双特异性四价抗体及其制造和使用方法技术

一种双特异性四价抗体，其包含具有一对重链和一对轻链的IgG，和连接到重链或轻链的C或N端的两个scFv组分。所述双特异性四价抗体可具有对EGFR家族中两个不同成员的结合特异性。

【技术实现步骤摘要】
双特异性四价抗体及其制造和使用方法本申请是2015年12月19日提交的中国专利技术专利申请(申请号：201580036408.7；专利技术名称：双特异性四价抗体及其制造和使用方法)的分案申请。相关专利申请的交叉参考本申请要求2014年12月22号提交的美国临时申请第62095348号，名称为“双特异性抗体”的优先权，该文件全部内容在此引入作为参考。序列表与本申请相关联的序列表是以文本格式代替纸件副本的形式来提供，并且以引用方式并入本说明书中。包含所述序列表的文本文件名是序列表_ST25_0003PCT2.txt。所述文本文件大约227KB，在2015年12月18号创建，并经由EFS-Web进行电子提交。
本公开总体涉及抗体治疗试剂
，尤其涉及针对EGFR家族两个不同成员的双特异性四价抗体。
技术介绍
ErbB/HER受体家族成员例如EGFR、HER2、HER3、HER4的过量表达和/或失调，已经表明在癌症的肿瘤发生中起重要作用。EGFR或者HER2的突变和扩增产生异常生长信号，其激活促成肿瘤发生的下本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种双特异性四价抗体，所述双特异性四价抗体包含：/n两条IgGl重链；/n两条κ轻链；以及/n两个单链Fv(scFv)结构域；/n其中所述两条IgGl重链和κ轻链形成对EGFR家族的第一成员具有结合特异性的IgG部分；/n其中所述两个scFv结构域对EGFR家族的第二成员具有结合特异性，且每个scFv结构域通过具有(gly-gly-gly-gly-ser)

【技术特征摘要】
20141222 US 62/095,3481.一种双特异性四价抗体，所述双特异性四价抗体包含：
两条IgGl重链；
两条κ轻链；以及
两个单链Fv(scFv)结构域；
其中所述两条IgGl重链和κ轻链形成对EGFR家族的第一成员具有结合特异性的IgG部分；
其中所述两个scFv结构域对EGFR家族的第二成员具有结合特异性，且每个scFv结构域通过具有(gly-gly-gly-gly-ser)n的氨基酸序列的连接体连接到所述IgGl重链中任一个的C-端，以提供IgGl-连接体连接，其中n是至少1的整数；以及
其中每个单链Fv结构域具有N端-重链可变区-接头-轻链可变区-C端或N-端-轻链可变区-接头-重链可变区-C-端的结构顺序，其中所述接头由(gly-gly-gly-gly-ser)m的氨基酸序列组成，其中m是至少3的整数。


2.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中n是1至10的整数。


3.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中m是3、4、5、或6。


4.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述IgGl重链中至少一个是人源化或人IgGl重链。


5.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述两个IgGl重链是人源化或人IgGl重链。


6.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述κ轻链中至少一个是人源化或人κ轻链。


7.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中两条κ轻链均是人源化或人κ轻链。


8.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述IgG部分具有对HER3的结合特异性并且所述单链Fv结构域同时具有对EGFR的结合特异性。


9.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述IgG部分具有对EGFR的结合特异性并且所述单链Fv结构域同时具有对HER3的结合特异性。


10.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述IgGl重链中至少一个的所述C端缺失一个氨基酸残基。


11.根据权利要求10所述的双特异性四价抗体，其中所述氨基酸残基是赖氨酸。


12.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述IgGl-连接体连接能抵抗蛋白酶活性。


13.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述IgGl重链中至少一个包含在CH3结构域中的两个突变，其中所述两个突变回复成人CH3结构域中的通用残基。


14.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中轻链可变区中至少一个包含含有SEQIDNO104的氨基酸序列(轻链可变轻链氨基酸序列)。


15.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中重链可变区中至少一个包含含有SEQIDNO109的氨基酸序列。


16.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述IgGl重链、连接体和单链Fv结构域具有包含SEQIDNO108的氨基酸序列。


17.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述κ轻链中至少一个包含含有SEQIDNO103的氨基酸序列。


18.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述IgG部分具有对HER3的结合特异性，并且所述单链Fv结构域具有对EGFR的结合特异性；

【专利技术属性】
技术研发人员：高泽人，菲尔·谭，布莱恩·科瓦切维奇，布莱尔·伦肖，杰弗里·阿达莫，麦雅丝，卓识，陈澜，朱义，
申请(专利权)人：西雅图免疫公司，四川百利药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国;US