一种测定血清α1-酸性糖蛋白的试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种测定血清α1‑酸性糖蛋白的试剂盒，其技术方案是其包括由试剂R1与试剂R2组成的液体双试剂组分，试剂R1和试剂R2的体积比优选为3:1，试剂盒组试剂R1包含有缓冲液、聚二乙醇‑4000包覆盖的Fe

【技术实现步骤摘要】
一种测定血清α1-酸性糖蛋白的试剂盒
本专利技术涉及医学免疫体外诊断试剂领域，具体是指一种测定血清α1-酸性糖蛋白的试剂盒。
技术介绍
α1-酸性糖蛋白，早期称乳清类粘蛋白，分子量约40000，包括等分子的己糖、己糖胺和唾液酸，是一种非特异性急性时相反应蛋白，也是人类血清中含糖量最多(含糖约45％)、酸性最强(pH为2.7-3.5)糖蛋白。主要由肝脏巨噬细胞和粒细胞产生,癌细胞也可合成。他与C反应蛋白一起被认为是反映炎症活动急性状态的敏感指标。在某些疾病中,特别是自身免疫性疾病中,其值升高很大。鉴于α1-酸性糖蛋白对炎症、感染反应早于体温及白细胞数的变化，故其指标数据广泛用于临床诊断，例如：(1)α1-酸性糖蛋白含量升高：病理情况下，白介素1刺激吞噬细胞释放出脂多聚糖，可促进α1-酸性糖蛋白的合成使血中水平升高，故α1-酸性糖蛋白是一种最稳定的早期呈阳性的急性时相反应物。如感染(炎症)、外伤、烧伤、手术、急性心肌梗死时α1-酸性糖蛋白含量升高。另外类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、克隆病、恶性肿瘤也增高，在癌转移时升高更明显。(2)α1-酸性糖蛋白浓度降低：肝细胞病变晚期、肾病综合症或其他原因所致尿中滤过的蛋白质量丢失、遗传因素和营养不良等疾病。现有试剂盒常用的α1-酸性糖蛋白检测方法是放射免疫分析法、酶联免疫法。这些技术存在诸多不足，如需要特殊的设备，样本需要预处理，不能上全自动生化分析仪进行批量检测分析等。
技术实现思路
为解决现有技术存在的问题和不足，本专利技术的目的是提供一种测定血清α1-酸性糖蛋白的试剂盒，该试剂盒运用聚二乙醇-4000包覆的Fe3O4磁流体来检测血清α1-酸性糖蛋白，提高检测灵敏度和稳定性。为实现上述目的，本专利技术的技术方案是包括有试剂R1和试剂R2，试剂R1与试剂R2的体积比为2.6～4.8：1；所述试剂R1包括以下组分：缓冲液15-25mmol/L聚二乙醇-4000包覆盖的Fe3O4磁流体1.0mg/ml；所述试剂R2包括以下组分：进一步设置是α1-酸性糖蛋白抗体种类为多克隆抗体或者单克隆抗体。进一步设置是试剂R1的pH值为3.40-3.90，试剂R2的pH值为3.60-6.86。进一步设置是所述的试剂R1和实际R2中的缓冲液均为PH值为6.8磷酸盐缓冲液。进一步设置是试剂R2中的稳定剂为海藻糖α和甘油。进一步设置是试剂R2中的表面活性剂为SDS、硬脂酸、十二烷基苯磺酸钠中的一种或其组合。进一步设置是防腐剂为山梨酸钾、苯甲酸钠、三氯叔丁醇中的一种或其组合。进一步设置是试剂R1与试剂R2的体积比为3:1。采用上述方案，本专利技术的优势在于：本专利技术α1-酸性糖蛋白试剂盒为液体双试剂，无需复溶配制可开瓶直接使用。通过在试剂R1中加入聚二乙醇-4000包覆盖的Fe3O4磁流体，提高了试剂的分析灵敏度。试剂R2中加入表面活性剂和稳定剂，提高了试剂的稳定性。本专利技术可以用于全自动生化分析仪的、灵敏度高、线性范围好、稳定性强，能够批量检测血清样本。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，根据这些附图获得其他的附图仍属于本专利技术的范畴。图1为本专利技术试剂盒与对照组试剂盒测量结果相关曲线。具体实施方式为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本专利技术作进一步地详细描述。实施例1组试剂R1成分如下：缓冲液15-25mmol/L聚二乙醇-4000包覆盖的Fe3O4磁流体1.0mg/ml试剂R2成分如下：本实施例试剂R1与试剂R2的体积比为2.6～4.8：1，优选为3:1。本实施例试剂R1和实际R2中的缓冲液均为PH值为6.8磷酸盐缓冲液，试剂R2中的稳定剂为海藻糖α和甘油，试剂R2中的表面活性剂为SDS、硬脂酸、十二烷基苯磺酸钠中的一种或其组合，防腐剂为山梨酸钾、苯甲酸钠、三氯叔丁醇中的一种或其组合。本专利技术中通过在试剂R1中加入聚乙二醇-4000包覆的磁性纳米颗粒，利用聚乙二醇-4000进行磁性粒子的表面修饰，提高了磁性粒子的稳定性，还能提高了其在酸性基底溶液中的分散性和靶向性，可有效避免纳米粒子的团聚及氧化，在静电吸附的作用下与羊抗人α1-酸性糖蛋白抗体结合，从而使抗体在磁性纳米颗粒上形成凝集，大大的提高了试剂的分析灵敏度。准确度验证试验：将本专利技术检测试剂盒作为常规方法实验组，市场上获得认可的一种准确度好、稳定性高的α1-酸性糖蛋白检测试剂盒作为选定参考测量程序对照组进行检测，对40个临床血清样本进行检测，检测结果如表一所示获得了两种试剂盒的相关性曲线(如图1所示)，结果表明，两组试剂盒的相关系数为0.9989，说明两者相关性比较好。证明本专利技术添加及更改的组分对其准确性不会造成影响。表一：本专利技术试剂盒与对照组试剂盒临床血清样本测量结果稳定性测定实验：开瓶稳定性：在2℃～8℃、无腐蚀性气体的避光环境中贮存试剂盒，检测本专利技术试剂盒及对照组试剂盒的稳定性。每月1号分别用两组试剂盒测定同一混合血清样本，测定三次取平均值。检测数据如表二所示。表二：本专利技术试剂盒与对照组试剂盒每月稳定性数据实验结果显示，本专利技术试剂盒在2℃～8℃、无腐蚀性气体的避光环境中贮存15个月稳定，而对照组试剂盒在2℃～8℃、无腐蚀性气体的避光环境中贮存12个月稳定性较本专利技术试剂盒低，说明本专利技术试剂盒更换缓冲液后稳定性增强。线性相关性验证试验：选取α1-酸性糖蛋白含量为350mg/dl的高值样本，用生理盐水进行系列稀释，配制6个不同浓度的样本，浓度依次为350mg/dl、280mg/dl、210mg/dl、140mg/dl、70mg/dl、0mg/dl。分别用本专利技术试剂盒及对照组试剂盒进行检测，每个浓度的样本分别测定三次，分别取平均值，检测结果如表三所示。表三：本专利技术试剂盒与对照组试剂盒各浓度样本检测结果如上表所示，本专利技术试剂盒与对照组试剂盒检测结果相关系数均大于0.990，且本专利技术试剂盒检测结果的相关系数略大于对照组试剂盒检测结果的相关系数，这表明本专利技术试剂盒具有更好的线性相关性。本专利技术中通过在试剂盒内试剂R1中加入聚乙二醇-4000包覆的磁性纳米颗粒，利用聚乙二醇-4000进行磁性粒子的表面修饰，提高了磁性粒子的稳定性，还能提高了其在酸性基底溶液中的分散性和靶向性，可有效避免纳米粒子的团聚及氧化，在静电吸附的作用下与羊抗人α1-酸性糖蛋白抗体结合，从而使抗体在磁性纳米颗粒上形成凝集，大大的提高了试剂盒的分析灵敏度。综上所述，本专利技术提供的α1-酸性糖蛋白检测试剂盒的稳定性，线性本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定血清α1-酸性糖蛋白的试剂盒，其特征在于包括有试剂R1和试剂R2，试剂R1与试剂R2的体积比为2.6～4.8：1/n所述试剂R1包括以下组分：/n缓冲液 15-25mmol/L/n聚二乙醇-4000包覆盖的Fe

【技术特征摘要】
1.一种测定血清α1-酸性糖蛋白的试剂盒，其特征在于包括有试剂R1和试剂R2，试剂R1与试剂R2的体积比为2.6～4.8：1
所述试剂R1包括以下组分：
缓冲液15-25mmol/L
聚二乙醇-4000包覆盖的Fe3O4磁流体1.0mg/ml；
所述试剂R2包括以下组分：





2.根据权利要求1所述的一种测定血清α1-酸性糖蛋白的试剂盒，其特征在于：α1-酸性糖蛋白抗体种类为多克隆抗体或者单克隆抗体。


3.根据权利要求1所述的一种测定血清α1-酸性糖蛋白的试剂盒，其特征在于：试剂R1的pH值为3.40-3.90，试剂R2的pH值为3.60-6.86。


4.根据权利要求1所述的一种测定...

【专利技术属性】
技术研发人员：王贤俊，郑蓓蕾，
申请(专利权)人：王贤俊，
类型：发明
国别省市：浙江;33