一种同时检测CYP2C9和VKORC1基因的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于检测CYP2C9基因A1075C位点和VKORC1基因‑1639 G>A位点的试剂盒及其应用，可同时检测CYP2C9基因A1075C位点和VKORC1基因‑1639 G>A位点的多态性，成本低廉，结果直观，能作为血液抗凝治疗者服用华法林的初始剂量和维持剂量的参考。本发明专利技术可结合INR检测值调整维持剂量，能显著降低华法林用药的副反应和风险。

A kit for simultaneous detection of CYP2C9 and VKORC1 genes and its application

【技术实现步骤摘要】
一种同时检测CYP2C9和VKORC1基因的试剂盒及其应用
本专利技术涉及分子检测领域，具体涉及一种用于检测CYP2C9基因A1075C位点和VKORC1基因-1639G>A位点的试剂盒及其应用。
技术介绍
CYP2C9是细胞色素P450酶(CYP)第二亚家族中的重要成员，占肝微粒体P450蛋白总量的20％。CYP2C9参与体内多种药物的羟化代谢。CYP2C9基因具有遗传多态性，人类最常见的等位基因有3种，即野生型CYP2C9*1及突变型CYPC2C9*2(rs1799853，C430T，Arg144Cys)和CYP2C9*3(rs1057910，A1075C，Ile359Leu)，2种突变型等位基因均可导致CYP2C9酶活性降低，其中CYP2C9*3纯合子个体酶活性仅为该位点野生型纯合子基因型个体(携带CYP2C9*1或Arg144/Ile359等位基因)的4～6％。CYP2C9*2等位基因在亚洲和中国汉族人群中罕见。CYP2C9*3等位基因在中国人群中的频率约为3％。CYP2C9遗传多态性导致其酶活性变化，从而导致药物代谢种族和个体差本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种同时检测双位点基因的检测试剂盒，其特征在于，包括CYP2C9基因A1075C位点和VKORC1基因-1639G>A位点的扩增引物组、限制酶和PCR试剂；/n其中，CYP2C9基因A1075C位点和VKORC1基因-1639G>A位点的扩增引物序列为：/nCYP2C9基因A1075C位点外侧引物对：/nF1：GTGTTATTATTGATAAGTAAGGACTTACCCA；/nR1：TAGCAAAGTTGACAGATTAACATCATCAGA；/nCYP2C9基因A1075C位点内侧引物对：/nF2：CTTCCTGTCTTCCTTTATTGAAGAGAATTTTCTCCACT；...

【技术特征摘要】
1.一种同时检测双位点基因的检测试剂盒，其特征在于，包括CYP2C9基因A1075C位点和VKORC1基因-1639G>A位点的扩增引物组、限制酶和PCR试剂；
其中，CYP2C9基因A1075C位点和VKORC1基因-1639G>A位点的扩增引物序列为：
CYP2C9基因A1075C位点外侧引物对：
F1：GTGTTATTATTGATAAGTAAGGACTTACCCA；
R1：TAGCAAAGTTGACAGATTAACATCATCAGA；
CYP2C9基因A1075C位点内侧引物对：
F2：CTTCCTGTCTTCCTTTATTGAAGAGAATTTTCTCCACT；
R2：GTAAATGAATTTTCTGTAGTAGGTGGGGAGAAGGTCCA；
VKORC1基因-1639G>A位点外侧引物对：
F3：CACACTCTCTAGAAGAGAGTAGATGTGAG；
R3：GGGCCAGATGAGGTCTCTCC；
VKORC1基因-1639G>A位点内侧引物对：
F4：CTCTCTAGAAGAGAGTAGATGTGAGAAACAGCATCTGGA；
R4：GTCTTAAACTCCTGACCTCAAGTGATCCACCCACCTGG；
限制酶为限制性核酸内切酶MvaI或其同裂酶。


2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒检测方法包括以下步骤：
1)采集样品；
2)使用外、内引物对进行PCR扩增；
3)对PCR产物进行酶切；
4)...

【专利技术属性】
技术研发人员：何震宇，朱天亮，杨红，钟其恩，陈瑜丽，翟子健，周颖乔，陈晓淼，
申请(专利权)人：广东药科大学，
类型：发明
国别省市：广东;44