一种病毒样本保存液、核酸提取试剂及病毒核酸提取方法技术

本发明专利技术公开了一种具有裂解功能的病毒样本保存液，及病毒核酸提取的方法。由于样本保存、裂解一步完成，无需另外加入裂解液，避免了病毒样本的进一步稀释，可以在病毒核酸提取过程中增加样本投入量，提高后续检测的灵敏度。同时由于病毒样本的保存、裂解一步完成，减少核酸检测的步骤，优化流程，提高样本检测效率。与常规的病毒样本保存液如PBS缓冲液相比，使用本发明专利技术的病毒样本保存液的保存效果良好，可以获得更多量的检测样本，提高了检测灵敏度，简化了处理流程。

A virus sample preservation solution, nucleic acid extraction reagent and virus nucleic acid extraction method

【技术实现步骤摘要】
一种病毒样本保存液、核酸提取试剂及病毒核酸提取方法
本专利技术涉及分子生物学检测技术，特别是涉及及一种病毒样本的保存液、病毒核酸提取试剂及病毒核酸的提取方法。
技术介绍
正常人咽峡部应有口腔正常菌群，而无致病菌生长。咽部的细菌均来自外界，正常情况下不致病，但在机体全身或局部抵抗力下降和其他外部因素下可以出现感染等而导致疾病。因此，从咽部拭子分离出致病菌，有助于白喉、化脓性扁桃体炎、急性咽喉炎、呼吸道感染等疾病的诊断。目前已上市的病毒样本保存液仅有保护病毒稳定的作用，但病毒核酸的提取时，特别是传染性较强的病毒核酸提取，为保证操作人员安全，提取过程建议在自动化核酸提取仪上完成，而现有技术在普通磁棒法核酸提取仪上难以实现通过提高样本用量来提高核酸总量，通过大型自动化提取工作站可实现，但检测试剂用量会随着体系的扩大而扩大，检测成本也随之提高。目前已上市病毒样本保存液多采用Hank’s平衡盐、PBS等缓冲液保护病毒样本的稳定性。影响病毒核酸检测的因素有很多，例如：(1)样本中病毒核酸的含量有限；(2)在后续的病毒核酸提取时病毒样本保存液需本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种病毒样本保存液，其特征在于，所述病毒样本保存液包括：硫氰酸胍、吐温-20、聚多卡醇、乙醇，柠檬酸三钠、柠檬酸和二硫苏糖醇。/n

【技术特征摘要】
1.一种病毒样本保存液，其特征在于，所述病毒样本保存液包括：硫氰酸胍、吐温-20、聚多卡醇、乙醇，柠檬酸三钠、柠檬酸和二硫苏糖醇。


2.根据权利要求1所述的病毒样本保存液，其特征在于，所述硫氰酸胍的终浓度为3～6mol/L；所述吐温-20的体积百分比为2％～5％；所述聚多卡醇的体积百分比为1％～3％；所述乙醇的体积百分比为20％～40％；所述柠檬酸三钠的终浓度为50～80mmol/L；所述柠檬酸的终浓度为0.5～0.8mmol/L；所述二硫苏糖醇的质量体积百分比为0.1～0.8g/100mL。


3.根据权利要求1所述的病毒样本保存液，其特征在于，所述病毒样本为DNA病毒、RNA病毒或噬菌体。


4.根据权利要求3所述的病毒样本保存液，其特征在于，所述RNA病毒为冠状病毒、丝状病毒、沙粒病毒或副黏病毒。


5.根据权利要求4所述的病毒样本保存液，其特征在于，所述冠状病毒为新型冠状病毒COVID-19。


6.根据权利要求5任一项所述的病毒样本保存液，其特征在于，所述病毒样本来源于人鼻、咽拭子样本。


7.一种与权利要求1～6任一项所述的病毒样本保存液配套使用的核酸提取试剂，其特征在于，所述核酸提取试剂不包括裂解液。


8.一种病毒核酸提取方法，其特征在于，所述核酸提取方法包括步骤：
(1)测试组样本配制：将病毒样本保存液与病毒样本混合，配制成测试组样本，所述病毒样本保存液可以裂解病毒，释放病毒核酸；
(2)病毒核酸提取：使用病毒核酸提取试剂对测试组样本中的病毒核酸进行提取和纯化，得到病毒核酸样本。


9.根据权利要求8所述的核酸提取方法，其特征在于，所述病毒样本保存液是权利要求1～6任一项所述的病毒样本保存液。


10.根据权利要求8所述的核酸提取方法，其特征在于，所述核酸提取试剂不包括裂解液。


11.一种病毒的检测方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯二环，周科隆，盛滔，熊磊，陈才夫，
申请(专利权)人：上海思路迪医学检验所有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31