一类基于稳定同位素的高通量蛋白质组学定量试剂制造技术

本发明专利技术公开了一类基于稳定同位素的高通量蛋白质组学定量试剂，又可以称为同量异位标签（Isobaric Labeling,缩写：IBT）试剂，其结构包含下式：报告基团‑平衡基团‑活化基团。此类试剂可以由不同类型的化学结构实现。本发明专利技术公布了八组不同的化学结构，每组结构可以包含多至10个化学结构完全相同的标签试剂（可以用IBT‑10PLEX来代表），但是在每个标签试剂中的不同位置含有13C或15N同位素（可以分别用T‑114、T‑115N、T‑115C、T‑116N、T‑116C、T‑117N、T‑118N、T‑117C、T‑118C、T‑119来代表）。本发明专利技术公开了其中三组同量异位标签试剂的制备方法，还公开了采用IBT‑10PLEX试剂对多肽定量分析方法。本发明专利技术中的IBT‑10PLEX采用了新颖的化学结构，降低了制备的难度，提高了产率，从而能够降低产品的成本，扩大同量异位标记法的使用范围。

A high throughput proteomic quantitative reagent based on stable isotopes

【技术实现步骤摘要】
一类基于稳定同位素的高通量蛋白质组学定量试剂
本专利技术涉及生物分子分析试剂领域，特别是用于生物分子定量分析，具体为一类可应用于10个样品的高通量蛋白质组学定量的同量异位标签试剂(IBT-10PLEX)的制备和应用。
技术介绍
目前基于质谱技术检测的蛋白质组学的定量方法，主要包括无标记分析法和标记法，而标记法又分为基于一级质谱(MS1)定量和二级质谱(MS2)定量的方法，其中同量异位同位素标记属于基于MS2的分析方法。与无标记分析法和MS1标记法相比，MS2标记法优势在于：1)可以大大降低总体样品的分析时间。2)由于同量异位标记的不同样品在液相串联(LC-MS/MS)质谱分析之前被预先混合，使得全部样品在一次LC-MS/MS分析中完成，有效的降低了不同样品在不同LC-MS/MS中的系统误差。同量异位素标记方法可以最大限度地减少不同的样本在不同此测量中产生的差异，解决在无标签标记的分析方法中无法避免的重复性问题。3)多个样品在同量异位试剂标记之后混合在一起，不同样品中所含的同一多肽分子被合并到一起，相当于增强了样品本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一类同量异位标签试剂，其特征在于：同量异位标签试剂包含10个化学结构完全相同的标签，在每个标签中的不同位置含有13C或15N同位素，10个标签为：T-114、T-115N、T-115C、T-116N、T-116C、T-117N、T-118N、T-117C、T-118C、T-119。/n

【技术特征摘要】
20190629 CN 20191058241191.一类同量异位标签试剂，其特征在于：同量异位标签试剂包含10个化学结构完全相同的标签，在每个标签中的不同位置含有13C或15N同位素，10个标签为：T-114、T-115N、T-115C、T-116N、T-116C、T-117N、T-118N、T-117C、T-118C、T-119。


2.如权利要求1所述的一类同量异位标签试剂，其特征在于：包含稳定同位素结构，MS/MS可剪切键和能够与多肽反应的基团，对多肽进行标记并定量；所述同量异位标签试剂的每个标签的结构包括下式：报告基团-平衡基团–活化基团，其中报告基团和平衡基团通过MS/MS可剪切键连接，活化基团与多肽的氨基反应形成稳定的酰胺键；每个标签中的报告基团+平衡基团的质量是相同的。


3.如权利要求2所述的一类同量异位标签试剂，其中一组同量异位标签试剂的具体结构式如下结构A：



T-114、T-115N、T-115C、T-116N、T-116C、T-117N、T-118N、T-117C、T-118C、T-119结构式如下,其中星号表示此位置为相应的13C或者15N：

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4.如权利要求2所述的一类同量异位标签试剂，其中一组同量异位标签试剂的具体结构式如下结构B：



T-114、T-115N、T-115C、T-116N、T-116C、T-117N、T-118N、T-117C、T-118C、T-119结构式如下,其中星号表示此位置为相应的13C或者15N：

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5.如权利要求2所述的一类同量异位标签试剂，其中一组同量异位标签试剂的具体结构式如下结构C：

【专利技术属性】
技术研发人员：李舒伟，
申请(专利权)人：南京谱利健生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32