嵌合抗原受体介导的细胞靶向制造技术

本文公开了使用含至少一个DNA结合结构域和切割结构域或切割半结构域的经工程改造的核酸酶在能够保持细胞活力的条件下工程改造细胞以表达CAR的组合物和方法，其中所述细胞还具有失活的TCR、HPRT、PD1、CISH和/或HLA基因。还提供了编码核酸酶的多核苷酸，包含编码核酸酶的多核苷酸的载体，包含编码核酸酶的多核苷酸的细胞和/或包含核酸酶的细胞。

Cell targeting mediated by chimeric antigen receptor

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】嵌合抗原受体介导的细胞靶向相关申请的交叉引用本申请要求2017年8月8日提交的美国临时申请号62/542,511；2017年11月3日提交的美国临时申请62/581,290；2018年1月3日提交的美国临时申请62/613,258和2018年4月4日提交的美国临时申请号62/652,672的权益，其公开内容通过引用其全文的方式纳入本文。
本公开内容属于人细胞(包括淋巴细胞和干细胞)的基因组修饰的领域。
技术介绍
基因治疗对于人类治疗学的新时代拥有巨大的潜能。这些方法将实现对于标准医疗实践尚未解决的病症的治疗。基因治疗可以包括基因编辑技术的许多变化形式，诸如基因座的破坏和修正，以及插入可表达的转基因，所述可表达的转基因可以通过融合于该转基因的特异性外源性启动子控制，或通过存在于插入基因组的位点处的内源性启动子控制，以及经由附加型载体系统表达转基因。转基因的递送和插入是就该技术的任何实际实施而言必须解决的障碍的实例。例如，尽管许多基因递送方法对于治疗应用有潜在的可行性，但是它们全都涉及安全性、持久性和表达水平之间大量的权衡。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离的遗传修饰的T细胞，其包含：编码嵌合抗原受体(CAR)的第一多核苷酸和包含编码融合蛋白的序列的第二多核苷酸，所述融合蛋白包含β-2-微球蛋白(B2M)蛋白和HLA-E和/或HLA-G蛋白，其中所述第一和第二多核苷酸被整合到T细胞受体中-α(TCRA)基因中。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170808 US 62/542,511;20171103 US 62/581,290;20181.一种分离的遗传修饰的T细胞，其包含：编码嵌合抗原受体(CAR)的第一多核苷酸和包含编码融合蛋白的序列的第二多核苷酸，所述融合蛋白包含β-2-微球蛋白(B2M)蛋白和HLA-E和/或HLA-G蛋白，其中所述第一和第二多核苷酸被整合到T细胞受体中-α(TCRA)基因中。


2.如权利要求1所述的遗传修饰的T细胞，其中，内源性B2M基因在所述T细胞中失活。


3.如权利要求1或2所述的遗传修饰的T细胞，其中，免疫检查点基因在所述T细胞中失活。


4.如权利要求1-3中任一项所述的遗传修饰的T细胞，其中，所述第一和第二多核苷酸通过自切割P2A肽连接。


5.如权利要求1-4中任一项所述的遗传修饰的T细胞，其中，所述第二多核苷酸还包含编码所述B2M和HLA-E-或HLA-G-编码序列之间的接头的序列。


6.如权利要求4所述的遗传修饰的T细胞，其中，所述接头包含1、2、3、4、5或...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·康韦，S·贾殷，G·K·李，A·雷克，L·N·特鲁翁，
申请(专利权)人：桑格摩生物治疗股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US