胎盘植入性疾病标志物制造技术

本发明专利技术涉及分子诊断医疗领域，具体而言，涉及一种胎盘植入性疾病标志物。该标志物具体为miR‑518a‑3p。miR‑518a‑3p可以用于胎盘植入性疾病诊断，具有重要的临床应用价值。

Placental implantable disease markers

【技术实现步骤摘要】
胎盘植入性疾病标志物
本专利技术涉及分子诊断医疗领域，具体而言，涉及一种胎盘植入性疾病标志物。
技术介绍
胎盘植入性疾病(placentaaccretaspectrumdisorders，PAS)是一种胎盘绒毛异常黏附或侵入子宫肌层的妊娠并发症。据统计，PAS在全球孕产妇中的发生率为0.01％至1.1％，其死亡率约为0.05％，严重危害母胎生命安全。研究表明，前置胎盘和剖宫产手术是导致PAS发病的重要独立因素，其发生率增加是导致近年来发病率逐渐上升的重要因素之一。胎盘植入性疾病的发生发展是一个复杂的多因素过程，目前研究表明蜕膜缺失、母体血管重塑异常和绒毛外滋养细胞侵蚀是其发病的主要机制之一，其中胎盘发生侵蚀性改变是胎盘植入的前期病理基础。胎盘发生侵蚀性改变可以通过外周血中的各类生物标志物进行检测,从而判定体内胎盘生长状态。生物标志物包括血清蛋白、血清小分子和游离核酸等种类，其中miRNA是一类内源基因编码的长度约为19～22个核苷酸的非编码单链小RNA分子，主要通过与mRNA的3’UTR结合以调节基因的表达。它们可通过调节参与细胞分化、粘附、迁移、凋亡以及血管生成相关基因的表达以影响胎盘发育。有报道发现血清甲胎蛋白(AFP)与胎盘植入有明显相关性，但是其特异性不高，尚未开发成临床可以应用的检测试剂盒。在孕早期分析孕产妇血浆中的胎盘游离mRNA可以预测胎盘植入，但是对于技术手段要求很高，目前尚无进一步应用。此外，有研究报道血浆中胎儿游离DNA在胎盘植入孕产妇外周血中升高，但是临床意义并不明确。因此，截至目前，并没有成熟的采用母体血清中miRNA分子对罹患胎盘植入的孕产妇进行产前检测的方法。
技术实现思路
本专利技术基于相对于正常分娩孕产妇，在胎盘植入孕产妇中差异表达的miRNA进行了特异性的鉴定，进而发现miR-518a-3p在胎盘植入性疾病孕产妇样品(特别是外周血样品)中显著低表达，表明miR-518a-3p是特异性的胎盘植入性疾病标志物。具体的，本专利技术涉及miR-518a-3p的定量检测剂在制备用于胎盘植入性疾病诊断的试剂或试剂盒中的应用，其中受试者样品中降低的miR-518a-3p的表达量是发生胎盘植入性疾病的指征。每一例胎盘植入患者对于产科医师都是挑战，在明确诊断胎盘植入后进行多学科协作下的充分围手术期处理对于减少严重的产妇和新生儿并发症尤为重要。因此，胎盘植入的产前诊断是产科临床医师首要关注的问题。影像学诊断是目前临床上产前筛查PAS的重要手段之一，一般采用孕妇胎盘植入高危因素，结合产前的B超或磁共振成像进行诊断。但是，此类影像学诊断成本昂贵，对操作技术水平要求较高，而且具有一定局限性。例如，产前超声不能明确胎盘组织植入的深度，而且对于植入部位较低和子宫后壁的胎盘植入病例假阴性较高；同时造影剂不能在孕妇身上使用，限制了临床MRI的应用。本专利技术发现了一种新的胎盘植入性疾病标志物miR-518a-3p，其可以方便地进行检测，并可以协助现有的临床检测手段实现更灵敏、更精确的方法来识别胎盘植入疾病。附图说明为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术一个实施例中在所有进行产前辅助诊断胎盘植入的孕产妇中检测获得的miR-518a-3p的表达量；CON：正常分娩孕产妇，PAS：病理确诊患有胎盘植入的孕妇；表达值在两组人群中有显著差异(p<0.01)；图2为本专利技术一个实施例中miR-518a-3p预测孕产妇患病风险指数的ROC曲线和AUC值。具体实施方式现将详细地提供本专利技术实施方式的参考，其一个或多个实例描述于下文。提供每一实例作为解释而非限制本专利技术。实际上，对本领域技术人员而言，显而易见的是，可以对本专利技术进行多种修改和变化而不背离本专利技术的范围或精神。例如，作为一个实施方式的部分而说明或描述的特征可以用于另一实施方式中，来产生更进一步的实施方式。因此，旨在本专利技术覆盖落入所附权利要求的范围及其等同范围中的此类修改和变化。本专利技术的其它对象、特征和方面公开于以下详细描述中或从中是显而易见的。本领域普通技术人员应理解本讨论仅是示例性实施方式的描述，而非意在限制本专利技术更广阔的方面。本专利技术涉及miR-518a-3p作为胎盘植入性疾病标志物的应用，具体的，涉及miR-518a-3p的定量检测剂在制备用于胎盘植入性疾病诊断的试剂或试剂盒中的应用，其中受试者样品中降低的miR-518a-3p的表达量是发生胎盘植入性疾病的指征。在本专利技术中，胎盘植入性疾病被定义为由于部分或全部蜕膜基底层缺失，部分乃至整个胎盘绒毛组织异常种植于子宫壁层的病理状态。胎盘绒毛组织可能不仅仅是侵入到子宫肌层，而且可以穿透子宫壁侵入到子宫浆膜层外乃至膀胱组织，使得胎盘无法与子宫剥离。本专利技术中胎盘植入性疾病可包括粘连性胎盘(placentaaccreta)、植入性胎盘(placentaincreta)以及穿透性胎盘(placentapercreta)疾病。在本专利技术中用作标志物的miR-518a-3p预期包括其全长核糖核苷酸序列，或天然存在的变体，或全长序列及变体的片段，特别是可被检测并确定具体序列的片段，更优选为能够在乳腺组织中与其他RNA序列相区分的片段。优选地包含所述全长核糖核苷酸序列的至少7、8、9、10、11、12、15或20个连续的核糖核苷酸。“天然存在的变体”应被理解为，高等动物的基因通常伴有高频率的多态性。也存在许多在剪接过程中产生含有相互不同的氨基酸序列的同种型的分子。与癌症相关疾病相关的具有与标志物基因的活性相似的活性的任何基因包括在标志物基因中，即使其由于多态性或为同种型而具有核苷酸序列差异。本领域的技术人员可认识到，由细胞释放的核糖核苷酸或存在于胞外基质中的核糖核苷酸可能受到损害(例如，在炎症过程中)，且可被降解或切割成这样的片段。如熟练的技术人员将明白的，mRNA或其片段也可以作为复合物的部分而存在。这样的复合物也可以用作本专利技术意义上的标志物。因而，在替代方案中，所述试剂或试剂盒也可用于检测这样的复合物，这同样在本专利技术的保护范围内。在本文中的一些方法中，期望鉴定存在于样品中的miRNA。在一些实施方式中，所述定量检测剂通过选自如下的方法检测miR-518a-3p：原位杂交、实时荧光定量PCR、数字PCR、荧光染料法、microRNA芯片法、共振光散射法以及生物质谱法。在一些实施方式中，所述定量检测剂为引物和/或探针；该探针通常能够特异性结合miR-518a-3p。RNA的定量检测剂可选用本领域技术人员所公知的试剂，例如能够与该RNA杂交，且标记有荧光标记的核酸等；常见情况下RNA的检测剂可以选自RT-PCR的引物，以及用于扩增RT-PCR的产物——cDNA的引物。在一本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.miR-518a-3p的定量检测剂在制备用于胎盘植入性疾病诊断的试剂或试剂盒中的应用，其中受试者样品中降低的miR-518a-3p的表达量是发生胎盘植入性疾病的指征。/n

【技术特征摘要】
1.miR-518a-3p的定量检测剂在制备用于胎盘植入性疾病诊断的试剂或试剂盒中的应用，其中受试者样品中降低的miR-518a-3p的表达量是发生胎盘植入性疾病的指征。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述定量检测剂通过选自如下的方法检测miR-518a-3p：原位杂交、实时荧光定量PCR、数字PCR、荧光染料法、microRNA芯片法、共振光散射法以及生物质谱法。


3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述定量检测剂为引物和/或探针。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述引物和/或探针具有可检测的标记。


5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述标记选自荧光团、比色标记、量子点、生物素、用于拉...

【专利技术属性】
技术研发人员：余波澜，
申请(专利权)人：余波澜，
类型：发明
国别省市：广东;44