一种预测甲氨蝶呤药效的肽段组合物及其定量检测方法与检测试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种预测甲氨蝶呤药效的肽段组合物及其定量检测方法与检测试剂盒，所述肽段组合物包括用于RFC蛋白表达量定量检测的第一肽段、用于FPGS蛋白表达量定量检测的第二肽段、用于GGH蛋白表达量定量检测的第三肽段、用于BCRP蛋白表达量定量检测的第四肽段和用于P‑gp蛋白表达量定量检测的第五肽段，所述第一肽段、第二肽段、第三肽段、第四肽段和第五肽段的氨基酸序列依次如Seq ID No.1至Seq ID No.5所示。本发明专利技术方案的特征性肽段，特征性强、质谱特性和酶解特性好，准确性高且稳定性强。

A peptide composition for predicting the efficacy of methotrexate and its quantitative detection method and kit

【技术实现步骤摘要】
一种预测甲氨蝶呤药效的肽段组合物及其定量检测方法与检测试剂盒
本专利技术涉及生物医药
，具体涉及一种预测甲氨蝶呤药效的肽段组合物及其定量检测方法与检测试剂盒。
技术介绍
大多数药物通过与器官、组织、细胞上的靶点作用，影响和改变人体的功能，产生药理效应(简称“药效”)。药物与机体生物大分子的结合部位即药物靶点，大多数的药物靶点在细胞内部，药物从血液进入细胞，在细胞中发挥药理作用，整个过程主要受转运蛋白、代谢酶和外排蛋白等功能蛋白的主导。功能蛋白表达情况的不同，是造成药物代谢过程和药效发挥过程差异的主要原因。甲氨蝶呤(Methotrexate，MTX)可通过内流转运体-还原型叶酸载体(reducedfolatecarrierRFC)进入细胞，然后在叶酰多聚谷氨合成酶(Folypolyglutamatesyn-thetase，FPGS)的作用下生成多聚谷氨酸甲氨蝶呤(Methotrexatepolyglutamate，MTX-PGs)，MTX-PGs在谷氨酰水解酶(Gamma-glutamylhydrolase，GGH)的作用下本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种预测甲氨蝶呤药效的肽段组合物，其特征在于：包括用于RFC蛋白表达量定量检测的第一肽段、用于FPGS蛋白表达量定量检测的第二肽段、用于GGH蛋白表达量定量检测的第三肽段、用于BCRP蛋白表达量定量检测的第四肽段和用于P-gp蛋白表达量定量检测的第五肽段，所述第一肽段、第二肽段、第三肽段、第四肽段和第五肽段的氨基酸序列依次如SeqID No.1至Seq ID No.5所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种预测甲氨蝶呤药效的肽段组合物，其特征在于：包括用于RFC蛋白表达量定量检测的第一肽段、用于FPGS蛋白表达量定量检测的第二肽段、用于GGH蛋白表达量定量检测的第三肽段、用于BCRP蛋白表达量定量检测的第四肽段和用于P-gp蛋白表达量定量检测的第五肽段，所述第一肽段、第二肽段、第三肽段、第四肽段和第五肽段的氨基酸序列依次如SeqIDNo.1至SeqIDNo.5所示。


2.一种如权利要求1所述的预测甲氨蝶呤药效的肽段组合物的定量检测方法，其特征在于：包括以下步骤：
取待测样本进行前处理，得到样本溶液，通过液相色谱-质谱联用法或QconCAT对样本溶液中的第一肽段、第二肽段、第三肽段、第四肽段和第五肽段，进行定量检测，进而实现对RFC、FPGS、GGH、P-gp和BCRP五种蛋白表达量的定量检测。


3.根据权利要求2所述的定量检测方法，其特征在于：通过液相色谱-质谱联用法进行定量检测时，包括以下步骤：
S1、酶解处理待测目标的蛋白样本，制成待测样品供试液；
S2、通过液相色谱-质谱联用仪对所述肽段组合物进行检测及定量分析。


4.根据权利要求3所述的定量检测方法，其特征在于：通过在待测样品供试液中加入以下序列结构的同位素肽段对所述肽段组合物中的各肽段进行定量分析：RFC：AAQAL(13C,15N)SVQDK；FPGS：SGL(13C,15N)QVEDLDR；GGH：YLESAGAR(1...

【专利技术属性】
技术研发人员：余鹏，江寒冰，张可，丁尧，
申请(专利权)人：中南大学，
类型：发明
国别省市：湖南;43