人体皮肤菌群DNA的提取方法技术

本申请提供的人体皮肤菌群DNA的提取方法中将CTAB‑酚仿法与试剂盒有机结合，既利用了CTAB与蛋白和多聚糖形成复合物，酚仿混合液将其抽提去除，留下DNA，又利用了试剂盒的吸附柱多次洗涤，去除杂质，得到高质量的DNA，以达到后续建库及高通量测序的要求；且与现有的皮肤菌群总DNA提取试剂盒相比，操作简便，不需要特殊的仪器设备及配件；本发明专利技术提取的DNA都能PCR扩增出准确的目的条带，并且DNA浓度纯度都能满足高通量测序要求。

Extraction of DNA from human skin flora

【技术实现步骤摘要】
人体皮肤菌群DNA的提取方法
本申请涉及DNA提取
，尤其涉及一种人体皮肤菌群DNA的提取方法。
技术介绍
人体的皮肤表面生活着许多肉眼看不到的微生物，而这些微生物与人体健康和疾病关系密切，特别是对皮肤的健康至关重要。为了研究皮肤到底存在哪些种类的微生物影响人体健康，用棉拭子擦拭皮肤取样后，进行皮肤菌群DNA的提取是最关键的一步，直接关系到后续测序和分析结果。现有皮肤菌群DNA多用商品化的试剂盒进行提取，但是皮肤菌群专用试剂盒价格昂贵，提取步骤繁琐，对样本质量要求较高，因此，专利技术一种简单、价格低廉、效果优越的人体皮肤菌群DNA提取方法十分必要。
技术实现思路
本申请提供了一种人体皮肤菌群DNA的提取方法，以提供一种简单、价格低廉、效果优越的人体皮肤菌群DNA提取方法。为了解决上述技术问题，本申请实施例公开了如下技术方案：本申请提供了一种人体皮肤菌群DNA的提取方法，其特征在于，包括：将取样后的拭子置于细菌保存液中得到菌液a，将所述菌液a涡旋振荡使菌群脱离所述拭子得到菌液b；将本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.人体皮肤菌群DNA的提取方法，其特征在于，包括：/n将取样后的拭子置于细菌保存液中得到菌液a，将所述菌液a涡旋振荡使菌群脱离所述拭子得到菌液b；/n将所述菌液b通过离心使菌群沉降于第一离心管的底部；/n向所述第一离心管中加入预热的CTAB溶液得到菌液c，将所述菌液c涡旋振荡、加热处理后得到菌液d；/n向所述菌液d中加入酚仿混合液，经涡旋振荡后得到菌液e；/n移取所述菌液e的上清液至第二离心管内，向所述第二离心管内加入试剂盒的缓冲液后混合均匀得到菌液f；/n将全部所述菌液f依次过试剂盒的吸附柱至菌群DNA吸附于所述吸附柱上；/n向所述吸附柱内加入试剂盒的洗涤液后得到菌液g；/n将所述菌液g移...

【技术特征摘要】
1.人体皮肤菌群DNA的提取方法，其特征在于，包括：
将取样后的拭子置于细菌保存液中得到菌液a，将所述菌液a涡旋振荡使菌群脱离所述拭子得到菌液b；
将所述菌液b通过离心使菌群沉降于第一离心管的底部；
向所述第一离心管中加入预热的CTAB溶液得到菌液c，将所述菌液c涡旋振荡、加热处理后得到菌液d；
向所述菌液d中加入酚仿混合液，经涡旋振荡后得到菌液e；
移取所述菌液e的上清液至第二离心管内，向所述第二离心管内加入试剂盒的缓冲液后混合均匀得到菌液f；
将全部所述菌液f依次过试剂盒的吸附柱至菌群DNA吸附于所述吸附柱上；
向所述吸附柱内加入试剂盒的洗涤液后得到菌液g；
将所述菌液g移至第三离心管内，向所述第三离心管内加入预热的洗脱液、离心后得到皮肤菌群DNA。


2.根据权利要求1所述的人体皮肤菌群DNA的提取方法，其特征在于，所述试剂盒为SanPrep柱式DNA胶回收试剂盒。


3.根据权利要求1所述的人体皮肤菌群DNA的提取方法，其特征在于，所述将取样后的拭子置于细菌保存液中得到菌液a，将所述菌液a涡旋振荡使菌群脱离所述拭子得到菌液b，包括：
将从皮肤表面取样后的拭子保存于细菌保存液中得到菌液a；
将所述菌液a于涡旋振荡器最大档位涡旋振荡至菌群完全脱离所述拭子得到菌液b。


4.根据权利要求1所述的人体皮肤菌群DNA的提取方法，其特征在于，所述将所述菌液b通过离心使菌群沉降于第一离心管的底部，包括：
量取所述菌液b至第一离心管内，将所述第一离心管以转速为12000rpm离心至所述第一离心管的底部体系稳定。


5.根据权利要求1所述的人体皮肤菌群DNA的提取方法，其特征在于，所述向所述第一离心...

【专利技术属性】
技术研发人员：盖中涛，赵璐，葛永胜，刘毅，
申请(专利权)人：济南市儿童医院，
类型：发明
国别省市：山东;37