一种用于同时检测甲流与乙流的组合物及其冻干方法技术

技术编号:42189533 阅读:22 留言:0更新日期:2024-07-30 18:40
本发明专利技术公开了一种用于同时检测甲流与乙流的组合物及其冻干方法,本发明专利技术涉及甲流与乙流的检测领域,包括荧光定量PCR试剂,其特征在于:所述荧光定量PCR试剂包括酶混合物、10×PCRBuffer、镁离子、核苷酸混合物、引物探针混合液、5×冻干保护剂。本发明专利技术所述的一种用于同时检测甲流与乙流的组合物及其冻干方法,能够同时检测甲流、乙流病毒的荧光定量检测试剂,同时检测甲流、乙流的试剂组合,引物探针组合不区分甲流具体亚型,检测保守区域,能够覆盖所有亚型,本发明专利技术对于甲流、乙流病毒检测具有更好的灵敏度与特异性,同时,因为采用了冻干技术,试剂可以常温运输与保存,大大降低了运输与储藏成本,使用也更加方便。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及甲流与乙流的检测领域,特别涉及一种用于同时检测甲流与乙流的组合物及其冻干方法


技术介绍

1、流行性感冒简称流感,由甲型、乙型流感病毒引起的常见急性呼吸道传染病就是常称的甲乙流,流感病毒属于正粘病毒科,分节段的单股负链rna病毒,典型病毒颗粒呈球状,依据病毒颗粒外膜血凝素和神经氨酸酶蛋白抗原性的不同,甲型流感病毒目前可分为16个h亚型和9个n亚型,甲型流感病毒最容易发生变异,而人禽流行性感冒是由禽甲型流感病毒某些亚型中的一些毒株引起的急性呼吸道传染病,病毒基因变异后能够感染人类,感染后的症状主要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等,多数伴有严重的肺炎,严重者心、肾等多种脏器衰竭导致死亡,病死率很高。

2、乙型流感病毒,是由乙型流感病毒引起的流行性感冒,其特点是起病急骤,畏寒、发热,体温在数小时至24小时内升达高峰,39-40℃甚至更高,乙型流感病毒不分亚型,根据血凝素的抗原性和基因特征分为2个谱系:b/victoria和b/yamagata,乙型流感病毒几乎只感染人类,容易在老人和儿童特定人群中引起肺炎、细菌性感染等并发症,严重可致死亡本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于同时检测甲流与乙流的组合物,包括荧光定量PCR试剂,其特征在于:所述荧光定量PCR试剂包括酶混合物、10×PCRBuffer、镁离子、核苷酸混合物、引物探针混合液、5×冻干保护剂。

2.根据权利要求1所述的一种用于同时检测甲流与乙流的组合物,其特征在于:所述酶混合物包括热启动TaqDNA聚合酶、UNG酶、逆转录酶、RNA酶抑制剂,所述核苷酸混合物包括五种脱氧核苷酸,五种所述脱氧核苷酸包括dATP、dTTP、dGTP、dCTP、dUTP。

3.根据权利要求1所述的一种用于同时检测甲流与乙流的组合物,其特征在于:所述热启动TaqDNA聚合酶用于降低非特异性...

【技术特征摘要】

1.一种用于同时检测甲流与乙流的组合物,包括荧光定量pcr试剂,其特征在于:所述荧光定量pcr试剂包括酶混合物、10×pcrbuffer、镁离子、核苷酸混合物、引物探针混合液、5×冻干保护剂。

2.根据权利要求1所述的一种用于同时检测甲流与乙流的组合物,其特征在于:所述酶混合物包括热启动taqdna聚合酶、ung酶、逆转录酶、rna酶抑制剂,所述核苷酸混合物包括五种脱氧核苷酸,五种所述脱氧核苷酸包括datp、dttp、dgtp、dctp、dutp。

3.根据权利要求1所述的一种用于同时检测甲流与乙流的组合物,其特征在于:所述热启动taqdna聚合酶用于降低非特异性扩增和降低探针在扩增阶段的水解,用于提高多重靶标下的扩增均一性及熔解峰的高度;所述热启动taqdna聚合酶耐受60℃的反应温度,所述热启动taqdna聚合酶用于抑制各种rnasea,rnaseb,rnasec,适用于热稳定性逆转录酶,更高效的配合rna逆转录。

4.根据权利要求1所述的一种用于同时检测甲流与乙流的组合物,其特征在于:所述ung酶选择性水解断裂含有dutp的双链或单链dna中的尿嘧啶糖苷键,用于在碱性介质以及高温下进一步水解断裂,从而被消除,减少气溶胶污染,所述ung酶的最佳活性温度为50℃,95℃灭活。

5.根据权利要求1所述的一种用于同时检测甲流与乙流的组合物,其特征在于:所述10×pcrbuffer用于与dna聚合酶配套使用,用于提供合适的缓冲体系,使pcr反应扩增速率、特异性、灵敏度得到提高,所述10×pcrbuffer含有kcl,tris-hcl等离子,所述10×pcrbuffer的ph值为8.0-8.3。

6.根据权利要求1所述的一种用于同时检测甲流与乙流的组合物,其特征在于:所述镁离子用于在pcr中与dntp、核酸骨架相互作用,用于影响polymerase的活性。

7.根据权利要求1所述的一种用于同时检测甲流与乙流的组合物,其特征在于:所述核苷酸混合物的浓度在0.1-0.5mm之...

【专利技术属性】
技术研发人员:高鹏盛青松肖建勇黄艳丰
申请(专利权)人:无锡市申瑞生物制品有限公司
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1