传播迅速，病鸡严重腹泻、极度虚弱并有不同程度死亡，雏鸡感染后还可导致免疫抑制，并可诱发多种疫病或导致疫苗免疫失败。各品种的鸡均能感染，潜伏期2～3天。主要发生于2～15周龄的鸡，以3～6周龄为发病高峰期，近年来，该病发病日龄有增宽的趋势，从10日龄至产蛋的鸡群均有发生本病的报道。典型发病鸡群病初可见个别鸡突然发病，精神沉郁，食欲减退，羽毛蓬松，翅下垂，闭目，1～2天内可波及全群。病鸡腹泻，排出白色稀粪，随着病情的发展，病鸡出现畏寒、扎堆，严重者垂头、卧地不起，极度虚弱直至死亡。非典型病例主要见于老疫区或有一定免疫力的鸡群，症状不典型，主要引起免疫抑制，病鸡多出现食欲不振、进行性消瘦和腹泻等症状。传染性法氏囊病病毒属RNA病毒，病毒颗粒为球形，无囊膜，核衣壳为二十面体立体对称，直径为55～65纳米，其基因组由两个片段的双股RNA构成。该病毒有5种衣壳蛋白，即VP1～VP5，其中V本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重组抗原蛋白亚单位疫苗的破乳方法，其特征在于，所述的方法是将使用油乳剂作为佐剂的亚单位疫苗在冰浴上进行超声破乳。/n

【技术特征摘要】
1.一种重组抗原蛋白亚单位疫苗的破乳方法，其特征在于，所述的方法是将使用油乳剂作为佐剂的亚单位疫苗在冰浴上进行超声破乳。


2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的超声破乳，其超声条件如下：1000-2500焦耳，超声2-5秒，停止2-5秒，共30-45个循环，超声结束后在室温条件下离心获得水相，完成破乳操作。


3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：单学强，张伦，于泽坤，栾志舫，只勇，郝光恩，杨海明，段笑笑，
申请(专利权)人：山东信得科技股份有限公司，青岛信得药业有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37