一种同时测定土壤中8种对羟基苯甲酸酯类化合物的方法技术

本发明专利技术公开了一种同时测定土壤中8种对羟基苯甲酸酯类化合物的方法，首先通过采用ASE加速溶剂萃取、SPE小柱相结合净化，通过探索目标物的萃取和净化条件，成功从土壤样品中萃取得到上述8种羟基苯甲酸酯类化合物，且提取效率高、回收率高；再通过衍生试剂、衍生温度、衍生时间多种条件进行探索，得到了优异衍生的样品预处理条件，从而提高了样品分析时的准确度、同时从源头上降低了仪器分析时进样口污染的风险，又可以节省仪器维护清洁的人力、物力、时间成本，成功实现了对土壤中8种对羟基苯甲酸酯类化合物进行定量测定，具有较大的应用前景。

A method for simultaneous determination of 8 p-hydroxybenzoate compounds in soil

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定土壤中8种对羟基苯甲酸酯类化合物的方法
本专利技术涉及土壤污染物测定
，更具体地，涉及一种同时测定土壤中8种对羟基苯甲酸酯类化合物的方法。
技术介绍
对羟基苯甲酸酯(MeP)是一种防腐剂和抑菌剂，广泛应用于食品、药品和化妆品等行业。研究已证实对羟基苯甲酸具有一定的生殖毒性、发育毒性以及雌激素活性。常用的对羟基苯甲酸酯类(Parabens)包括对羟基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯、丁酯、异丙酯和异丁酯。此类防腐剂已在人体血液和尿液中广泛检出，在人体内主要以代谢物对羟基苯甲酸的形式存在。土壤中的parabens的污染也能够威胁人类的健康。有研究表明，普通农业土壤中MeP浓度分布在1.21至2.74ng/g之间，施用市政污泥后土壤中MeP浓度为1.61至1.72ng/g，工业地区土壤中MeP的浓度较高为8.04ng/g，说明工业地区土壤中MeP的污染较为严重。研究可以看出，不同类型的土壤中都能够检测到对羟基苯甲酸酯类的残留，表明对羟基苯甲酸酯类对于土壤的污染也较为普遍。因此，建立一个高选择性和高灵敏度的方法来检测土壤中对羟基苯甲酸酯具有非常重要的意义。目前，有关对羟基苯甲酸酯的定量方法研究主要还是集中在药品、化妆品、食物及污水方面，仅有赵佳慧等(2018)(赵佳慧,冯精兰,席楠楠,etal.超高效液相色谱-三重四极杆质谱测定沉积物中6种对羟基苯甲酸酯及其代谢产物[J].分析化学,2018(2):260-264.)及中国专利CN106680401A公开了一种利用超高效液相色谱-三重四极杆质谱同时测定沉积物中6种对羟基苯甲酸酯及其代谢产物的方法，然而其测定方法不能很好的覆盖常见的羟基苯甲酸酯类检测对象，且在面对土壤这类基质比较复杂的样品及测定组分比较多的情况下，定性过程较为困难，无法同时提取和测定对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸庚酯、对羟基苯甲酸苄酯；同时现有技术在涉及类似于土壤这类基质比较复杂的样品，当色谱系统进样口被高温区物质污染后，严重影响测试结果的准确度，但解决方式仅停留在污染后如何处理的层面，无法从源头上解决降解问题。目前，使用GC-MS测试土壤中8种对羟基苯甲酸酯类化合物还未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术中存在的上述缺陷和不足，首先提供一种同时提取土壤样品中8种羟基苯甲酸酯类化合物的方法。本专利技术的第二个目的在于提供一种同时测定土壤中8种对羟基苯甲酸酯类化合物的方法。本专利技术的上述目的是通过以下技术方案给予实现的：一种同时提取土壤样品中8种羟基苯甲酸酯类化合物的方法，包括如下步骤：S1.萃取：称取冻干研磨过筛后的土壤样品，以乙酸乙酯-甲醇(1:1，v/v)混合溶剂为萃取剂，使用加速溶剂萃取仪进行萃取；S2.净化：将S1的萃取液浓缩至1mL；在GCB-NH2小柱上加入1g无水硫酸钠，用4mL甲苯-乙腈混合液(1:3，v/v)预淋洗，再转移样品至净化柱上，用20mL甲苯-乙腈混合液(1:3，v/v)洗脱，洗脱液氮气吹干；所述8种羟基苯甲酸酯类化合物为MeP(对羟基苯甲酸甲酯)、EtP(对羟基苯甲酸乙酯)、PrP(对羟基苯甲酸丙酯)、BuP(对羟基苯甲酸丁酯)；IBuP(对羟基苯甲酸异丁酯)、IPrP(对羟基苯甲酸异丙酯)、HeP(对羟基苯甲酸庚酯)、BzP(对羟基苯甲酸苄酯)。定量测定的关键前提在于能否中待测样品中获取相应的目标物，本专利技术通过采用ASE加速溶剂萃取、SPE小柱相结合净化，通过探索目标物的萃取和净化条件，成功从土壤样品中萃取得到上述8种羟基苯甲酸酯类化合物，其样品的回收率高，可用于后续的仪器定量分析。优选地，土壤样品与萃取剂的用量比为10g/40mL。优选地，以硅藻土为分散分散剂，将土壤样品与硅藻土混匀后，装样，进行萃取。优选地，步骤S1所述加速溶剂萃取仪萃取条件为：载气压力1.0Mpa，加热温度100℃，萃取池压力1600psi，预加热平衡5min，静态萃取时间5min，溶剂淋洗体积60％池体积，氮气吹扫时间90s。优选地，所述浓缩为将萃取液使用旋转蒸发仪设定加热温度于60℃，真空度保持＞260Pa进行浓缩。一种同时测定土壤中8种对羟基苯甲酸酯类化合物的方法，包括如下步骤：S1.标准曲线的绘制：将含MeP、EtP、PrP、BuP、IBuP、IPrP、HeP、BzP8种对羟基苯甲酸酯类化合物标准溶液配制成5个浓度点的混合标准系列，同时加入内标标准溶液，浓度为500μg/L，各点质量浓度分别为50、100、250、500、1000μg/L，将溶剂挥发至干，再加入150μLDMF+50μL(99％BSTFA+1％TMCS)衍生化试剂进行衍生化反应，进气相色谱质谱联用仪进行测定；以目标物的保留时间、质谱图、碎片离子质荷比以及丰度等信息比较对目标化合物进行定性分析；以目标化合物浓度和内标化合物浓度比值为横坐标，以目标化合物定量离子响应值和内标化合物定量离子响应值比值为纵坐标，绘制标准曲线；S2.待测样品的前处理及含量测定：按权利要求1～4任一项所述方法同时提取待测土壤样品中的8种对羟基苯甲酸酯类化合物；向吹干的样品加入1μL浓度为100mg/L的内标溶液，将溶剂挥干，再依次加入150μL的DMF和50μL的99％BSTFA+1％TMCS衍生化试剂，于30℃下衍生45min，进气相色谱质谱联用仪进行测定；通过目标物标准曲线系列浓度与其对于的特征离子峰面积建立线性关系，再根据样品中该特征离子峰面积计算样品浓度；所述内标物为对羟基苯甲酸苄酯-d7(Benzyl-d7Paraben)和对羟基苯甲酸丙酯-d4(和Propylparaben-d4)；所述8种羟基苯甲酸酯类化合物为MeP(对羟基苯甲酸甲酯)、EtP(对羟基苯甲酸乙酯)、PrP(对羟基苯甲酸丙酯)、BuP(对羟基苯甲酸丁酯)；IBuP(对羟基苯甲酸异丁酯)、IPrP(对羟基苯甲酸异丙酯)、HeP(对羟基苯甲酸庚酯)、BzP(对羟基苯甲酸苄酯)。优选地，所述气相色谱质谱联用的色谱柱为：HP-5MS,30m×0.25μm×0.25mm；色谱条件：进样口温度：280℃，不分流；进样量：1.0μL，柱流量：1.0mL/min；柱温：100℃保持1min，以12℃/min升温至270℃；质谱条件：离子源温度：230℃；离子化能力70eV；接口温度：280℃；四级杆温度：150℃；扫描模式：选择离子模式模式。本专利技术上述方法利用气质联用仪结合ASE加速溶剂萃取对土壤中8种对羟基苯甲酸酯类化合物同时测定。利用ASE加速溶剂萃取，使用气相色谱-质谱法检测土壤中8种对羟基苯甲酸酯类化合物的方法；利用ASE加速溶剂萃取优化了萃取剂的选择，最终选择了乙酸乙酯-甲醇组合进行萃取；优化了净化步骤，采用GCB-NH2小柱进行净化；优化了目标物的衍生化条件，合理的选择了衍生化试剂、温度、时间。从而在保障土壤中8种对羟基苯甲酸酯类化合物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种同时提取土壤样品中8种羟基苯甲酸酯类化合物的方法，其特征在于，包括如下步骤：/nS1.萃取：称取冻干研磨过筛后的土壤样品，以体积比为1:1的乙酸乙酯-甲醇混合溶剂为萃取剂，使用加速溶剂萃取仪进行萃取；/nS2.净化：将S1的萃取液浓缩至1mL；在GCB-NH2小柱上加入1g无水硫酸钠，用4mL体积比为1：3的甲苯-乙腈混合液预淋洗，再转移样品至净化柱上，用20mL体积比为1：3的甲苯-乙腈混合液洗脱，洗脱液氮气吹干；/n所述8种羟基苯甲酸酯类化合物为对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸庚酯、对羟基苯甲酸苄酯。/n

【技术特征摘要】
1.一种同时提取土壤样品中8种羟基苯甲酸酯类化合物的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1.萃取：称取冻干研磨过筛后的土壤样品，以体积比为1:1的乙酸乙酯-甲醇混合溶剂为萃取剂，使用加速溶剂萃取仪进行萃取；
S2.净化：将S1的萃取液浓缩至1mL；在GCB-NH2小柱上加入1g无水硫酸钠，用4mL体积比为1：3的甲苯-乙腈混合液预淋洗，再转移样品至净化柱上，用20mL体积比为1：3的甲苯-乙腈混合液洗脱，洗脱液氮气吹干；
所述8种羟基苯甲酸酯类化合物为对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸庚酯、对羟基苯甲酸苄酯。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，土壤样品与萃取剂的用量比为10g/40mL。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，以硅藻土为分散剂，将土壤样品与硅藻土混匀后，装样，进行萃取。


4.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，步骤S1所述加速溶剂萃取仪萃取条件为：载气压力1.0Mpa，加热温度100℃，萃取池压力1600psi，预加热平衡5min，静态萃取时间5min，溶剂淋洗体积60％池体积，氮气吹扫时间90s。


5.一种同时测定土壤中8种对羟基苯甲酸酯类化合物的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1.标准曲线的绘制：将含MeP、EtP、PrP、BuP、IBuP、IPrP、HeP、BzP8...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊刚，农汉榜，王继忠，王俊，
申请(专利权)人：广电计量检测南宁有限公司，广州广电计量检测股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广西;45