抗4-1BB抗体及其制备和使用方法技术

本申请提供了抗4‑1BB单克隆抗体、其抗原结合部分、其治疗组合物和/或编码其的核酸，以及它们在治疗癌症和其他T细胞功能障碍中上调T细胞功能以增强细胞介导的免疫应答的用途。

Anti-4-1BB antibody and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗4-1BB抗体及其制备和使用方法相关申请的交叉引用本申请要求2017年8月28日提交的美国临时专利申请No.62551065、2017年8月28日提交的美国临时专利申请No.62551032、2017年6月25日提交的美国临时专利申请No.62524554、2017年6月25日提交的美国临时专利申请No.62524557、2017年6月25日提交的美国临时专利申请No.62524558、2017年8月15日提交的美国临时专利申请No.62545603、2017年8月28日提交的美国临时专利申请62551032和2017年8月28日提交的美国临时专利申请No.62551035，其全部公开内容通过引用明确地并入本文。
本公开一般涉及抗体
，更具体地涉及抗4-1BB抗体的制备和使用，以及所述抗体在癌症治疗和疗法中的应用。
技术介绍
癌症是全世界的主要健康问题。仅在美国，据估计，2016年就诊断出了1,685,210例新癌症病例，并有595,690例死亡(http:/www.cancer.gov)。因此，任何可降低癌症严重性或死亡率的药剂都是理想的。在免疫系统中，通过由抗原呈递细胞(APC)呈递的外源抗原肽通过T细胞受体(TCR)递送的初级信号，可以活化静息T细胞以应答抗原。除了该初级信号之外，还存在进一步影响T细胞应答的次级正、负共刺激信号。完整的T细胞激活需要次级阳性信号(Lafferty等人，Ausl.J.Exp.Biol.Med.Sci.5327-42(1975))。负的次级信号可导致T细胞抑制和耐受。4-1BB是具有活化T细胞能力的共刺激免疫检查点分子。4-1BB，也称为CD137，肿瘤坏死因子受体超家族成员9(TNFRSF9)，由淋巴细胞活化(ILA)诱导，是肿瘤坏死因子(TNF)受体家族的成员。据报道CD137的交联增强T细胞增殖、IL-2分泌、存活和细胞溶解活性。此外，它可以增强免疫活性以消除小鼠中的肿瘤。辉瑞公司的Utomilumab(PF-05082566)靶向4-1BB，与默克公司的Keytruda结合使用时，可在一项小型临床试验中刺激对癌症的更强免疫系统攻击(https://www.reuters.com/article/us-health-cancer-pfizer-immunotherapy-idUSKCN0Y92W2)。PF-05082566正在进行七项临床试验。(www.clinicaltrials.gov)。
技术实现思路
本公开尤其提供了抗4-1BB单克隆抗体、其抗原结合部分、其治疗组合物和/或编码其的核酸，以及它们在治疗癌症和其他T细胞功能障碍病症中上调T细胞的功能以增强细胞介导的免疫应答的用途。在一个实施方案中，提供了特异性结合人或食蟹猴4-1BB的分离的单克隆抗体(mAb)或其抗原结合片段。在一个实施方案中，分离的mAb或抗原结合片段包含与SEQIDNO:4、SEQIDNO:8、SEQIDNO:12、SEQIDNO:16、SEQIDNO:20、SEQIDNO:24、SEQIDNO:28、SEQIDNO:32、SEQIDNO:36、SEQIDNO:40、SEQIDNO:44、SEQIDNO:48、SEQIDNO:52、SEQIDNO:56、SEQIDNO:60、SEQIDNO:64、SEQIDNO:68、SEQIDNO:72、SEQIDNO:76、SEQIDNO:80、SEQIDNO:84、SEQIDNO:88、SEQIDNO:88、SEQIDNO:92、SEQIDNO:96、SEQIDNO:100、SEQIDNO:104、SEQIDNO:108、SEQIDNO:112、SEQIDNO:116、SEQIDNO:120、SEQIDNO:124、SEQIDNO:128、SEQIDNO:132、SEQIDNO:136、SEQIDNO:140、SEQIDNO:144、SEQIDNO:148、SEQIDNO:152、SEQIDNO:156、SEQIDNO:160、SEQIDNO:164、SEQIDNO:168、SEQIDNO:172、SEQIDNO:176、SEQIDNO:180、SEQIDNO:184、SEQIDNO:188、SEQIDNO:192、SEQIDNO:196、SEQIDNO:200、SEQIDNO:204、SEQIDNO:208、SEQIDNO:212、SEQIDNO:216、SEQIDNO:220、SEQIDNO:224、SEQIDNO:228、SEQIDNO:232、SEQIDNO:236、SEQIDNO:240、SEQIDNO:244、SEQIDNO:248、SEQIDNO:252、SEQIDNO:256、SEQIDNO:260、SEQIDNO:264、SEQIDNO:268或SEQIDNO:272具有同源性百分比的氨基酸序列。该同源性百分比不小于70％、80％、90％、95％、98％或99％。在一个实施方案中，分离的mAb或抗原结合片段对4-1BB的结合亲和力Kd不大于30nM、40nM，50nM、60nM、70nM、80nM、90nM或100nM。在一个实施方案中，分离的mAb或抗原结合片段表现出一种或多种功能特性，例如但不限于与人或食蟹猴4-1BB的高亲和力结合、抑制人或食蟹猴4-1BB活性、诱导细胞凋亡、调节EGFR信号途径、上调EMT基因、增强T细胞活化、刺激抗体应答、逆转免疫抑制细胞的抑制功能或其组合。在一个实施方案中，免疫抑制细胞包括调节细胞。在一个实施方案中，分离的mAb或抗原结合片段通过包括T细胞增殖、IFN-γ和/或IL-2分泌或其组合的机制或途径增强T细胞活化。在一些实施方案中，分离的mAb或抗原结合片段可包括人构架区。在一个实施方案中，分离的mAb或抗原结合片段可包括人源化抗体、嵌合抗体或重组抗体。在一个实施方案中，分离的mAb或抗原结合片段是IgG。在一个实施方案中，抗原结合片段可包括Fv、Fab、F(ab')2、scFV或scFV2片段。在一个实施方案中，分离的mAb可以是双特异性抗体、三特异性抗体或多特异性抗体。在一个实施方案中，分离的mAb或抗原结合片段可包括IgG1重链。在一个实施方案中，IgG1重链包含与SEQIDNO:7、SEQIDNO:15、SEQIDNO:23、SEQIDNO:31、SEQIDNO:39、SEQIDNO:47、SEQIDNO:55、SEQIDNO:63、SEQIDNO:71、SEQIDNO:79、SEQIDNO:87、SEQIDNO:95、SEQIDNO:103、SEQIDNO:111、SEQIDNO:119、SEQIDNO:127、SEQIDNO:135、SEQIDNO:143、SEQIDNO:151、SEQIDNO:159、SEQIDNO:167、SEQIDNO:175、SEQIDNO:183、SEQIDNO:191、SEQIDNO:199、SEQIDNO:207、SEQIDNO:215、SEQIDNO:223、SEQIDNO:2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种特异性结合人或食蟹猴4-1BB的分离的单克隆抗体(mAb)或其抗原结合片段，其包含与SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:20、SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:44、SEQ IDNO:48、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:68、SEQ IDNO:72、SEQ ID NO:76、SEQ ID NO:80、SEQ ID NO:84、SEQ ID NO:88、SEQ ID NO:88、SEQ IDNO:92、SEQ ID NO:96、SEQ ID NO:100、SEQ ID NO:104、SEQ ID NO:108、SEQ ID NO:112、SEQ ID NO:116、SEQ ID NO:120、SEQ ID NO:124、SEQ ID NO:128、SEQ ID NO:132、SEQ IDNO:136、SEQ ID NO:140、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:148、SEQ ID NO:152、SEQ ID NO:156、SEQ ID NO:160、SEQ ID NO:164、SEQ ID NO:168、SEQ ID NO:172、SEQ ID NO:176、SEQ IDNO:180、SEQ ID NO:184、SEQ ID NO:188、SEQ ID NO:192、SEQ ID NO:196、SEQ ID NO:200、SEQ ID NO:204、SEQ ID NO:208、SEQ ID NO:212、SEQ ID NO:216、SEQ ID NO:220、SEQ IDNO:224、SEQ ID NO:228、SEQ ID NO:232、SEQ ID NO:236、SEQ ID NO:240、SEQ ID NO:244、SEQ ID NO:248、SEQ ID NO:252、SEQ ID NO:256、SEQ ID NO:260、SEQ ID NO:264、SEQ IDNO:268或SEQ ID NO:272具有至少90％同一性的氨基酸序列。/n...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170625 US 62/524,554;20170625 US 62/524,557;20171.一种特异性结合人或食蟹猴4-1BB的分离的单克隆抗体(mAb)或其抗原结合片段，其包含与SEQIDNO:4、SEQIDNO:8、SEQIDNO:12、SEQIDNO:16、SEQIDNO:20、SEQIDNO:24、SEQIDNO:28、SEQIDNO:32、SEQIDNO:36、SEQIDNO:40、SEQIDNO:44、SEQIDNO:48、SEQIDNO:52、SEQIDNO:56、SEQIDNO:60、SEQIDNO:64、SEQIDNO:68、SEQIDNO:72、SEQIDNO:76、SEQIDNO:80、SEQIDNO:84、SEQIDNO:88、SEQIDNO:88、SEQIDNO:92、SEQIDNO:96、SEQIDNO:100、SEQIDNO:104、SEQIDNO:108、SEQIDNO:112、SEQIDNO:116、SEQIDNO:120、SEQIDNO:124、SEQIDNO:128、SEQIDNO:132、SEQIDNO:136、SEQIDNO:140、SEQIDNO:144、SEQIDNO:148、SEQIDNO:152、SEQIDNO:156、SEQIDNO:160、SEQIDNO:164、SEQIDNO:168、SEQIDNO:172、SEQIDNO:176、SEQIDNO:180、SEQIDNO:184、SEQIDNO:188、SEQIDNO:192、SEQIDNO:196、SEQIDNO:200、SEQIDNO:204、SEQIDNO:208、SEQIDNO:212、SEQIDNO:216、SEQIDNO:220、SEQIDNO:224、SEQIDNO:228、SEQIDNO:232、SEQIDNO:236、SEQIDNO:240、SEQIDNO:244、SEQIDNO:248、SEQIDNO:252、SEQIDNO:256、SEQIDNO:260、SEQIDNO:264、SEQIDNO:268或SEQIDNO:272具有至少90％同一性的氨基酸序列。


2.一种特异性结合人或食蟹猴4-1BB的分离的单克隆抗体(mAb)或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包含与SEQIDNO:4、SEQIDNO:8、SEQIDNO:12、SEQIDNO:16、SEQIDNO:20、SEQIDNO:24、SEQIDNO:28、SEQIDNO:32、SEQIDNO:36、SEQIDNO:40、SEQIDNO:44、SEQIDNO:48、SEQIDNO:52、SEQIDNO:56、SEQIDNO:60、SEQIDNO:64、SEQIDNO:68、SEQIDNO:72、SEQIDNO:76、SEQIDNO:80、SEQIDNO:84、SEQIDNO:88、SEQIDNO:88、SEQIDNO:92、SEQIDNO:96、SEQIDNO:100、SEQIDNO:104、SEQIDNO:108、SEQIDNO:112、SEQIDNO:116、SEQIDNO:120、SEQIDNO:124、SEQIDNO:128、SEQIDNO:132、SEQIDNO:136、SEQIDNO:140、SEQIDNO:144、SEQIDNO:148、SEQIDNO:152、SEQIDNO:156、SEQIDNO:160、SEQIDNO:164、SEQIDNO:168、SEQIDNO:172、SEQIDNO:176、SEQIDNO:180、SEQIDNO:184、SEQIDNO:188、SEQIDNO:192、SEQIDNO:196、SEQIDNO:200、SEQIDNO:204、SEQIDNO:208、SEQIDNO:212、SEQIDNO:216、SEQIDNO:220、SEQIDNO:224、SEQIDNO:228、SEQIDNO:232、SEQIDNO:236、SEQIDNO:240、SEQIDNO:244、SEQIDNO:248、SEQIDNO:252、SEQIDNO:256、SEQIDNO:260、SEQIDNO:264、SEQIDNO:268或SEQIDNO:272具有至少98％同一性的氨基酸序列。


3.根据权利要求1所述的分离的mAb或抗原结合片段，其对人或食蟹猴4-1BB具有Kd不大于70nM的结合亲和力。


4.根据权利要求1所述的分离的mAb或抗原结合片段，其显示一种或多种选自以下的功能特性：与人或食蟹猴4-1BB的高亲和力结合、抑制人或食蟹猴4-1BB活性、增强T细胞活化、存活和细胞溶解活性、刺激抗体应答、逆转免疫抑制细胞的抑制功能或其组合。


5.根据权利要求4所述的分离的mAb或抗原结合片段，其中所述免疫抑制细胞包括调节细胞。


6.根据权利要求4所述的分离的mAb或抗原结合片段，其中所述增强T细胞活化包括T细胞增殖、IFN-γ和/或IL-2分泌或其组合。


7.根据权利要求1所述的分离的mAb或其抗原结合片段，还包括人构架区。


8.根据权利要求1所述的分离的mAb或其抗原结合片段，其中所述分离的mAb是人源化抗体、嵌合抗体或重组抗体。


9.根据权利要求1所述的分离的mAb或其抗原结合片段，其中所述分离的mAb是IgG。


10.根据权利要求1所述的分离的mAb或其抗原结合片段，其中所述抗原结合片段是Fv、Fab、F(ab')2、scFV或scFV2片段。


11.根据权利要求1所述的分离的mAb或其抗原结合片段，其中所述分离的mAb是双特异性抗体、三特异性抗体或多特异性抗体。


12.一种根据权利要求1所述的分离的mAb或其抗原结合片段的IgG1重链，其包含与SEQIDNO:7、SEQIDNO:15、SEQIDNO:23、SEQIDNO:31、SEQIDNO:39、SEQIDNO:47、SEQIDNO:55、SEQIDNO:63、SEQIDNO:71、SEQIDNO:79、SEQIDNO:87、SEQIDNO:95、SEQIDNO:103、SEQIDNO:111、SEQIDNO:119、SEQIDNO:127、SEQIDNO:135、SEQIDNO:143、SEQIDNO:151、SEQIDNO:159、SEQIDNO:167、SEQIDNO:175、SEQIDNO:183、SEQIDNO:191、SEQIDNO:199、SEQIDNO:207、SEQIDNO:215、SEQIDNO:223、SEQIDNO:231、SEQIDNO:239、...

【专利技术属性】
技术研发人员：奥勒·奥尔森，夏冬，戴维·耶利曼，布莱恩·科瓦切维奇，比尔·布雷迪，布莱尔·伦肖，高泽人，朱义，
申请(专利权)人：西雅图免疫公司，四川百利药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国;US