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靶向核酸捕获和检测方法技术

技术编号:24160103 阅读:31 留言:0更新日期:2020-05-15 23:56
本发明专利技术公开了一种靶向核酸捕获和检测方法,其中所述捕获方法包括:从生物样本中释放核酸;如果目标是RNA,需要在逆转录酶的作用下逆转录为cDNA;用标记引物进行等温扩增;使用捕获试剂对目标核酸片段进行捕获。检测方法包括:从生物样本中释放核酸;如果目标是RNA,需要在逆转录酶的作用下逆转录为cDNA;用特异性标记的引物进行等温扩增,得到目标核酸片段;使用捕获试剂对目标核酸片段进行捕获;使用显示反应、PCR或测序方法对目标核酸片段进行检测。本申请的方法普适性强,且当样品中仅含微量目标核酸片段时,也能够富集和检测,同时目标核酸片段提取和检测时间大大缩短。

Targeted nucleic acid capture and detection method

【技术实现步骤摘要】
靶向核酸捕获和检测方法
本专利技术涉及医学检测领域,具体涉及靶向核酸捕获和检测方法。
技术介绍
自然界中无论是植物、动物还是病毒,核酸作为大部分生物的遗传物质,在遗传中起着不可替代的作用,为了研究生物的基因,就需要将DNA从细胞中提取出来,这个过程有很多方法可以实现,目前比较常用的有苯酚氯仿抽提法、离心柱法和磁珠法等。常规的化学抽提法使用苯酚、氯仿等试剂,毒性较大,长时间操作对人员健康有较大影响,而且核酸的回收率较低,损失量较大,由于操作体系大,不同实验人员操作重复性差;离心柱法和磁珠法提取是需要较多的样本,耗材多,核酸损失大,目标核酸量低时容易被漏掉,无法获得目标核酸片段。另外,对于目标核酸含量较低时,由于检测方法灵敏度有限,也会出现目标核酸存在但是无法检测出的现象,为了解决上述问题,本申请提供了一种靶向核酸捕获和检测的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种靶向核酸捕获和检测方法,解决目标核酸量低时不易提取和检测的问题。为解决上述的技术问题,本专利技术采用以下技术方案:一种靶向核酸捕获方法,其特本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种靶向核酸捕获方法,其特征在于,包括:/n步骤a: 释放生物样本中的核酸;/n步骤c:加入标记引物、等温扩增酶,扩增目标核酸片段;/n步骤d:使用捕获试剂捕获标记目标核酸片段。/n

【技术特征摘要】
1.一种靶向核酸捕获方法,其特征在于,包括:
步骤a:释放生物样本中的核酸;
步骤c:加入标记引物、等温扩增酶,扩增目标核酸片段;
步骤d:使用捕获试剂捕获标记目标核酸片段。


2.根据权利要求1所述的靶向核酸捕获方法,其特征在于,所述生物样本是选自细胞株、组织学切片、活检标本、福尔马林固定石蜡包埋组织、体液、粪便、尿液、血浆、血清、全血、分离的血细胞和从血液中分离的细胞群组中的一种。


3.根据权利要求1所述的靶向核酸捕获方法,其特征在于,若以RNA为目标,则步骤a和步骤c之间还包括步骤b:加入逆转录酶,使RNA逆转录为cDNA。


4.根据权利要求1所述的靶向核酸捕获方法,其特征在于,所述步骤a中采用酶、表面活性剂、双亲离子法使细胞破碎或裂解,释放生物样本中的核酸。


5.根据权利要求1所述的靶向核酸捕获方法,其特征在于,所述标记目标核酸片段捕获方法为核酸探针杂交捕获、生物素标记捕获、地...

【专利技术属性】
技术研发人员:卢涛
申请(专利权)人:卢涛
类型:发明
国别省市:四川;51

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