【技术实现步骤摘要】
用于检测人ADD3和CDH23基因甲基化的引物探针组合物、试剂盒及检测方法
本专利技术涉及基因检测
，尤其涉及一种用于检测人ADD3和CDH23基因甲基化的引物探针组合物、试剂盒及检测方法。
技术介绍
前列腺癌是男性中高发的一种恶性肿瘤。在美国，前列腺癌的发病率高居男性恶性肿瘤的第一位，其死亡率也仅次于肺癌高居第二位。随着生活、饮食习惯以及环境等因素的变化，我国前列腺癌的发病率近几年在迅速提高，在上海、北京等发达城市，前列腺癌已经成为男性泌尿系统第一大恶性肿瘤。目前，前列腺癌的早期检测手段主要是血清中前列腺癌抗原PSA浓度检测和直肠指检。检测异常的患者需要进行进一步的前列腺穿刺活检，以最终确认是否患有前列腺癌。但是这两种早期筛查方法都存在一定的短处，可能会导致非必要的活检穿刺和对临床不明显的患者进行过度筛查、过度治疗等。PSA作为前列腺癌早期诊断标记物被广泛接受和应用以来，大大降低了前列腺癌的死亡率，但同时也带来了临床上的过度诊断和过度治疗。为了减少前列腺癌患者的过度诊断和过度治疗，需要提供一种新的灵敏...
【技术保护点】
1.一种用于检测人ADD3和CDH23基因甲基化的引物探针组合物，其特征在于，包括：检测人ADD3基因甲基化的第一特异性引物及第一特异性探针，检测人CDH23基因甲基化的第二特异性引物及第二特异性探针，检测内参基因β-actin的第三特异性引物及第三特异性探针；/n所述第一特异性引物的正向引物具有如SEQ NO.1所示核苷酸序列，所述第一特异性引物的反向引物具有如SEQ NO.2所示核苷酸序列，所述第一特异性探针具有如SEQ NO.3所示核苷酸序列；/n所述第二特异性引物的正向引物具有如SEQ NO.4所示核苷酸序列，所述第二特异性引物的反向引物具有如SEQ NO.5所示核...
【技术特征摘要】
1.一种用于检测人ADD3和CDH23基因甲基化的引物探针组合物，其特征在于，包括：检测人ADD3基因甲基化的第一特异性引物及第一特异性探针，检测人CDH23基因甲基化的第二特异性引物及第二特异性探针，检测内参基因β-actin的第三特异性引物及第三特异性探针；
所述第一特异性引物的正向引物具有如SEQNO.1所示核苷酸序列，所述第一特异性引物的反向引物具有如SEQNO.2所示核苷酸序列，所述第一特异性探针具有如SEQNO.3所示核苷酸序列；
所述第二特异性引物的正向引物具有如SEQNO.4所示核苷酸序列，所述第二特异性引物的反向引物具有如SEQNO.5所示核苷酸序列，所述第二特异性探针具有如SEQNO.6所示核苷酸序列；
所述第三特异性引物的正向引物具有如SEQNO.7所示核苷酸序列，所述第三特异性引物的反向引物具有如SEQNO.8所示核苷酸序列，所述第三特异性探针具有如SEQNO.9所示核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的引物探针组合物，其特征在于，所述第一特异性探针与第二特异性探针的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团；所述荧光报告基团选自FAM、HEX、TET、JOE、NED、VIC、CY3、CY5、ROX或TAMRA中的任意一种，所述荧光淬灭基团选自MGB、BHQ或Phosphorothioate中的任意一种。
3.一种用于检测人ADD3和CDH23基因甲基化的试剂盒，其特征在于，包括采用如权利要求1或者2所述的引物探针组合物所组成的引物探针预混液，扩增预混液，阴性质控品及阳性质控品；
所述扩增预混液由PCR缓冲液、PCR保护剂、Taq酶、dNTPs、MgCl2组成；
所述阳性质控品为亚硫酸氢盐修饰的全甲基化人类基因组DNA；
所述阴性质控品为亚硫酸氢盐修饰的非甲基化人类基因组DNA。
4.一种用于检测人ADD3和CDH23基因甲基化的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤(1)提取生物检材样本；
步骤(2)自生物检材样本中提取样本D...
【专利技术属性】
技术研发人员：盛青松，朱桂春，姚鲁帅，于垚垚，
申请(专利权)人：无锡市申瑞生物制品有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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