一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒，其特征在于包括：血小板无力症患者cDNA的PCR扩增、测序发现患者ITGA2B基因第508～607位(编码区的第477～506位)发生缺失,导致CDS 160～CDS192缺失。通过gDNA的检测确定患者为EXON4的第72位碱基C→G点突变和intron 4的+5位G→C点突变复合突变体，使用金属溶胶液、石英片和试剂组；本试剂盒对血小板无力症进行基因诊断时,先通过对血小板无力症相关ITGA2B和ITGA3基因mRNA检测,再对具体异常位置gDNA进一步分析的方法是可行可靠的。并且相对于直接对gDNA各个外显子做PCR扩增测序的方法，该方法操作简单、快速，无需进行前期质粒载体构建，可有效缩短实验周期和成本。

A gene detection method and kit for thromboasthenia

【技术实现步骤摘要】
一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒
本专利技术涉及血小板无力症基因检测
，具体为一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒。
技术介绍
血小板无力症1918年由Glanzmann首先报道本病，故本病又称“Glanzmann病(Glanzmannthrombasthenia，GT)”，是一种遗传性出血病。特点为血细胞对多种生理诱聚剂反应低下或缺如，由血小板膜糖蛋白Ⅱb(GPⅡb)和（或）Ⅲa(GPⅢa)质或量的异常引起。1990年国际血栓与止血学会标准化委员会将GT定义为由于GPⅡb或GPⅢa基因缺陷引起的血小板对多种诱聚剂（如腺苷二磷酸、凝血酶、胶原等）的先天性遗传性无聚集或反应减低。本病是由于血小板膜糖蛋白Ⅱb(GPⅡb）和(或）Ⅲa(GPⅢa）质或量的异常引起。GPⅡb-Ⅲa复合物是钙依赖性多聚体，是纤维蛋白原受体，也能结合vWF、纤维结合蛋白和血栓敏感蛋白，在各种生理诱聚剂，如ADP、TXA2的作用下，介导血小板聚集。因此受体的异常可导致血管损伤处血小板血栓不能形成发生出血不止或淤斑。GPⅡb-Ⅲa受体同时也本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒，其特征在于包括：血小板无力症患者cDNA的PCR扩增、测序发现患者ITGA2B基因第508～607位(编码区的第477～506位)发生缺失,导致CDS 160～CDS192缺失；/n通过gDNA的检测确定患者为EXON4的第72位碱基C→G点突变和intron 4的+5位G→C点突变复合突变体，金属溶胶液，/n方法：/n对血小板无力症进行基因诊断时,先通过对血小板无力症相关ITGA2B和ITGA3基因mRNA检测,再对具体异常位置gDNA进一步分析的方法是可行可靠的；/n并且相对于直接对gDNA各个外显子做PCR扩增测序的方法；/nPCR扩增，反...

【技术特征摘要】
1.一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒，其特征在于包括：血小板无力症患者cDNA的PCR扩增、测序发现患者ITGA2B基因第508～607位(编码区的第477～506位)发生缺失,导致CDS160～CDS192缺失；
通过gDNA的检测确定患者为EXON4的第72位碱基C→G点突变和intron4的+5位G→C点突变复合突变体，金属溶胶液，
方法：
对血小板无力症进行基因诊断时,先通过对血小板无力症相关ITGA2B和ITGA3基因mRNA检测,再对具体异常位置gDNA进一步分析的方法是可行可靠的；
并且相对于直接对gDNA各个外显子做PCR扩增测序的方法；
PCR扩增，反应体系为模板DNA1ng/uL、引物1uL、H2O3.8uL、2×TaqPCRMasrerMix50uL；和/或，所述PCR反应的反应程序为95℃预变性2min，95℃预变性30s，60℃退火温度30s，72℃延伸1min，循环次数30次，72℃再延伸10min；
金属溶胶液：
金属溶胶液为金溶胶液或银溶胶液；所述的银溶胶的制备方法如下：常温下将2.5mL10-2mol/LAgNO3加入到7...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪纯，杨绍杰，吴燕杰，王凯，崔春艳，
申请(专利权)人：广东中科康仪生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44