纯化唾液酸化的低聚糖的方法技术

公开了一种从发酵液、细胞裂解物或生物催化的反应混合物中纯化唾液酸化的低聚糖以获得大量高纯度的所需的唾液酸化的低聚糖的方法。所述方法特别适于从使用重组细菌细胞或酵母细胞的微生物发酵中大规模、经济地纯化唾液酸化的人乳低聚糖(例如3’‑唾液酸乳糖、6’‑唾液酸乳糖或唾液酸化的乳‑N‑四糖衍生物)。所得的材料具有高纯度且可用于食品或医药应用，例如医药营养产品、婴儿配方物、膳食补充剂、一般营养产品(例如乳制饮料)。

Purification of sialylated oligosaccharides

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】纯化唾液酸化的低聚糖的方法本专利技术涉及唾液酸化的低聚糖的纯化。更具体而言，本专利技术涉及从发酵液、澄清化的细胞裂解物或反应混合物中纯化唾液酸化的低聚糖，特别是唾液酸化的人乳低聚糖(sHMO)。
技术介绍
人乳是碳水化合物、脂肪、蛋白质、维生素、矿物质和微量元素的复杂混合物。碳水化合物是迄今为止最丰富的级分，其可进一步分成乳糖和更复杂的低聚糖——所谓的人乳低聚糖(HMO)。尽管乳糖用作能量来源，但是复杂的低聚糖不被婴儿代谢。复杂的低聚糖级分占总碳水化合物级分的最高达10％，可能由多于150种不同的低聚糖组成。这些复杂的低聚糖的存在和浓度是人类特有的，并且因此不能在其他哺乳动物(例如驯养的产奶动物)的乳中大量发现。这些复杂的低聚糖在人乳中的存在已经已知很长时间，并且这些低聚糖的生理功能已成为医学研究的主题持续数十年(Gura,T.(2014)Science345：747-749；Kunz，C.&Egge，H.(2017)在：PrebiotiesandProbioticsinHumanMilk.编辑McGuire，M.K；McGuire，M.A.&本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种纯化通过微生物发酵或体外生物催化产生的唾液酸化的低聚糖的方法，所述方法包括以下步骤/ni)从发酵液中分离生物质；/nii)从发酵液或反应混合物中去除阳离子；/niii)从发酵液或反应混合物中去除阴离子杂质；以及/niv)从发酵液或反应混合物中去除分子量低于待纯化的唾液酸化的低聚糖的分子量的化合物。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170829 EP 17188280.61.一种纯化通过微生物发酵或体外生物催化产生的唾液酸化的低聚糖的方法，所述方法包括以下步骤
i)从发酵液中分离生物质；
ii)从发酵液或反应混合物中去除阳离子；
iii)从发酵液或反应混合物中去除阴离子杂质；以及
iv)从发酵液或反应混合物中去除分子量低于待纯化的唾液酸化的低聚糖的分子量的化合物。


2.根据权利要求1所述的方法，还包括一个或多个选自以下的步骤
v)增加唾液酸化的低聚糖的浓度；
vi)去除不需要的低聚糖；
vii)去除着色剂；
viii)去除内毒素；
ix)灭菌；以及
x)将唾液酸化的低聚糖喷雾干燥或结晶。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述唾液酸化的低聚糖是唾液酸化的人乳低聚糖，优选选自3’-SL、6’-SL、LST-a、LST-b、LST-c、3-F-SL、DS-LNT和F-LST-b。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中从发酵液中去除生物质通过以下方式进行：对所述发酵液进行超滤，优选进行从所述发酵液中去除生物质和分子量≥500kDa的化合物的超滤，更优选进行从所述发酵液中去除生物质和分子量≥150kDa的化合物的超滤，且最优选进行从所述发酵液中去除生物质和分子量≥100kDa的化合物的超滤。


5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中从发酵液中去除阳离子通过阳离子交换色谱法进行。


6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中从发酵液中去除阴离子杂质通过阴离子交换色谱法进行。


7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中去除分子量低于待纯化的唾液酸化的低聚糖的分子量的化合物通过错流过滤进行。


8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中待纯化的唾液酸化的低聚糖的浓度通过纳滤或蒸发溶剂而增加。


9.根据权利要求1至87中任一项所述的方法，其中去除着色剂通过用活性炭处理含有所需的唾液酸化的低聚糖的发酵液/溶液来进行。


10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中去除内毒素通过将含有所需的低聚糖的溶液通过6kDa过...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·詹尼温，M·黑尔弗里希，B·恩格斯，
申请(专利权)人：詹尼温生物技术有限责任公司，
类型：发明
国别省市：德国;DE