一种检测人类免疫缺陷病毒的试剂盒制造技术

本发明专利技术了公开了一种检测人类免疫缺陷病毒的试剂盒，涉及核酸检测技术领域。本发明专利技术公开的试剂盒包括：引物探针预混液、阳性质控品、阴性质控品和反应预混液。该试剂盒针对人类免疫缺陷病毒设计了特定序列的引物和探针组合，其特异性高，覆盖度好；极大提高了芯片进孔效率，使用热启动Taq酶和UDG酶，有效降低了反应假阳性；能够有效检测DNA终浓度仅为1ng/μL的样本，有效分辨终浓度低至1copy/μL的标准品，灵敏度、准确性和稳定性更高，可以绝对定量，反应时间更快，成本更低。扩大了该试剂盒的使用范围，能够满足临床上超早期筛查的技术需求，还可以广泛应用于临床对于HIV活性的动态监测，以及对于抗病毒药物疗效的评估。

【技术实现步骤摘要】
一种检测人类免疫缺陷病毒的试剂盒
本专利技术涉及核酸检测
，具体涉及一种检测人类免疫缺陷病毒的试剂盒。
技术介绍
人类获得性免疫缺陷综合征(AcquiredImmunodeficiencySyndrome，AIDS)，又称艾滋病，是由人类免疫缺陷病毒(HumanImmunodeficiencyVirus，HIV)引起的传染性疾病。1983年，HIV在美国首次被发现。它是一种感染人类免疫系统细胞的慢病毒，属于逆转录病毒的一种，根据其基因型差异分为HIV-1和HIV-2两个大型，各大型包括多种亚型。HIV通过破坏人体的T淋巴细胞，进而阻断细胞免疫和体液免疫过程，导致免疫系统瘫痪，从而致使各种疾病在人体内蔓延，最终导致艾滋病。目前，检测HIV的方法种类较多，主要包括HIV抗体及HIV核酸检测等。其中，HIV抗体检测包括筛查试验和确证试验，筛查试验包括ELISA法、化学发光法或免疫荧光试验等，确证试验常用的方法是免疫印迹法，这种方法简单、快速、成本较低，但灵敏度、精确度不高，且不能定量。特别是低浓度的样本，处于窗口期的新近感染者筛查试验也本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测人类免疫缺陷病毒的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括引物探针预混液；/n所述的引物探针预混液包括HIV-cDNA的引物对、人GAPDH基因的引物对、HIV-cDNA的荧光探针和人GAPDH基因的荧光探针；/n所述HIV-cDNA的引物对为：/n上游引物：5’-TTGACTAGCGGAGGCTAGA-3’；/n下游引物：5’-CCCTGGCCTTAACCGAAT-3’；/n所述人GAPDH基因的引物对为：/n上游引物：5’-CTAGCTGGCCCGATTTCTCC-3’；/n下游引物：5’-CGCCCAATACGACCAAATCAGA-3’；/n所述HIV-cDNA的荧光探针的核苷...

【技术特征摘要】
1.一种检测人类免疫缺陷病毒的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括引物探针预混液；
所述的引物探针预混液包括HIV-cDNA的引物对、人GAPDH基因的引物对、HIV-cDNA的荧光探针和人GAPDH基因的荧光探针；
所述HIV-cDNA的引物对为：
上游引物：5’-TTGACTAGCGGAGGCTAGA-3’；
下游引物：5’-CCCTGGCCTTAACCGAAT-3’；
所述人GAPDH基因的引物对为：
上游引物：5’-CTAGCTGGCCCGATTTCTCC-3’；
下游引物：5’-CGCCCAATACGACCAAATCAGA-3’；
所述HIV-cDNA的荧光探针的核苷酸序列为：
5’-CTGACGCTC+TCGCACCCATCTCTC-3’；
所述人GAPDH基因的荧光探针的核苷酸序列为：
5’-TCCGGGTGA+TGCTTTTCCTAGA-3’；
其中“+”表示3’端的碱基为锁核酸修饰碱基。


2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述HIV-cDNA和/或人GAPDH基因的荧光探针的5’端含有荧光报告基团FAM和/或CY3，3’端含有荧光淬灭基团BHQ-1和/或BHQ-2。


3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的HIV-cDNA的荧光探针的5’端含有荧光报告基团FAM，3’端含有荧光淬灭基团BHQ-1；
所述的人GAPDH基因的荧光探针的5’端含有荧光报告基团CY3，3’端含有荧光淬灭基团BHQ-2。


4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的引物探针预混液中用于检测HIV-cDNA的引物对、人GAPDH基因的引物对、HIV-cDNA的荧光探针和人GAPDH基因的荧光探针的浓度比为2:2:1:1。


5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括阳性质控品和阴性质控品；
所述的阳性质控...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘一博，金鑫浩，任鲁风，张未来，于军，
申请(专利权)人：宁波胤瑞生物医学仪器有限责任公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33