一种同时检测四水合辅羧酶两种杂质含量的方法技术

本发明专利技术提供一种检测四水合辅羧酶杂质X和/或杂质A含量的分析方法，采用高效液相色谱仪，色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，流动相A：含辛烷磺酸钠或其他效能类似离子对的磷酸盐缓冲溶液，流动相B：甲醇、乙腈、流动相A‑甲醇或流动相A‑乙腈中的一种，流动相A、B按梯度程序进行；柱温：30‑50℃，流速：0.8‑1.2ml/min，检测波长：240‑270nm，进样量：20μl。该检测方法准确度灵敏度高，适于检测四水合辅羧酶原料或含有四水合辅羧酶原料的维生素制剂中四水合辅羧酶杂质X和/或杂质A含量。

A method for simultaneous determination of two impurities in tetracarboxylase tetrahydrate

【技术实现步骤摘要】
一种同时检测四水合辅羧酶两种杂质含量的方法
本专利技术属于分析化学领域，具体涉及一种同时检测四水合辅羧酶中两种杂质含量的高效液相分析方法。
技术介绍
四水合辅羧酶为维生素类药，在体内参与糖代谢中丙酮酸和a-酮戊二酸的氧化脱羧反应，是糖类代谢所必需，临床上常用于脚气病或Wernicke脑病的治疗，亦可用于辅羧酶四水合物缺乏引起的周围神经炎、消化不良等的辅助治疗，目前也用作复方维生素制剂产品注射用多种维生素(12)的其中一种原料药。四水合辅羧酶杂质X(甲酰胺基嘧啶)及四水合辅羧酶杂质A(硫胺素一磷酸酯)为四水合辅羧酶的降解产物，其结构式分别为：四水合辅羧酶杂质X四水合辅羧酶杂质A在国内外药典中并未收载四水合辅羧酶的标准，在国家标准(YBH03552014)四水合辅羧酶有关物质检查中，有四水合辅羧酶杂质A的检测，但是适用于原料的检验，不适合于含有四水合辅羧酶的复方制剂产品如注射用多种维生素(12)中四水合辅羧酶杂质A的检验，专属性不符合规定，且文献中检测四水合辅羧酶杂质A的方法为衍生法，检测器为荧光检测器，操作本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.含四水辅羧酶杂质X的四水合辅羧酶原料，其特征在于，杂质X的含量不高于1.0％，所述杂质X的结构式为：/n

【技术特征摘要】
1.含四水辅羧酶杂质X的四水合辅羧酶原料，其特征在于，杂质X的含量不高于1.0％，所述杂质X的结构式为：





2.含权利要求1所述的四水辅羧酶原料的维生素制剂，其特征在于，杂质X的含量不高于四水辅羧酶原料的6.0％。


3.利用高效液相色谱检测权利要求1或2所述四水合辅羧酶原料或含四水合辅羧酶原料的维生素制剂中四水辅羧酶杂质A和/或杂质X的方法，其特征在于，色谱条件为：
流动相A：含辛烷磺酸钠或效能类似磺酸钠离子对的磷酸盐冲溶液；
流动相B：甲醇、乙腈、流动相A-甲醇或流动相A-乙腈中的一种；
流动相A、B按梯度程序进行，洗脱程序为：



柱温：30-50℃；
流速：0.8-1.2ml/min；
检测波长：240-270nm；
进样量：20μl；
所述杂质A为硫胺素一磷酸酯。


4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述色谱柱为ThermoBDSHYPERSILC18柱，250mm×4.6mm，5μm或与所述色谱柱效能相当的色谱柱。


5.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：翟雪梅，许庆栋，陈俏，于珊珊，陶冶，王卫，张颖，
申请(专利权)人：济南康和医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37