一种一管式检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的试剂盒和方法技术

本发明专利技术公开了一种一管式检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的试剂盒和方法，所述试剂盒包括CYP2C9 1075A＞C与VKORC1 1639G>A联合检测反应液。实验证明，本发明专利技术所述联合检测反应液中的引物和探针特异性强，能实现直接采用唾液/血样进行PCR扩增分析，且可在一个反应管中实现两个位点的分型检测，不仅明显提高了检测效率，同时也明显缩短了检测周期，并且具有敏感性好、特异性高、准确可靠、操作方便快捷等优点。

A tube test kit and method for CYP2C9 and VKORC1 gene polymorphism

【技术实现步骤摘要】
一种一管式检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的试剂盒和方法
本专利技术是涉及一种一管式检测CYP2C9和VKORC1基因多态性检测的试剂盒和方法，属于体外基因检测

技术介绍
华法林是临床上广泛使用的一种双香豆素衍生物类口服抗凝药，其抗凝治疗的有效性和安全性成为影响患者治疗成功与否的重要因素。华法林的有效治疗范围较窄，疗效影响因素复杂，剂量-效应之间存在明显的个体差异和种族差异。黄种人华法林平均剂量约3.0mg·d-1，白种人约4.5mg·d-1，黑种人约5.7mg·d-1。华法林用量不足容易形成血栓，使用过量可增加出血风险。据估计，服用华法林的患者中，每年有15.2％的人发生出血副作用，其中致命性的大出血占3.5％，不同个体间华法林稳定剂量的差异可达20倍以上，这使得临床不易掌握华法林剂量。华法林由S-华法林和R-华法林组成消旋异构体，其中S-华法林的抗凝活性约为R-华法林的5倍，提供60％～70％华法林的抗凝活性。华法林体外抗凝无效，口服吸收后通过抑制肝脏维生素K的氧化还原酶，使无活性的氧化型维生素K无法转化为有活性的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种一管式检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的试剂盒，其特征在于：包括CYP2C91075A＞C与VKORC1 1639G>A联合检测反应液；所述CYP2C9 1075A＞C与VKORC1 1639G>A联合检测反应液包括针对CYP2C9 1075A＞C位点的SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示序列的引物组及SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示序列的探针组，针对VKORC1 1639G>A位点的SEQ IDNO.5和SEQ ID NO.6所示序列的引物组及SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示序列的探针组。/n

【技术特征摘要】
1.一种一管式检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的试剂盒，其特征在于：包括CYP2C91075A＞C与VKORC11639G>A联合检测反应液；所述CYP2C91075A＞C与VKORC11639G>A联合检测反应液包括针对CYP2C91075A＞C位点的SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示序列的引物组及SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示序列的探针组，针对VKORC11639G>A位点的SEQIDNO.5和SEQIDNO.6所示序列的引物组及SEQIDNO.7和SEQIDNO.8所示序列的探针组。


2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所有探针的5'端标记有报告荧光染料FAM、VIC、ROX、CY5中的任意一种，所有探针的3'端均标记有淬灭荧光染料BHQ。


3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：针对CYP2C91075A＞C位点的野生型探针的5’端标记有报告荧光染料FAM，针对CYP2C91075A＞C位点的突变型探针的5’端标记有报告荧光染料VIC，针对VKORC11639G>A位点的野生型探针的5’端标记有报告荧光染料ROX，针对VKORC11639G>A位点的突变型探针的5’端标记有报告荧光染料CY5。


4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的CYP2C91075A＞C与VKORC11639G>A联合检测反应液中还包括改良型HotStarTaq酶、直扩PCR扩增缓冲液、直扩试剂和稳定剂。


5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述直扩PCR扩增缓冲液的组成为：Tris-HCl缓冲溶液，其中含有200...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱田，李春雨，章泽林，
申请(专利权)人：上海未凡生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31