【技术实现步骤摘要】
大鼠血浆中氯吡格雷的代谢产物的测定方法
本专利技术涉及一种血浆中药物代谢的检测方法,具体涉及一种大鼠血浆中氯吡格雷的代谢产物的测定方法。
技术介绍
心脑血管血栓性疾病是一种常见的疾病。血小板聚集是正常凝血机制中的一个关键环节,血小板的黏附、聚集、释放反应往往容易导致血栓形成。因此,抑制血小板聚集药物在治疗血栓病中发挥着重要作用。氯吡格雷是一种血小板抑制剂,通过可选择性地、不可逆地抑制二磷酸腺苷(ADP)与其血小板受体结合及继发的ADP介导的GPⅡb/Ⅲa复合物的活化,从而抑制血小板聚集。此外,氯吡格雷还能阻断ADP释放后引起的血小板活化扩增,从而抑制其他激动剂诱导的血小板聚集。临床适合于治疗动脉粥样硬化、急性冠脉综合征、预防冠脉内支架植入术后再狭窄和血栓性并发症等。氯吡格雷为前体药,在体内约有85%被水解成无活性的羧酸氯吡格雷(CCA),而不足15%被代谢为活性的硫醇衍生物。此前药及其活性硫醇衍生物极不稳定,且浓度极低,在血浆中用常规检测方法很难检测到。CCA相比其前体药和活性代谢产物,是氯吡格雷在体内的主要组成部分 ...
【技术保护点】
1.一种大鼠血浆中氯吡格雷的代谢产物的测定方法,其特征在于,具体步骤如下:/n(1)取大鼠血浆,置于离心管中,加入乙腈沉淀蛋白,涡旋,离心,取上清液置于另一干净的离心管中,加入二氯甲烷-乙醚混合溶液,涡旋,离心;/n(2)取C18固相萃取柱,活化,加入上述上清液,甲醇洗脱,收集洗脱液,浓缩,复溶,进样;/n(3)检测条件:色谱柱:OV-1701(30m×0.25mm,0.33μm);升温程序:初始温度80℃,保持1min,以20℃/min的速率升至160℃,再以30℃的速度升至250℃;FID检测器检测。/n
【技术特征摘要】
1.一种大鼠血浆中氯吡格雷的代谢产物的测定方法,其特征在于,具体步骤如下:
(1)取大鼠血浆,置于离心管中,加入乙腈沉淀蛋白,涡旋,离心,取上清液置于另一干净的离心管中,加入二氯甲烷-乙醚混合溶液,涡旋,离心;
(2)取C18固相萃取柱,活化,加入上述上清液,甲醇洗脱,收集洗脱液,浓缩,复溶,进样;
(3)检测条件:色谱柱:OV-1701(30m×0.25mm,0.33μm);升温程序:初始温度80℃,保持1min,以20℃/min的速率升至160℃,再以30℃的速度升至250℃;FID检测器检测。
2.根据权利要求1所述的一种大鼠血浆中氯吡格雷的代谢产物的测定方法,其特征在于,所述沉淀蛋白步骤如下:取大鼠血浆200μL,置于5mL离心管中,加入400μL乙腈,涡旋1min,离心。
3.根据权利要求2所述的一种大鼠血浆中氯吡格雷的代谢产物的测定方法,其特征在于,上述萃取步骤如下:取沉淀蛋白后的上清液,置于另一干净的5mL离心管,加入1000μL二氯甲烷-乙醚混合溶液,涡旋1min,离心。...
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