本发明专利技术提供在表面的至少一部分被覆有包含下述式(1a)及式(1b)表示的结构单元的聚合物(P1)的带配体的基体及其原材料、以及其制造方法。式中，R
Polymer coated matrix for selective cell separation or cell culture
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于细胞的选择性分离或用于细胞培养的经聚合物被覆的基体
本专利技术涉及经包含显示细胞非粘附性的结构单元和显示细胞粘附性的结构单元的聚合物被覆的基体及其原材料、以及其制造方法。尤其涉及上述显示细胞粘附性的结构单元包含针对特定细胞作为配体发挥作用的肽、抗体、蛋白质或低分子化合物的、用于细胞的选择性分离或用于细胞培养的经聚合物被覆的基体及其制造方法。
技术介绍
目前已报道了各种细胞分离方法、分离材料，其利用针对特定细胞作为配体发挥作用的肽、抗体、蛋白质或低分子化合物等，使细胞选择性地粘附，从而利用其细胞选择性。例如，报道了将淋巴毒素固定于96孔板、塑料珠等而成的载体、和使用其而使具有淋巴毒素的受体的细胞选择性地吸附于载体的方法(例如，参见专利文献1)。另外，报道了细胞的分离方法，其特征在于包括下述工序：通过使单克隆抗体或多克隆抗体等与含有羧基的分子量10000以下的化合物以共价键键合而得到修饰抗体的工序，所述单克隆抗体或多克隆抗体等具有与在分离的细胞表面表达的抗原的结合性；使含有目标细胞的细胞悬浮液等与修饰抗体反应而使修饰抗体与目标细胞结合的工序；通过将得到的结合有修饰抗体的细胞液与在表面含有氨基或亚氨基的非水溶性载体进行处理来使目标细胞与载体结合，从而除去其他细胞等的工序；和利用适当的方法仅使目标细胞从上述载体解离的工序(例如，参见专利文献2)。在所述分离方法中，作为用于将结合有修饰抗体的细胞回收的、在表面含有氨基或亚氨基的非水溶性载体，具体而言，使用了使聚乙二醇二丙烯酸酯和聚乙烯亚胺含浸于无纺布、并通过电子射线照射使其接枝而得到的载体。此外，报道了：细胞选择过滤器，其特征在于，将肽或蛋白质固定于由平均纤维直径为1μm以上且100μm以下的纤维形成的无纺布而成，所述无纺布至少具有芳香族环及/或聚烯烃链，并在该芳香族环及/或聚烯烃链中在羰基碳的α位碳及/或位于β位的碳上键合有至少两个以上的卤素或类卤素取代基，所述肽或蛋白质具有下述氨基酸序列，所述氨基酸序列可形成构成细胞中特有的重链或轻链的可变区域的氨基酸序列中的互补性决定区域(例如，参见专利文献3)；等等。现有技术文献专利文献专利文献1：日本特开平6-32800号公报专利文献2：日本特开平7-113799号公报专利文献3：日本特开平8-201384号公报
技术实现思路
专利技术要解决的课题然而，上述现有技术存在下述问题：配体向基体(珠、板、过滤器等)的固定化不充分；或者因细胞对担载有配体的化合物(聚合物)、基材自身的非特异性粘附而损害配体的细胞选择性。用于解决课题的手段目前为止，本申请的专利技术人针对与基体的粘接性优异、并且具有抑制细胞等生物材料附着的能力的涂覆材料反复进行了研究。而且，在现有见解的基础上发现，经包含显示细胞非粘附性的结构单元及显示细胞粘附性的结构单元的聚合物被覆的基体不会因细胞对聚合物、基材自身的非特异性粘附而损害细胞选择性，能发挥优异的细胞选择性培养能力及分离能力，从而完成了本专利技术。即，本专利技术如下所述。[1]带配体的基体，其在表面的至少一部分被覆有包含下述式(1a)及式(1b)表示的结构单元的聚合物(P3)。[化学式1][式中，R1及R2各自独立地表示碳原子数1至5的直链烷基，X表示氢原子或碳原子数1至5的直链烷基，Y表示羧酸根阴离子(-COO-基)或磺酸根阴离子(-SO3-基)，L表示配体，Q1及Q2各自独立地表示酯键、磷酸二酯键、酰胺键、碳原子数1至10的直链或支链亚烷基或可经取代的亚苯基、或者由它们的组合构成的二价基团，Q3表示包含1,2,3-三唑环骨架的二价有机基团，m1及m2各自独立地表示1至200的整数，n各自独立地表示1至10的整数。][2]带配体的基体，其表面的至少一部分经包含显示细胞非粘附性的结构单元和含有配体的结构单元的聚合物(P2)被覆。[3]如上述[1]或[2]所述的带配体的基体，其中，上述配体选自由肽、抗体、蛋白质、及低分子化合物组成的组。[4]如上述[3]所述的带配体的基体，其中，上述肽包含Gln-Gln-Gly-Trp-Phe的序列。[5]基体，其表面的至少一部分经包含显示细胞非粘附性的结构单元和显示细胞粘附性的结构单元的聚合物(P1)被覆。[6]如上述[1]～[5]中任一项所述的基体，其用于细胞分离。[7]如上述[1]～[5]中任一项所述的基体，其用于细胞培养。[8]基体，其表面的至少一部分经包含显示细胞非粘附性的结构单元和含有碳-碳三键或叠氮基的结构单元的聚合物(P4)被覆。[9]基体，其在表面的至少一部分被覆有包含下述式(1a)及式(1c)表示的结构单元的聚合物(P5)。[化学式2](式中，R1、R2、X、Y、Q1、Q2、m1、m2、及n与上述[1]相同，Z表示包含碳-碳三键或叠氮基的基团。)[10]如上述[1]～[9]中任一项所述的基体，其中，上述基体为皿、基板、多孔质膜、粒子或过滤器。[11]组合物，其包含含有下述式(1a)及式(1c)表示的结构单元的聚合物(P5)、及溶剂。[化学式3](式中，R1、R2、X、Y、Z、Q1、Q2、m1、m2、及n与上述[9]相同。)[12]带配体的基体的制造方法，其包括使含有碳-碳三键或叠氮基的配体与上述[8]或[9]所述的基体接触的工序。[13]带配体的基体的制造方法，其包括下述工序：将上述[11]所述的组合物涂布于基体、制造聚合物(P5)被覆基体的工序；以及，接着使含有碳-碳三键或叠氮基的配体与上述被覆基体接触的工序。[14]方法，使含有叠氮基或碳-碳三键的配体与表面的至少一部分经包含显示细胞非粘附性的结构单元和含有碳-碳三键或叠氮基的结构单元的聚合物(P4)被覆的基体接触，从而对基体赋予细胞粘附性。[15]如上述[6]所述的基体，其从包含至少两种以上的细胞的细胞混合液中选择性地分离至少一种细胞。[16]细胞分离方法，其使用上述[1]～[5]中任一项所述的基体。[17]如上述[7]所述的基体，其从包含至少两种以上的细胞的细胞混合液选择性地培养至少一种细胞。[18]细胞培养方法，其使用上述[1]～[5]中任一项所述的基体。[19]如上述[1]所述的带配体的基体，其中，聚合物(P3)还包含下述式(1d)表示的结构单元。[化学式4](式中，R3各自独立地表示碳原子数1至5的直链烷基，X表示氢原子或碳原子数1至5的直链烷基，Q4表示酯键、磷酸二酯键、酰胺键、碳原子数1至10的直链或支链亚烷基或可经取代的亚苯基、或者由它们的组合构成的二价基团，m3表示1至200的整数。)[20]如上述[9]所述的基体，其中，聚合物(P5)还包含下述式(1d)表示的结构单元。[化学式5](式中，R3各自独立地表示碳原子数1至5的直链烷基，X表示氢原子本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.带配体的基体，其在表面的至少一部分被覆有包含下述式(1a)及式(1b)表示的结构单元的聚合物(P3)，/n[化学式1]/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170711 JP 2017-1355851.带配体的基体，其在表面的至少一部分被覆有包含下述式(1a)及式(1b)表示的结构单元的聚合物(P3)，
[化学式1]
式中，R1及R2各自独立地表示碳原子数1至5的直链烷基，X表示氢原子或碳原子数1至5的直链烷基，Y表示羧酸根阴离子(-COO-基)或磺酸根阴离子(-SO3-基)，L表示配体，Q1及Q2各自独立地表示酯键、磷酸二酯键、酰胺键、碳原子数1至10的直链或支链亚烷基或可经取代的亚苯基、或者由它们的组合构成的二价基团，Q3表示包含1,2,3-三唑环骨架的二价有机基团，m1及m2各自独立地表示1至200的整数，n各自独立地表示1至10的整数。
2.带配体的基体，其表面的至少一部分经包含显示细胞非粘附性的结构单元和含有配体的结构单元的聚合物(P2)被覆。
3.如权利要求1或2所述的带配体的基体，其中，所述配体选自由肽、抗体、蛋白质、及低分子化合物组成的组。
4.如权利要求3所述的带配体的基体，其中，所述肽包含Gln-Gln-Gly-Trp-Phe的序列。
5.基体，其表面的至少一部分经包含显示细胞非粘附性的结构单元和显示细胞粘附性的结构单元的聚合物(P1)被覆。
6.如权利要求1～5中任一项所述的基体，其用于细胞分离。
7.如权利要求1～5中任一项所述的基体，其用于细胞培养。
8.基体，其表面的至少一部分经包含显示细胞非粘附性的结构单元和含有碳-碳三键或叠氮基的结构单元的聚合物(P4)被覆。
9.基体，其在表面的至少一部分被覆有包含下述式(1a)及式(1c)表示的结构单元的聚合物(P5)，
[化学式2]
式中，R1、R2、X、Y、Q1、Q2、m1、m2、及n与权利要求1相同，Z表示包含碳-碳三键或叠氮基的基团。
10.如权利要求1～9中任一项所述的基体，其中，所述基体为皿、基板、多孔质膜、粒子或过滤器。
11.组合物，其包含含有下述式(1a)及式(1c)表示的结构单元的聚合物(P5)、及溶剂，
[化学式3]
式中，R1、R2、X、Y、Z、Q1、Q2、m1、m2、及n与权利要求9相同。
<...
【专利技术属性】
技术研发人员：北野博巳，中路正，臼井友辉，西野泰斗，岸冈高广，
申请(专利权)人：国立大学法人富山大学，日产化学株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。