重组CA16病毒样颗粒的纯化工艺、重组CA16病毒疫苗及其制备方法技术

本发明专利技术实施例公开了一种重组CA16病毒样颗粒的纯化工艺、CA16病毒疫苗及其制备方法。所述纯化工艺包括有细胞发酵、破碎、澄清、微滤、超滤和若干层析步骤，所述层析步骤包括：离子交换层析；使用疏水层析介质Phenyl6FF进行疏水层析；分子筛层析。实施本发明专利技术，可显著提高抗原回收率和蛋白除杂率。

Purification of recombinant CA16 virus like particles, recombinant CA16 virus vaccine and its preparation

【技术实现步骤摘要】
重组CA16病毒样颗粒的纯化工艺、重组CA16病毒疫苗及其制备方法
本专利技术涉及重组CA16病毒疫苗制备技术，尤其涉及一种重组CA16病毒样颗粒的纯化工艺、重组CA16病毒疫苗及其制备方法。
技术介绍
现有重组CA16病毒样颗粒的纯化工艺为：细胞破碎液→澄清、微滤、超滤→离子交换层析CaptoQ(GE)→羟基磷灰石层析CHT(伯乐)→分子筛层析SephacarylS300HR(GE)。在这一工艺中，须使用羟基磷灰石层析介质CHT，在重组CA16病毒样颗粒纯化过程中，CHT层析抗原回收率仅为30-45％。在这一工艺中，须使用强阴离子交换层析介质CaptoQ，在重组CA16病毒样颗粒纯化过程中，进行大量载量测试，使用CA16超滤产物样品上样于CaptoQ离子交换层析柱，其填料载量为1-2mg/mL，而上样样品的蛋白含量为7.5mg/mL，表明假设200L上样样品则需要375-750L的填料，无疑这对纯化设备选型有很大压力，耗费大量成本在填料及设备上。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，提供一本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重组CA16病毒样颗粒的纯化工艺，包括有细胞发酵、破碎、澄清、微滤、超滤和若干层析步骤，其特征在于，所述层析步骤包括：/n离子交换层析；/n使用疏水层析介质Phenyl6FF进行疏水层析；/n分子筛层析。/n

【技术特征摘要】
1.一种重组CA16病毒样颗粒的纯化工艺，包括有细胞发酵、破碎、澄清、微滤、超滤和若干层析步骤，其特征在于，所述层析步骤包括：
离子交换层析；
使用疏水层析介质Phenyl6FF进行疏水层析；
分子筛层析。


2.根据权利要求1所述的重组CA16病毒样颗粒的纯化工艺，其特征在于，所述疏水层析具体包括：
pH7.5-8.5的高盐硫酸铵缓冲液平衡疏水层析柱(Phenyl6FF)2-5个柱体积后上样，继续平衡1-3个柱体积，再使用pH7.5-8.5的低盐硫酸铵缓冲液洗脱，收集洗脱液UV280nm紫外吸收峰。


3.根据权利要求1或2所述的重组CA16病毒样颗粒的纯化工艺，其特征在于，所述离子交换层析采用离子交换层析介质NuviaTMHP-Q进行。


4.根据权利要求3所述的重组CA16病毒样颗粒的纯化工艺，其特征在于，所述离子交换层析具体包括：
pH7.5-8.5的Tris盐缓冲液平衡离子交换层析柱(NuviaTMHP-Q)2-5个柱体积后上样超滤蛋白液，平衡2个柱体积后，使用pH7.5-8.5的Tris低盐缓冲液洗脱，收集洗脱液UV280nm紫外吸收峰。


5.根据权利要求1-4中任一项的所述的重组CA16病毒样颗粒的纯...

【专利技术属性】
技术研发人员：李进，唐敏，刘鹏，钟礼军，祝孟杰，郭靖，李国顺，
申请(专利权)人：深圳康泰生物制品股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44