一种抗鸡新城疫.法氏囊病高免攻毒液及其制备方法技术

本发明专利技术是提供了一种制备抗鸡新城疫（ＮＤ）和法氏囊病（ＩＢＤ）的高免球蛋白所必需的高免攻毒液及其制备方法，即先制备ＮＤ油乳剂灭活苗与ＩＢＤ野毒油乳剂灭活苗，然后与ＮＤ－Ｉ系弱毒活苗、ＩＢＤ油乳剂灭活苗、ＩＢＤ弱毒活苗、ＩＢＤ双价细胞活毒苗按羽鸡计量在无菌室内用胶体磨乳化成一次超强化高免攻毒液。该高免攻毒液一次高免，既减少对鸡的不良应激，又可提高收集高免蛋所产生的三价双抗高免球蛋白，拓宽了抗ＩＢＤ病毒谱，治愈率明显高于双价、单价双抗液。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及禽畜生物药品，特别是一种制备抗鸡新城疫、法氏囊病的高免球蛋白所必需的高免攻毒液及制备方法。鸡新城疫(ND)与法氏囊病(IBD)是两种病毒性烈性传染病，大面积发生和流行于全世界，对养鸡业危害极大。据统计，美国鸡群IBD的阳性率几乎达100％，南美洲约90％，日本70-80％，中国自1979年发生IBD，现已流行蔓延全国，且鸡ND常常伴随IBD发生，加剧鸡群病情恶化，现有防治ND和IBD的首选药为抗鸡ND、IBD高免卵黄液(高免球蛋白)，即以3次甚至5次高免攻毒法，生产高免蛋，制备高免卵黄液防治鸡群。三次高免攻毒法的常规做法是a、基础免疫用国产ND-Ⅰ系弱毒活苗和IBD弱毒活苗各10-20免疫剂量注射健康产蛋鸡。b、加强免疫基础免疫10-15后，再用同样剂量的弱毒活苗进行接种，同时接种国产ND、IBD油乳剂灭活苗，每只鸡各1ml。c、超强化免疫加强免疫后10-15天，再用国产ND、IBD油乳剂灭活苗皮下注射各2ml。超强化免疫10-15天后，可收集到合格的高免蛋以制备卵黄液。现有技术的问题及不足之处是a、三次以上高免，费时费工。b、几次高免，就对产蛋鸡几次应缴，影响蛋鸡产蛋。c、鉴于IBD的血清学变异毒株或亚型的存在，仅选择国产IBD弱毒活苗和IBD油乳剂活苗作为攻毒抗原一般只能产生单价IBD抗体(高免球蛋白)，最多能产生双价IBD抗体，仅对一、二种IBD野毒有特异性治疗作用，其抗IBD病毒谱较窄，不适应IBD病毒的多变性，临床疗效不理想。本专利技术的目的就是要提供一种抗IBD病毒谱宽、治愈率高、制备简捷、快速、使用安全、高效的抗ND、IBD高免攻毒液及其制备方法，以生产高免蛋、制备高免卵黄液，用于防治ND、IBD。为此而专利技术的抗鸡新城疫(ND)、法氏囊病(IBD)高免攻毒液是按下述每羽鸡用量计量制成的油乳剂ND油乳剂灭活苗 1-4ml/羽ND-Ⅰ系弱毒活苗 10-100个免疫剂量/羽IBD油乳剂灭活苗 1-4ml/羽IBD弱毒活苗10-100个免疫剂量/羽IBD双价细胞活毒苗 10-150个免疫剂量/羽IBD野毒油乳剂灭活苗1-4ml/羽本专利技术鸡新城疫(ND)、法氏囊病(IBD)高免攻毒液的制备方法是(1)按下列工艺先制备ND油乳剂灭活苗a、接毒取ND-Ⅳ系(HA价1∶64-1280)接种孵化鸡胚，b、照蛋选胚，c、收集鸡胚毒液，d、灭活平衡，e、制备油相和水相按重量比，将2份硬脂酸铝，94份10号白油研磨后加入6份司本-80搅拌至透明成油相，按重量比将4份吐温-80加入96份灭活毒液，充分振荡至吐温完全溶解成水相，f、按重量比，取3份油相入胶体磨，开机后缓缓加1份水相，以10000r/min搅拌3-5分钟，最后加入硫酸汞至其最终浓度1000PPm。(2)将典型IBD病鸡的法氏囊、脾脏按1∶4加灭菌生理盐水研磨，加重量比0.3％的甲醛，置于37℃灭活24h，再按e步骤中重量比加白油、司本、吐温制成IBD野毒油乳剂灭活苗。(3)将按下述每只鸡用量计量的灭活苗及活苗在无菌室内按常规油乳剂灭活剂制作法，即用胶体磨乳化3-5分钟后分装、密封。ND油乳剂灭活苗 1-4ml/羽ND-Ⅰ系弱毒活苗10-100个免疫剂量/羽IBD油乳剂灭活苗1-4ml/羽IBD弱毒活苗10-100个免疫剂量/羽IBD双价细胞活毒苗 10-150个免疫剂量/羽IBD野毒油乳剂灭活苗1-4ml/羽。将本专利技术高免攻毒液按每羽2-8ml在健康蛋鸡左肩部或左肋部皮下注射，进行一次性超强化高免10-15天后，得高免蛋。收集高免蛋，洗净表面污物，浸入0.5％的新洁尔灭溶液中15-20min，取出置无菌室晾干，再用75％的酒精棉球，进行蛋壳表面消毒，破壳倒出蛋清，收集蛋黄于无菌瓷桶内，加入与卵黄等量的生理盐水，以1000r/min搅拌30min，得抗ND、IBD三价双抗液，加入防腐剂，分装待用。本专利技术一次性超强化高免攻毒液，集病毒活菌和灭活苗之所长，置IBD标准毒株、变异毒株，当地野毒株于一体，联合应用，协同生效，各尽所长，互补所短，一次高免，既减少了对产蛋鸡的不良应激，又可提前20-30天收集到合格的高免蛋，且收集时间长达3个月之久。特别是由此产生的三价抗IBD高免球蛋白，拓宽了抗IBD病毒谱的范围，使防治效果明显提高，其治愈率较双价双抗液提高8.54-12.81个百分点，较单价双抗液提高10.23-21.57个百分点。实施例，取中国兽药监察所提供的ND-Ⅳ系种毒，用生理盐水1000倍稀释，取出孵自10-11日龄的鸡胚消毒、打孔，在无菌操作条件下，每胚尿囊腔接种0.1-0.2ml稀释后的毒液，用蜡密封针孔，每蛋大头向上，不再翻蛋，继续孵化。接种后每天照蛋一次，将接种后66小时死亡的鸡胚弃去，余胚每4-6小时照蛋一次，将死胚弃去，直至96小时，不论死亡与否，全部取出，气室向上，置0-10℃冰箱中冷却4-24小时。取冷却后的鸡胚，碘酊消毒气室部位，采用无菌手术剥除气室部蛋壳，揭去蛋壳膜，剪破绒毛尿囊膜及羊膜，吸取胚毒液。将无菌毒液用消毒纱布过滤，加入1‰的甲醛液，尔后入37℃温箱中灭活平衡16-18小时。按重量计，将2份硬脂酸铝，94份10号白油研磨后加入6份司本-80搅拌至透明成油相。另按重量比将4份吐温-80加入96份灭活毒液，充分振荡至吐温完全溶解成水相。按重量比，取3份油相入胶体磨，开机后缓缓加1份水相，以10000r/min搅拌3-5分钟，最后加入硫酸汞至其最终浓度1000PPm制成ND油乳剂灭活苗。将发病地(如保定)典型IBD病鸡的法氏囊、脾脏按1∶4加灭菌生理盐水研磨，加0.3％甲醛，置于37℃灭活24h，再加如前重量比的白油、司本、吐温混合制成IBD野毒油乳剂灭活苗。按每羽鸡用量计量，将制备的ND油乳剂灭活苗(1-4ml/羽)，河北保定生物药品厂产ND-Ⅰ系弱毒活苗(10-100个免疫剂量/羽)，进口(美国等地)IBD油乳剂灭活苗(1-4ml/羽)，河北保定生物药品厂产IBD弱毒活苗(10-100个免疫剂量/羽)，哈尔滨兽医研究所提供的IBD双价细胞活毒苗(10-150个免疫剂量/羽)及如上制备的IBD野毒油乳剂灭活苗在无菌室内按常规油乳剂灭活剂制作法，即用胶体磨乳化3-5分钟后得本专利技术高免攻毒液，然后分装、密封。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗鸡新城疫、法氏囊病高免攻毒液，其特征在于它是由按下述每只鸡用量计量的原料制成的油乳剂：ＮＤ油乳剂灭活苗 １－４ｍｌ／羽ＮＤ－Ｉ系弱毒活苗 １０－１００个免疫剂量／羽ＩＢＤ油乳剂灭活苗 １－４ｍｌ／羽ＩＢＤ弱毒活苗 １０ －１００个免疫剂量／羽ＩＢＤ双价细胞活毒苗 １０－１５０个免疫剂量／羽ＩＢＤ野毒油乳剂灭活苗 １－４ｍｌ／羽。

【技术特征摘要】
1.一种抗鸡新城疫、法氏囊病高免攻毒液，其特征在于它是由按下述每只鸡用量计量的原料制成的油乳剂ND油乳剂灭活苗 1-4ml/羽ND-Ⅰ系弱毒活苗10-100个免疫剂量/羽IBD油乳剂灭活苗1-4ml/羽IBD弱毒活苗10-100个免疫剂量/羽IBD双价细胞活毒苗 10-150个免疫剂量/羽IBD野毒油乳剂灭活苗1-4ml/羽2.一种抗新鸡新城疫、法氏囊病高免攻毒液的制备方法，其特征在于(1)先制备ND油乳剂灭活苗a、接毒取ND-Ⅳ系(HA价1∶64-1280)接种孵化鸡胚，b、照蛋选胚，c、收集鸡胚毒液，d、灭活平衡，e、制备油相和水相按重量比，将2份硬脂酸铝，94份10号白油研磨后加入6份司本-80搅拌至透明成油相，另按重量比将4份吐温-80加入96份灭活毒液，充分振荡...

【专利技术属性】
技术研发人员：鹿瑞麟，李凯伦，冯伟，
申请(专利权)人：鹿瑞麟，
类型：发明
国别省市：13[中国|河北]