一种骨质疏松的分子靶标及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种骨质疏松的分子靶标及其应用，所述分子靶标为lncRNA LOC105377730。本发明专利技术首次本发明专利技术首次发现了LOC105377730与骨质疏松发生发展相关，其在骨质疏松中表达显著上调，通过检测样本中LOC105377730的表达水平，可以有效的区分骨质疏松患者和正常对照，同时可以把LOC105377730作为潜在的药物靶标应用于骨质疏松的治疗。

A molecular target of osteoporosis and its application

【技术实现步骤摘要】
一种骨质疏松的分子靶标及其应用
本专利技术属于生物医药领域，涉及一种骨质疏松的分子靶标及其应用。
技术介绍
骨质疏松症是一种以骨量减低和骨超微结构改变为特点的骨骼代谢性病变，患者表现为骨质脆性增加，以致其骨折风险提高。骨折疏松性骨折常见于髋关节、脊柱和腕关节等部位，发病率较高，严重影响患者生活质量且增加社会医疗经济负担。骨质疏松症常见于老年人，年龄是骨质疏松的重要诱因。有研究表明，随着年龄增长，骨重塑过程中的新生骨量都会减少，以致骨小梁减少；老年人群的新生成骨细胞较少，以致骨形成减少。绝经后妇女雌激素水平下降也是骨质疏松症的主要发病因素，雌激素主要同调控核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和骨保护素(OPG)，增加破骨细胞活性(GeusensP.Emergingtreatmentsforpostmenopausalosteoporosis-focusondenosumab.C1inIntervAging.2009；4：241-50.)。其他发病因素包括活性维生素D和钙质缺乏，导致继发性甲状旁腺功能亢进，破骨活性增强等。长链非编码RNA(LongnoncodingRNAs，LncRNAs)是近年来的研究热点，在肿瘤、代谢性疾病、干细胞调控中具有重要作用，在临床症状方面备受重视。LncRNAs由DNA转录而来，不同于短链非编码RNA(长度短于200核苷酸)，缺乏开放阅读框和蛋白质编码区。LncRNAs主要通过改变染色质的结构(如支架作用、染色质重构、结合形成互补双链、组蛋白修饰等)来调节基因的表达，也可以通过顺式或反式方法来调控其他基因转录活性。目前，LncRNAs在肿瘤研究、神经性疾病研究、心脑血管疾病研究、干细胞研究等多领域具有重要作用(HuangWT，GuoXQ，DaiJP，ChenRS.MicroRNAandLncRNAinneurodegenerativediseases.ProgressinBiochemistry&Biophysics.2010：37(8)：826-33)。随着LncRNAs研究工具和检测手段的研发，对于LncRNAs的分子机制已有较多了解但认识仍然有限，相应调控机制的阐明和发现将为疾病认知和药物研发带来新思路。研究LncRNA在骨质疏松发生发展中的作用，为骨质疏松诊断和治疗的应用基础研究与药物研发提供了坚实基础。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种用于骨质疏松诊断和治疗的分子标志物，以期实现骨质疏松的特异性诊断、预防和/或治疗。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了检测LOC105377730的试剂在制备诊断骨质疏松的产品中的应用。进一步，所述试剂选自：特异性识别LOC105377730的探针；或特异性扩增LOC105377730的引物。进一步，特异性扩增LOC105377730的引物序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。本专利技术提供了一种诊断诊断骨质疏松的产品，所述产品包括通过测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术检测样本中LOC105377730基因的表达水平的试剂。进一步，所述核酸扩增技术选自聚合酶链式反应、逆转录聚合酶链式反应、转录介导的扩增、连接酶链式反应、链置换扩增和基于核酸序列的扩增。本专利技术提供了LOC105377730在制备预防或治疗骨质疏松的药物中的应用。进一步，所述药物包括LOC105377730的下调剂。所述下调剂选自：以LOC105377730或其转录本为靶序列、且能够抑制LOC105377730基因表达或基因转录的干扰分子，包括：shRNA(小发夹RNA)、小干扰RNA(siRNA)、dsRNA、微小RNA、反义核酸，或能表达或形成所述shRNA、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物。进一步，所述下调剂为siRNA。进一步，所述siRNA的序列如SEQIDNO.5～8所示。本专利技术提供了一种治疗骨质疏松的药物，所述药物包括LOC105377730的下调剂。进一步，所述下调剂为siRNA。进一步，所述siRNA的序列如SEQIDNO.5～8所示。进一步，所述药物还包括与所述下调剂配伍的其他药类以及药学上可接受的载体和/或辅料。本专利技术提供了LOC105377730在筛选预防或治疗骨质疏松的候选物质中的应用。进一步，筛选预防或治疗骨质疏松的候选物质的方法如下：用候选物质处理表达或含有LOC105377730基因的体系；和检测所述体系中LOC105377730基因的表达；其中，若所述候选物质可降低LOC105377730基因的表达或活性，(优选显著降低，如低20％以上，较佳的低50％以上；更佳的低80％以上)，则表明该候选物质是预防或治疗骨质疏松的候选物质。所述体系选自：细胞体系、亚细胞体系、溶液体系、组织体系、器官体系或动物体系。所述候选物质包括(但不限于)：针对LOC105377730基因或其上游或下游基因设计的干扰分子、核酸抑制物、小分子化合物等。专利技术详述在本专利技术中，“基因标志物”、“分子标志物”和“生物标志物”可以相互替代，是其在组织或细胞中的表达水平与正常或健康细胞或组织的表达水平相比发生改变的任何基因。本专利技术可以利用本领域内已知的任何方法测定基因表达。本领域技术人员应当理解，测定基因表达的手段不是本专利技术的重要方面。可以在转录水平上检测生物标志物的表达水平。本专利技术中所述的LOC105377730位于人5号染色体长臂3区5带上，本专利技术中的LOC105377730包括野生型、突变型或其片段。本领域技术人员将认识到，本专利技术的实用性并不局限于对本专利技术的靶标基因的任何特定变体的基因表达进行定量。如果当核酸或其片段与其它核酸(或其互补链)最佳比对时(具有适当的核苷酸插入或缺失)，在至少大约60％的核苷酸碱基、通常至少大约70％、更通常至少大约80％、优选至少大约90％、及更优选至少大约95-98％核苷酸碱基中存在核苷酸序列相同性，则这两个序列是“基本同源的”(或者基本相似的)。或者，当核酸或其片段与另一核酸(或其互补链)、一条链或其互补序列在选择性杂交条件下杂交时，则其间存在基本同源或(相同性)。当杂交比特异性整体丧失发生更具选择性时，存在杂交选择性。典型地，当在至少大约14个核苷酸的一段序列存在至少大约55％相同性、优选至少大约65％、更优选至少大约75％及最优选至少大约90％相同性时，发生选择性杂交。如本文所述，同源对比的长度可以是较长的序列节段，在某些实施方案中通常为至少大约20个核苷酸，更通常为至少大约24个核苷酸，典型为至少大约28个核苷酸，更典型为至少大约32个核苷酸，及优选至少大约36或更多个核苷酸。在本专利技术的实施例中，一种代表性的人LOC105377730基因的核苷酸序列如目前国际公共核酸数据库GeneBank中LOC105377730(XR_9412本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测LOC105377730的试剂在制备诊断骨质疏松的产品中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.检测LOC105377730的试剂在制备诊断骨质疏松的产品中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂选自：
特异性识别LOC105377730的探针；或
特异性扩增LOC105377730的引物。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，特异性扩增LOC105377730的引物序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。


4.一种诊断骨质疏松的产品，其特征在于，所述产品包括通过测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术检测样本中LOC105377730基因的表达水平的试剂。


5.根据权利要求4所述的产品，其特征在于，所述核酸扩增技术选自聚合酶链式反应、逆转录聚合酶链式反应、转录...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴成爱，田伟，王超，王莹，王倩倩，张砚卓，陶剑锋，袁越，
申请(专利权)人：北京市创伤骨科研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11